發(fā)布時(shí)間：2019-09-03 19:40

【摘要】：目的:肝癌是我國(guó)最為常見的惡性腫瘤之一,但其腫瘤的復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致治療失敗的主要原因。Dynamin 3(DNM3)是一個(gè)新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因,全基因組檢測(cè)發(fā)現(xiàn)與正常組織比較,DNM3啟動(dòng)子甲基化水平在肝癌組織中增高,表達(dá)水平降低,而且DNM3表達(dá)高低和預(yù)后相關(guān)。DNM3在肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制未明,本課題擬從肝癌組織和癌旁非腫瘤組織中DNM3的mRNA表達(dá)水平研究入手,明確DNM3在組織中的表達(dá)情況以及與臨床病理之間的聯(lián)系,并進(jìn)一步探索DNM3在肝癌中的功能及其調(diào)控機(jī)制。方法:(1)以qRT-PCR方法檢測(cè)68例肝癌患者術(shù)后標(biāo)本中腫瘤組織和癌旁非腫瘤組織中DNM3的mRNA表達(dá),并利用SPSS 13.0軟件統(tǒng)計(jì)分析該68例肝癌患者DNM3的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系。(2)采用p IRES2-EGFP/DNM3真核表達(dá)載體上調(diào)肝癌細(xì)胞株Hep G2和Hep3B中DNM3的表達(dá)水平觀察其對(duì)肝癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。(3)運(yùn)用NO相關(guān)檢測(cè)試劑盒檢測(cè)上調(diào)DNM3后肝癌細(xì)胞中NOS和NO的變化,Western blot檢測(cè)上調(diào)DNM3后肝癌細(xì)胞中相關(guān)蛋白的變化。結(jié)果:(1)肝癌患者術(shù)后標(biāo)本中腫瘤組織DNM3基因的mRNA相對(duì)表達(dá)水平明顯低于癌旁非腫瘤組織(P0.0001),其中68例肝癌患者中76.5%(52/68)的患者腫瘤組織中DNM3表達(dá)水平低于其對(duì)應(yīng)的癌旁非腫瘤組織(P0.0001);DNM3在肝癌組織中的低表達(dá)與肝癌的轉(zhuǎn)移(P=0.001)和血管侵犯(P=0.047)相關(guān),而與其他臨床病理參數(shù)無(wú)明顯聯(lián)系。(2)上調(diào)DNM3表達(dá)能抑制肝癌細(xì)胞株的體外增殖、遷移侵襲及體內(nèi)成瘤能力,同時(shí)還可以促進(jìn)肝癌細(xì)胞凋亡和誘導(dǎo)細(xì)胞周期發(fā)生G0/G1期阻滯。(3)上調(diào)DNM3表達(dá)后肝癌細(xì)胞內(nèi)NO含量升高,增殖相關(guān)蛋白P53、P21表達(dá)升高,EMT相關(guān)蛋白表達(dá)量發(fā)生變化(如e-caderin蛋白表達(dá)升高和n-caderin蛋白表達(dá)下降),轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白MMP-9表達(dá)降低。結(jié)論:DNM3在肝癌組織中的表達(dá)明顯降低,表達(dá)水平與肝癌的腫瘤轉(zhuǎn)移和血管侵犯相關(guān);上調(diào)DNM3表達(dá)水平能抑制肝癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移能力;DNM3可能通過對(duì)NOS/NO/P53/P21和MMP-9信號(hào)通路的調(diào)控參與了肝癌的發(fā)生發(fā)展過程。
【圖文】：

DNM3在肝癌組織和癌旁非腫瘤組織中的mRNA表達(dá)（qRT-PCR,**P<0.01）

瓊脂糖電泳分析RT-PCR擴(kuò)增的DNM3基因
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.7

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 蔡婷;袁偉;;突觸內(nèi)吞關(guān)鍵蛋白Dynamin在小鼠耳蝸內(nèi)毛細(xì)胞中的表達(dá)研究[J];中華耳科學(xué)雜志;2014年04期

2 張慈柳;尹飛;楊治權(quán);何芳;陳晨;姜尚軍;彭鏡;;dynamin-1和磷酸化dynamin-1在內(nèi)側(cè)顳葉癲vN患兒及大鼠海馬組織中的表達(dá)[J];中國(guó)當(dāng)代兒科雜志;2013年02期

3 ;Interactions of chemical carcinogens and genetic variation in hepatocellular carcinoma[J];World Journal of Hepatology;2010年03期

4 Chien-Ru Liu;Chun-Nin Lee;Tze-Sian Chan;H Eugene Liu;;Targeting c-Myc as a novel approach for hepatocellular carcinoma[J];World Journal of Hepatology;2010年01期

，

本文編號(hào)：2531539