【摘要】：目的 :探討廣藿香酮對(duì)人膽囊癌SGC-996細(xì)胞增殖和凋亡的影響及其可能的作用機(jī)制。方法:MTT法檢測(cè)10、40、80、100和120μg/m L廣藿香酮作用24、48和72 h后,人膽囊癌SGC-996細(xì)胞的增殖情況�？寺⌒纬蓪�(shí)驗(yàn)檢測(cè)10、20和30μg/m L廣藿香酮對(duì)膽囊癌SGC-996細(xì)胞克隆形成的影響。FCM法檢測(cè)40、60和80μg/m L廣藿香酮作用48 h后,膽囊癌SGC-996細(xì)胞的凋亡及細(xì)胞周期分布。蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)40、60和80μg/m L廣藿香酮作用膽囊癌SGC-996細(xì)胞48 h后,活化型caspase-9、活化型caspase-3、剪切型多聚ADP核糖聚合酶1[ploy(ADP-ribose)ployrnerase-1,PARP-1]、Bax、Bcl-2及cyclin D1、cyclin A、cyclin B1蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果:10、40、80、100和120μg/m L廣藿香酮可明顯抑制人膽囊癌SGC-996細(xì)胞的增殖(P值均0.01),且呈劑量和時(shí)間依賴性(P值均0.05)。10、20和30μg/m L廣藿香酮能明顯抑制SGC-996細(xì)胞的克隆形成(P值均0.05)。40、60和80μg/m L廣藿香酮可顯著促進(jìn)SGC-996細(xì)胞的凋亡(P值均0.05),并將細(xì)胞周期阻滯于S期(P值均0.05)。40、60和80μg/m L廣藿香酮處理后,SGC-996細(xì)胞中活化型caspase-9、活化型caspase-3、剪切型PARP-1蛋白表達(dá)水平及Bax/Bcl-2值均顯著上調(diào)(P值均0.05),而cyclin D1、cyclin A和cyclin B1蛋白的表達(dá)水平則顯著下調(diào)(P值均0.01)。結(jié)論 :廣藿香酮可抑制膽囊癌SGC-996細(xì)胞的增殖,并將細(xì)胞周期阻滯于S期。這一作用可能與廣藿香酮調(diào)控線粒體凋亡途徑相關(guān)蛋白及細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的表達(dá)水平有關(guān)。
【圖文】：

（P值均＜0.05），而S期細(xì)胞所占百分比均高于對(duì)照組（P值均＜0.05）。2.4廣藿香酮調(diào)控細(xì)胞凋亡線粒體途徑中相關(guān)蛋白的表達(dá)Caspase家族、PRAP蛋白及Bcl-2家族蛋白等在細(xì)胞凋亡線粒體途徑中發(fā)揮關(guān)鍵的調(diào)控作用[9-11]。40、60和80μg/mL廣藿香酮處理SGC-996細(xì)胞48h后，應(yīng)用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)細(xì)胞凋亡線粒體途徑中相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果（圖3A）顯示，，各質(zhì)量濃度廣藿香酮處理組SGC-996細(xì)胞中活化型caspase-9、活化型caspase-3、剪切型PARP-1Fig.1TheeffectsofpatchoulenoneontheabilitiesofproliferationandcolonyformationofhumangallbladdercarcinomaSGC-996cellsweredetectedbyMTT(A)andcolonyformationmethods(B),respectively.SGC-996cellswithoutanytreatmentasthecontrol.*P<0.05,**P<0.01,vsthecontrol(n=3).圖1MTT法（A）和克隆形成實(shí)驗(yàn)（B）分別檢測(cè)廣藿香酮對(duì)人膽囊癌SGC-996細(xì)胞增殖和克隆形成的影響54吳瑤詩(shī)，等.廣藿香酮抑制人膽囊癌SGC-996細(xì)胞的增殖

Fig.2Theeffectsofpatchoulenoneontheapoptosis(A)andcellcycledistribution(B)ofhumangallbladdercarcinomaSGC-996cellsweredetectedbyFCMassay.SGC-996cellswithoutanytreatmentasthecontrol.*P<0.05,**P<0.01,vsthecontrol(n=3).圖2FCM法檢測(cè)廣藿香酮對(duì)人膽囊癌SGC-996細(xì)胞凋亡（A）及細(xì)胞周期分布（B）的影響蛋白表達(dá)水平及Bax/Bcl-2比值均高于對(duì)照組（P值均＜0.05）。這一結(jié)果表明，廣藿香酮可能通過(guò)上調(diào)細(xì)胞凋亡線粒體途徑中相關(guān)蛋白的表達(dá)水平，進(jìn)而誘導(dǎo)膽囊癌SGC-996細(xì)胞的凋亡。2.5廣藿香酮調(diào)控細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的表達(dá)40、60和80μg/mL廣藿香酮處理SGC-996細(xì)胞48h后，應(yīng)用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果（圖3B）顯示，各質(zhì)量濃度廣藿香酮處理組SGC-996細(xì)胞中cyclinD1、cyclinA和cyclinB1蛋白的表達(dá)水平均顯著低于對(duì)照組（P值均＜0.01）。這一結(jié)果提示，廣藿香酮可能通過(guò)下調(diào)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的表達(dá)水平，將細(xì)胞周期阻滯于S期。吳瑤詩(shī)，等.廣藿香酮抑制人膽囊癌SGC-996細(xì)胞的增殖55
【作者單位】： 南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院消化內(nèi)科;清華大學(xué)附屬北京清華長(zhǎng)庚醫(yī)院肝膽胰中心;
【分類號(hào)】：R735.8

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本文編號(hào)：2524812