【摘要】：目的:探討順鉑(cis-dichlorodiamine platinum,cDDP)耐藥對(duì)人食管癌KYSE150細(xì)胞增殖、凋亡、遷移和血管生成的影響。方法:首先采用順鉑濃度遞增的方法,歷經(jīng)10個(gè)月左右的時(shí)間成功建立了人食管癌順鉑耐藥細(xì)胞系KYSE150/cDDP。采用MTT法測(cè)定其藥物敏感性,并通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察、MTT實(shí)驗(yàn)、集落形成實(shí)驗(yàn)、DAPI染色、劃痕愈合實(shí)驗(yàn)及小管形成實(shí)驗(yàn)比較順鉑耐藥后食管癌細(xì)胞生物學(xué)行為的改變。結(jié)果:KYSE150細(xì)胞和KYSE150/cDDP細(xì)胞在形態(tài)上無(wú)明顯差異;MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與KYSE150細(xì)胞相比,KYSE150/cDDP細(xì)胞對(duì)cDDP的耐藥指數(shù)為6.35,細(xì)胞活力下降;集落形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,KYSE150/cDDP細(xì)胞的集落形成率為(15.00±3.05)%,而KYSE150細(xì)胞的集落形成率為(86.70±6.57)%;DAPI染色顯示KYSE150/cDDP細(xì)胞的凋亡率為(0.63±0.09)%,而KYSE150細(xì)胞的凋亡率為(8.46±1.33)%;劃痕愈合實(shí)驗(yàn)顯示,與KYSE150細(xì)胞相比,KYSE150/cDDP細(xì)胞的劃痕愈合能力更強(qiáng),其遷移率較KYSE150細(xì)胞的遷移率高;小管形成實(shí)驗(yàn)顯示,KYSE150/cDDP細(xì)胞的血管生成數(shù)為76.20±3.18,而KYSE150細(xì)胞的血管生成數(shù)為50.60±1.33;Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示KYSE150/cDDP細(xì)胞中MMP-2和VEGFR2的表達(dá)均高于KYSE150細(xì)胞。結(jié)論:KYSE150/cDDP細(xì)胞具有耐藥表型,耐藥后生長(zhǎng)緩慢,凋亡能力降低,遷移和血管生成能力增加,這可能是臨床化療失敗的重要原因。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of cisplatin (cis-dichlorodiamine platinum,cDDP) resistance on proliferation, apoptosis, migration and angiogenesis of human esophageal carcinoma KYSE150 cells. Methods: the cisplatin resistant human esophageal cancer cell line KYSE150/cDDP. was successfully established after 10 months by increasing the concentration of cisplatin. The drug sensitivity was measured by MTT method. The changes of biological behavior of esophageal cancer cells after cisplatin resistance were compared by morphological observation, MTT test, colony formation test, DAPI staining, scratch healing test and tubule formation test. Results: there was no significant difference between KYSE150 cells and KYSE150/cDDP cells in morphology, MTT assay showed that compared with KYSE150 cells, the drug resistance index of KYSE150/cDDP cells to cDDP was 6.35, and the viability of KYSE150/cDDP cells decreased. The colony forming rate of KYSE150/cDDP cells was (15.00 鹵3.05)%, while that of KYSE150 cells was (86.70 鹵6.57)%. The apoptosis rate of KYSE150/cDDP cells was (0.63 鹵0.09)% and that of KYSE150 cells was (8.46 鹵1.33)% by DAPI staining. Scratch healing test showed that the ability of scratch healing of KYSE150/cDDP cells was stronger than that of KYSE150 cells, and the migration rate of KYSE150/cDDP cells was higher than that of KYSE150 cells. Tubule formation assay showed that the angiogenesis number of KYSE150/cDDP cells was 76.20 鹵3.18, while that of KYSE150 cells was 50.60 鹵1.33%. Western blot assay showed that the expression of MMP-2 and VEGFR2 in KYSE150/cDDP cells was higher than that in KYSE150 cells. Conclusion: KYSE150/cDDP cells have drug-resistant phenotype, slow growth, decreased apoptosis, and increased migration and angiogenesis ability after drug resistance, which may be an important reason for the failure of clinical chemotherapy.
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81372676) 中國(guó)博士后基金資助項(xiàng)目(No.2014M551058) 山西省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.201601D011130)
【分類號(hào)】：R735.1

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6 丁s，

本文編號(hào)：2445907