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LukS-PV通過(guò)C5aR誘導(dǎo)急性髓系白血病細(xì)胞THP-1凋亡的研究

發(fā)布時(shí)間:2019-08-13 13:44
【摘要】:目的探討金黃色葡萄球菌殺白細(xì)胞毒素亞組分(LukS-PV)是否通過(guò)C5aR發(fā)揮其誘導(dǎo)急性髓系白血病細(xì)胞THP-1凋亡的作用。方法將THP-1細(xì)胞株分為5組:未處理細(xì)胞為對(duì)照組,使用不同濃度的C5aR拮抗劑(0、50、100、150 nmol/L)預(yù)先作用于THP-1細(xì)胞后,再使用1μmol/L LukS-PV刺激細(xì)胞為處理組。24 h后通過(guò)Annexin V/PI染色法,線粒體膜電位法檢測(cè)細(xì)胞凋亡,qRT-PCR法檢測(cè)凋亡相關(guān)基因,Western blot法檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白,酶標(biāo)儀法檢測(cè)Caspase-3活性。結(jié)果經(jīng)過(guò)不同濃度C5aR拮抗劑干預(yù)后,LukS-PV誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞凋亡的比率逐漸下降,促凋亡基因Bax、Bak、Bim和促凋亡蛋白cleaved-Caspase-3、Bak、Bax的表達(dá)量也逐漸減低,抑凋亡基因Bcl-2、Bcl-w、Bcl-x和抑凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)量逐漸升高,Caspase-3活性逐漸降低。結(jié)論LukS-PV可能通過(guò)結(jié)合C5aR從而激活下游線粒體通路,發(fā)揮其誘導(dǎo)人急性髓系白血病細(xì)胞THP-1凋亡的作用。
【圖文】:

拮抗劑,染色法,凋亡


體系,37℃孵育60~120min,使用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度(absorbance,A)值A(chǔ)405,,實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS16.0軟件進(jìn)行分析,結(jié)果以xs

本文編號(hào):2526167

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