發(fā)布時(shí)間：2019-08-28 18:30

【摘要】：目的探討含Ⅰ型血小板反應(yīng)蛋白的解聚素金屬蛋白酶5(a disintegrin and metalloprotease with thrombospondinmotifs 5,ADAMTS-5)蛋白在食管癌組織中的表達(dá),對(duì)食管癌細(xì)胞增殖及遷移能力的影響,并分析其對(duì)患者預(yù)后影響的臨床意義。方法選取正常食管上皮細(xì)胞株(HEEC)和4株食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株(TE1、TE10、TE11以及Eca109),采用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)ADAMTS-5蛋白在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)。通過RNA干擾技術(shù)在食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株TE10中轉(zhuǎn)染ADAMTS-5-shRNA和Neg-shRNA后采用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)ADAMTS-5蛋白的表達(dá),四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法、劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)干擾ADAMTS-5表達(dá)對(duì)TE10細(xì)胞增殖以及遷移的影響。采用免疫組化法檢測(cè)2009-04-15-2012-11-20南通大學(xué)附屬醫(yī)院97例食管鱗癌組織中ADAMTS-5蛋白的表達(dá),分析其表達(dá)與患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果在食管鱗癌細(xì)胞株TE1、TE10、TE11和Eca109中ADAMTS-5蛋白相對(duì)表達(dá)量分別為2.10±0.06、5.70±0.21、4.50±0.32和4.60±0.39,明顯高于食管正常上皮細(xì)胞株HEEC蛋白相對(duì)表達(dá)量(1.10±0.07),其中在TE10中的表達(dá)強(qiáng)度最高。使用小干擾技術(shù)轉(zhuǎn)染TE10細(xì)胞株48h后,蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)結(jié)果顯示,以GAPDH為內(nèi)參照,未處理組、陰性對(duì)照組和干擾組的ADAMTS-5蛋白相對(duì)表達(dá)量分別為1.00±0.05、1.10±0.09和0.50±0.07,干擾組蛋白表達(dá)相比陰性對(duì)照組(P0.001)和未處理組(P0.001)明顯下降;MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染72h后,未處理組、陰性對(duì)照組和干擾組的增殖率分別為(100.00±10.02)%、(98.04±9.80)%和(72.19±12.24)%,干擾組相比陰性對(duì)照組(P0.001)和未處理組(P0.001)細(xì)胞增殖明顯抑制;在劃痕24h后,干擾組遷移率為(46.34±1.27)%,而陰性對(duì)照組為(73.17±1.54)%,干擾組遷移能力明顯抑制,t=40.33,P0.001;ADAMTS-5蛋白表達(dá)在97例食管鱗癌組織中的陽(yáng)性率為59.79%(58/97),明顯高于癌旁組織的28.87%(28/97),與分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期和浸潤(rùn)深度相關(guān)(P0.05),而與性別、年齡無(wú)關(guān)(P0.05)。58例陽(yáng)性患者的中位生存時(shí)間為32.45個(gè)月,39例陰性患者的中位生存時(shí)間為42.3個(gè)月,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,χ~2=8.399,P=0.004。Cox回歸多因素分析顯示,ADAMTS-5表達(dá)是判斷食管鱗癌預(yù)后的重要因素,χ~2=5.429,P=0.020。結(jié)論 ADAMTS-5蛋白在食管鱗癌細(xì)胞和組織中高表達(dá),能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖和遷移能力,并影響食管鱗癌患者的預(yù)后。ADAMTS-5有望成為食管鱗癌的生物標(biāo)志物、評(píng)價(jià)預(yù)后的指標(biāo)和治療的新靶點(diǎn)。
【作者單位】： 南通大學(xué)附屬醫(yī)院化療科;南通大學(xué)附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科;南通大學(xué)附屬醫(yī)院放療科;
【基金】：南通市級(jí)科技計(jì)劃(MS22016071;MS22015126)
【分類號(hào)】：R735.1

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本文編號(hào)：2530321