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干細胞表面標志CD133在肝癌中的表達及其陽性亞群增殖特性

發(fā)布時間:2019-07-25 07:31
【摘要】:背景:以CD133為標志物,利用其蛋白特異性特征可對不同的腫瘤干細胞進行分選和研究。目的:探討干細胞表面標志CD133在肝癌中的表達及其陽性亞群的體外增殖特性。方法:對人肝癌MHCC97-H細胞株進行培養(yǎng)和分選,分別獲得CD133~+與CD133~-MHCC97-H細胞,檢測CD133表達及細胞遷移侵襲能力;培養(yǎng)14 d,檢測細胞克隆形成率;培養(yǎng)7 d,檢測細胞增殖及Notch基因蛋白表達。將CD133~+與CD133~-MHCC97-H細胞分別接種于裸鼠背部皮下,4周后,檢測成瘤情況。結(jié)果與結(jié)論:(1)CD133表達與細胞克隆形成率:CD133~+MHCC97-H細胞CD133表達率、克隆形成率均顯著大于CD133~-MHCC97-H細胞(P0.05);(2)細胞增殖:CD133~+MHCC97~-H細胞培養(yǎng)3-7 d的吸光度值大于CD133~-MHCC97-H細胞(P0.05);(3)細胞遷移侵襲:CD133~+MHCC97-H細胞遷移與侵襲實驗的透膜細胞數(shù)均顯著多于CD133~-MHCC97-H細胞(P0.05);(4)Notch基因蛋白:CD133~+MHCC97-H細胞Notch基因蛋白表達多于CD133~-MHCC97-H細胞(P0.05);(5)成瘤實驗:CD133~-MHCC97-H細胞組成瘤體積大于CD133~-MHCC97-H細胞組(P0.05);(6)結(jié)果表明:CD133陽性肝癌細胞亞群具有較強的體外增殖特性,具有一定的腫瘤干細胞特性,并有較強的侵襲、轉(zhuǎn)移及致瘤能力。
[Abstract]:Background: using CD133 as marker, different tumor stem cells can be sorted and studied by using its protein specific characteristics. Objective: to investigate the expression of stem cell surface marker CD133 in hepatocellular carcinoma (HCC) and the proliferation characteristics of its positive subsets in vitro. Methods: human hepatocellular carcinoma MHCC97-H cell line was cultured and sorted, CD133~ and CD133~-MHCC97-H cells were obtained, CD133 expression and cell migration and invasion were detected, cell clone formation rate was detected after 14 days of culture, and cell proliferation and Notch gene protein expression were detected after 7 days of culture. CD133~ and CD133~-MHCC97-H cells were inoculated subcutaneously on the back of nude mice, and the tumorigenesis was detected 4 weeks later. Results and conclusion: (1) CD133 expression and clone formation rate: the CD133 expression rate and clone formation rate of CD133~ MHCC97-H cells were significantly higher than those of CD133~-MHCC97-H cells (P 0.05); (2). The absorbance of CD133~ MHCC97~-H cells cultured for 3 days was higher than that of CD133~-MHCC97-H cells (P 0.05). (3) Cell migration and invasion: the number of permeable cells in CD133~ MHCC97-H cell migration and invasion test was significantly higher than that in CD133~-MHCC97-H cell (P 0.05); (4). The expression of Notch gene protein in CD133~ MHCC97-H cell was higher than that in CD133~-MHCC97-H cell (P 0.05); (5). The tumor volume of CD133~-MHCC97-H cell was larger than that of CD133~-MHCC97-H cell group (P 0.05). (6) the results showed that CD133 positive HCC cell subsets had strong proliferation characteristics in vitro, had certain tumor stem cell characteristics, and had strong invasion, metastasis and tumorigenic ability.
【作者單位】: 北京大學濱海醫(yī)院、天津市第五中心醫(yī)院消化科;
【基金】:國家青年科學基金項目(81770221):膜聯(lián)蛋白A2亞硝基化誘導肝細胞癌上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的機制~~
【分類號】:R735.7

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本文編號:2518932

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