【摘要】：背景與目的:由脂肪組織分泌的脂聯(lián)素是一個脂肪因子,它具有感應(yīng)胰島素、抗糖尿病、抗炎和抗腫瘤等活性。已經(jīng)報道脂聯(lián)素在肝癌、乳腺癌、前列腺癌等癌中具有抗腫瘤的作用,但其對于胰腺癌發(fā)生發(fā)展的作用卻不清楚。我們首次研究了脂聯(lián)素對于胰腺癌發(fā)展的影響,并詳細闡述了相關(guān)分子機制。方法:我們利用脂聯(lián)素敲除(APN KO)鼠和正常野生型(WT)鼠建立胰腺原位或皮下腫瘤模型,收集APN KO和WT鼠的腫瘤組織,分析腫瘤大小和重量。通過組織病理學(xué)、免疫組織化學(xué)、免疫印跡以及實時定量PCR等手段,分析組織病理及相關(guān)分子。此外,體外我們還利用人或鼠的外源純化的脂聯(lián)素蛋白直接處理人或鼠胰腺癌細胞系,檢測其凋亡和增殖,以及相關(guān)信號分子。結(jié)果:脂聯(lián)素缺失后會顯著降低H7和Panc02小鼠胰腺癌細胞的胰腺成瘤。外源脂聯(lián)素會顯著抑制人或鼠胰腺癌細胞的凋亡。進一步研究發(fā)現(xiàn),脂聯(lián)素通過其受體1活化了AMP活化蛋白激酶(AMPK)、NAD依賴性去乙�；竤irtuin-1(Sirt1)和過氧化物酶體增殖活化受體γ共激活因子1α(PGC1α)。脂聯(lián)素上調(diào)Sirt1,而Sirt1可以去乙酰化PGC1α。PGC1α去乙酰化會上調(diào)一系列線粒體基因的表達水平,重編程胰腺癌細胞的代謝。通過PGC1α/caspase 3,脂聯(lián)素能夠保護線粒體膜功能的完整性,從而展現(xiàn)出抗凋亡的作用。脂聯(lián)素對于傳統(tǒng)的AKT/GSK3β信號沒有作用,但是會上調(diào)β-catenin和cyclin D1水平。結(jié)論:在胰腺癌中,脂聯(lián)素具有抗凋亡的能力。這些新穎的發(fā)現(xiàn)揭示了脂聯(lián)素具有促進胰腺癌發(fā)展的非常規(guī)角色,強調(diào)了脂聯(lián)素在不同腫瘤的病理形成中具有不同的影響。
【圖文】：

Excel 2007 或 IBM SPSS Statistics 19 分析，并用 GraphPad Prism 統(tǒng)計軟件以均值± SEM 來呈現(xiàn)的。以 p<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。1.2 結(jié)果1.2.1 脂聯(lián)素缺失后會抑制胰腺癌的發(fā)展小鼠胰腺癌細胞系 H7和 Panc02 來源于 C57BL/6 背景[27, 28]。為了弄清脂聯(lián)素在胰腺癌生長中的調(diào)節(jié)作用，我們利用脂聯(lián)素敲除鼠和野生型鼠胰腺原位接種小鼠胰腺癌細胞 H7。兩周后麻醉處死小鼠，分離測量腫瘤的大小與重量。我們發(fā)現(xiàn)野生型鼠中的腫瘤藥比脂聯(lián)素敲除鼠中的腫瘤顯著更大和更重（體積：1:7，重量：1:2） （圖 1 A 和 B）。為了進 步確認脂聯(lián)素與胰腺癌的關(guān)系，我們又利用脂聯(lián)素敲除鼠和野生型鼠皮下接種小鼠胰腺癌細胞系 H7 和Panc02。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，H7 和 Panc02 細胞都能在野生型和脂聯(lián)素敲除鼠中生長成瘤，但是脂聯(lián)素敲除鼠中的腫瘤大小與體積要比野生型鼠中皮下瘤要小并且輕很多，充分說明脂聯(lián)素能夠促進胰腺癌體內(nèi)生長（圖 1 C、D、E 和 F）。我們利用實時

圖 2 脂聯(lián)素缺失可緩解小鼠原位胰腺癌轉(zhuǎn)移。5×105個 H7細胞原位注射到每只小鼠胰腺內(nèi)（WT：n=8，KO：n=6）。植瘤兩周后處死小鼠，，記錄腹水和腫瘤轉(zhuǎn)移情況。（A，B和C）拍照顯示腫瘤向腎（A）、肺（B）和腸（C）轉(zhuǎn)移的情況。（D）H&E 染色顯示胰腺癌向腎臟和肺轉(zhuǎn)移的情況。比例尺，100 μm。向腸、肺以及腎轉(zhuǎn)移（圖 2 A、B 和 C）。腎和肺組織切片 H&E 染色更直觀地觀察到這些結(jié)果 （圖 2 D）。在這些結(jié)果的基礎(chǔ)上，我們可以總結(jié)出脂聯(lián)素對胰腺癌生長和轉(zhuǎn)移具有不同尋常的調(diào)節(jié)作用。1.2.3 脂聯(lián)素抑制胰腺癌的凋亡已經(jīng)有文獻報道提出，脂聯(lián)素能夠通過 些非常規(guī)途徑來降低心臟和胰腺的凋亡[20, 26, 30]。鑒于脂聯(lián)素具有促進胰腺癌細胞生長的作用，我們想研究弄清脂聯(lián)素是否通過抑制胰腺癌細胞凋亡來促進胰腺癌生長。Western blot 檢測發(fā)現(xiàn)，脂聯(lián)素能夠通過下調(diào) caspase 3 的活化水平來顯著抑制體內(nèi)胰腺癌的細胞凋亡（圖 3 A）。腫瘤切片的 TUNEL染色也說明脂聯(lián)素具有抑制胰腺癌細胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.9

【共引文獻】

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本文編號：2552574