【摘要】：肝癌作為最常見的惡性腫瘤之一,被稱為新世紀(jì)人類健康的第一殺手,已成為當(dāng)今世界上六大常見癌癥之一。在我國,近年來肝癌患者的比例也在逐年加大。目前臨床常用的手術(shù)、化療和放療等治療方法均會引起骨髓抑制、免疫力低下等各種毒副反應(yīng)。此外,腫瘤細(xì)胞自身可以通過減少藥物攝入量和降低藥物的活性等方式產(chǎn)生抗藥性。因此,亟待我們尋找和研發(fā)毒性低、藥效高的新型抗腫瘤藥物。海洋因其特有的生態(tài)環(huán)境,孕育出了紛繁的生物資源和多樣的生物物種,而這些海洋生物體內(nèi)均含有化學(xué)結(jié)構(gòu)獨(dú)特新穎、藥理活性高效多樣的天然化合物。褐藻多糖硫酸酯(英文名:Fucoidan)是海洋生物中特有的一種活性多糖,有諸多報(bào)道表明其擁有抗炎、抗腫瘤的功效,但是關(guān)于其在治療肝癌的機(jī)制方面的報(bào)道仍然比較少。據(jù)此,本文首先對褐藻多糖硫酸酯的抗癌功效進(jìn)行了檢測,然后在此基礎(chǔ)上對其抗癌機(jī)理進(jìn)行了系統(tǒng)性的研究。主要研究結(jié)果如下:1)Fucoidan能有效抑制人肝癌細(xì)胞增殖。不同濃度的Fucoidan作用于肝癌細(xì)胞HepG2、正常肝細(xì)胞L02以及肺腺癌細(xì)胞A549,24 h后MTT檢測發(fā)現(xiàn):Fucoidan可以濃度依賴性的抑制肝癌細(xì)胞和肺腺癌細(xì)胞的增殖,卻不影響正常肝細(xì)胞的生長增殖過程。而且Fucoidn對不同腫瘤細(xì)胞的抑制作用有差異,所以采用Fucodian治癌癥時(shí),需要結(jié)合癌癥類型具體分析。2)Fucoidan可以阻滯細(xì)胞周期的運(yùn)行并促進(jìn)其發(fā)生凋亡。幾種不同濃度的Fucoidan作用于肝癌HepG2細(xì)胞24 h后,通過PI染色以及流式細(xì)胞儀檢測其對細(xì)胞周期變化的影響,發(fā)現(xiàn)隨著藥物濃度的增加,停滯于G2/M期的細(xì)胞數(shù)目逐漸增多,說明Fucidan可以將肝癌細(xì)胞Hep G2阻滯在G2/M期;此外,采用4mg/mL的Fucoidan處理HepG2細(xì)胞24 h后,Hoechst染色發(fā)現(xiàn)HepG2細(xì)胞呈現(xiàn)出與凋亡相關(guān)的形態(tài)學(xué)特征。進(jìn)一步采用Annexin V-FITC/PI雙染和流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測證實(shí)Fucoidan能夠誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞發(fā)生凋亡,并表現(xiàn)出濃度依賴性。3)Fucoidan通過調(diào)節(jié)與細(xì)胞周期和凋亡相關(guān)的蛋白表達(dá)來達(dá)到抑制細(xì)胞增殖和促進(jìn)細(xì)胞凋亡的目的。RT-PCR結(jié)果顯示Fucoidan可以通過下調(diào)周期蛋白激酶CDK1和CDK2的轉(zhuǎn)錄量,抑制周期蛋白的活化過程,從而阻止細(xì)胞周期的正常運(yùn)行,進(jìn)而抑制了細(xì)胞的有絲分裂過程。此外,Fucoidan還可以通過抑制抗凋亡基因Bcl-2的轉(zhuǎn)錄,同時(shí)活化促凋亡基因Bax、p53的轉(zhuǎn)錄促進(jìn)肝癌Hep G2細(xì)胞發(fā)生凋亡。Western blot檢測結(jié)果進(jìn)一步表明Fucoidan促進(jìn)細(xì)胞凋亡是通過抑制Bcl-2的表達(dá),活化Bax和p53的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。本論文研究結(jié)果表明,褐藻多糖硫酸酯可以抑制肝癌細(xì)胞的生長增殖過程,這主要是通過對細(xì)胞周期進(jìn)行阻滯以及激活線粒體依賴的內(nèi)源性凋亡途徑來實(shí)現(xiàn)的。
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 孫莉莎;李琳;徐江平;;褐藻多糖的鎮(zhèn)靜催眠作用[J];中國臨床康復(fù);2006年03期

2 陳國慶;先宏;叢建波;王長振;李妍;吳可;孫存普;;褐藻多糖鐵對環(huán)磷酰胺致貧血小鼠的保護(hù)作用[J];解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào);2009年02期

3 張全斌,徐祖洪;褐藻多糖硫酸酯化學(xué)研究的進(jìn)展[J];中國海洋藥物;1996年04期

4 林必杰,林輝;褐藻多糖提取及在水溶性凝膠、膠漿制劑中的應(yīng)用[J];中草藥;1997年03期

5 彭波,許實(shí)波,許東暉,趙金華;褐藻多糖硫酸酯的抗凝和纖溶活性[J];中草藥;2001年11期

6 潘家祜,陳陽,常建杰,蔣樾廉,聶晶;褐藻多糖硫酸酯抗PAF作用研究[J];中國海洋藥物;2003年03期

7 李智恩,張全斌,牛錫珍,張虹,徐祖洪;褐藻多糖硫酸酯[J];精細(xì)與專用化學(xué)品;2003年02期

8 崔艷秋;羅鼎真;王曉民;;褐藻多糖硫酸酯的抗炎與抗氧化活性研究進(jìn)展[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);2008年12期

9 章義利;吳波拉;;褐藻多糖硫酸酯的藥理學(xué)研究進(jìn)展[J];海峽藥學(xué);2008年10期

10 馬莉莎;張明;;褐藻多糖硫酸酯的研究進(jìn)展[J];山東醫(yī)藥;2009年11期

相關(guān)會議論文 前8條

1 鞠建偉;商濱;陳超;張守信;靳韶華;劉雪霞;;褐藻多糖硫酸酯對人腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞的影響[A];第六次全國中西醫(yī)結(jié)合血瘀證及活血化瘀研究學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2005年

2 朱志翔;陳麗紅;任爽;周虹;張全斌;羅大力;;兩種不同分子質(zhì)量褐藻多糖硫酸酯抗凝血酶機(jī)制的差異[A];第七屆海峽兩岸心血管科學(xué)研討會論文集[C];2009年

3 汪東風(fēng);齊宏濤;薛長湖;林洪;;褐藻多糖稀土配合物—一種新型多功能生物制品研制初報(bào)[A];山東省海洋經(jīng)濟(jì)技術(shù)研究會2002年度學(xué)術(shù)會議論文集[C];2002年

4 楊麗麗;楊茜;王培勝;滕洪明;劉志超;楊奇;鄒向陽;;褐藻多糖硫酸酯分離純化及免疫調(diào)節(jié)作用研究[A];第三屆泛環(huán)渤海（七省二市）生物化學(xué)與分子生物學(xué)會——2012年學(xué)術(shù)交流會論文集[C];2012年

5 王晶;張全斌;金維華;牛錫珍;張虹;;低分子量褐藻多糖硫酸酯減輕腺嘌呤誘導(dǎo)的腎臟損傷[A];中國藻類學(xué)會第八次會員代表大會暨第十六次學(xué)術(shù)討論會論文摘要集[C];2011年

6 張甘霖;李萍;劉曉霓;韓曉;劉欣;梁代英;王笑民;楊國旺;于明薇;朱曉新;;褐藻多糖硫酸酯對快速老化小鼠SAMP8學(xué)習(xí)記憶障礙的改善作用[A];中國藥理學(xué)會第十一次全國學(xué)術(shù)會議�？痆C];2011年

7 張洪旭;張育琴;盧進(jìn);陳欣;;褐藻多糖硫酸酯治療慢性腎衰40例總結(jié)[A];第十一屆全國中西醫(yī)結(jié)合腎臟病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

8 陳曉琳;邢榮娥;于華華;劉松;秦玉坤;李鵬程;;殼聚糖用于褐藻多糖硫酸酯絮凝的研究[A];中國海洋湖沼學(xué)會第十次全國會員代表大會暨學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2012年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前7條

1 張文靜;兩種褐藻中褐藻多糖硫酸酯的結(jié)構(gòu)解析與活性研究[D];中國科學(xué)院研究生院(海洋研究所);2016年

2 徐穎婕;海帶低分子量褐藻多糖硫酸酯對糖尿病腎病的治療作用及機(jī)制研究[D];中國科學(xué)院研究生院(海洋研究所);2016年

3 孫佳;褐藻多糖對M2型巨噬細(xì)胞CCL22表達(dá)的影響與機(jī)制研究及外周血粒淋比作為腫瘤預(yù)后評價(jià)指標(biāo)的影響因素分析[D];山東大學(xué);2016年

4 王晶;海帶褐藻多糖硫酸酯的結(jié)構(gòu)、化學(xué)修飾與生物活性研究[D];中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2010年

5 Sadia Roshan;褐藻多糖硫酸酯和吉馬酮對幾種癌細(xì)胞的作用及機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2015年

6 呂亞峰;地錢素C和褐藻多糖對膠質(zhì)瘤微環(huán)境中血管生成的影響及機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2011年

7 金維華;褐藻中酸性多糖的結(jié)構(gòu)分析及神經(jīng)保護(hù)活性研究[D];中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 吳澤;海帶酶解液中褐藻多糖硫酸酯的提取分離工藝研究[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2015年

2 管佳;褐藻色素的浸出及褐藻多糖硫酸酯的溶劑萃取研究[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2016年

3 楊雪梅;褐藻多糖硫酸酯對人黑色素瘤A357系細(xì)胞增殖與凋亡功能的影響研究[D];西南醫(yī)科大學(xué);2016年

4 陳慧潔;褐藻多糖硫酸酯對肝癌細(xì)胞HepG2增殖和凋亡的影響及其作用機(jī)制的研究[D];華中科技大學(xué);2015年

5 張晶晶;注射用褐藻多糖硫酸酯的制備及理化性質(zhì)研究[D];中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2009年

6 徐宏亮;褐藻多糖對糖尿病小鼠血糖影響的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2009年

7 商濱;褐藻多糖硫酸酯對人腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞的影響[D];大連醫(yī)科大學(xué);2006年

8 劉憲麗;Fucoidan對小鼠肝癌Hca-F細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及免疫調(diào)節(jié)作用研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2011年

9 王雪妹;海帶褐藻多糖硫酸酯抗腎衰的機(jī)制研究[D];中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2014年

10 紀(jì)衛(wèi)華;褐藻多糖硫酸酯對新生大鼠缺氧缺血性損傷腦保護(hù)作用的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2005年

，

本文編號：2533718