【摘要】：目的:探討順鉑(cis-dichlorodiamine platinum,cDDP)耐藥對人食管癌KYSE150細胞增殖、凋亡、遷移和血管生成的影響。方法:首先采用順鉑濃度遞增的方法,歷經10個月左右的時間成功建立了人食管癌順鉑耐藥細胞系KYSE150/cDDP。采用MTT法測定其藥物敏感性,并通過形態(tài)學觀察、MTT實驗、集落形成實驗、DAPI染色、劃痕愈合實驗及小管形成實驗比較順鉑耐藥后食管癌細胞生物學行為的改變。結果:KYSE150細胞和KYSE150/cDDP細胞在形態(tài)上無明顯差異;MTT實驗結果顯示,與KYSE150細胞相比,KYSE150/cDDP細胞對cDDP的耐藥指數(shù)為6.35,細胞活力下降;集落形成實驗結果顯示,KYSE150/cDDP細胞的集落形成率為(15.00±3.05)%,而KYSE150細胞的集落形成率為(86.70±6.57)%;DAPI染色顯示KYSE150/cDDP細胞的凋亡率為(0.63±0.09)%,而KYSE150細胞的凋亡率為(8.46±1.33)%;劃痕愈合實驗顯示,與KYSE150細胞相比,KYSE150/cDDP細胞的劃痕愈合能力更強,其遷移率較KYSE150細胞的遷移率高;小管形成實驗顯示,KYSE150/cDDP細胞的血管生成數(shù)為76.20±3.18,而KYSE150細胞的血管生成數(shù)為50.60±1.33;Western blot實驗結果顯示KYSE150/cDDP細胞中MMP-2和VEGFR2的表達均高于KYSE150細胞。結論:KYSE150/cDDP細胞具有耐藥表型,耐藥后生長緩慢,凋亡能力降低,遷移和血管生成能力增加,這可能是臨床化療失敗的重要原因。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of cisplatin (cis-dichlorodiamine platinum,cDDP) resistance on proliferation, apoptosis, migration and angiogenesis of human esophageal carcinoma KYSE150 cells. Methods: the cisplatin resistant human esophageal cancer cell line KYSE150/cDDP. was successfully established after 10 months by increasing the concentration of cisplatin. The drug sensitivity was measured by MTT method. The changes of biological behavior of esophageal cancer cells after cisplatin resistance were compared by morphological observation, MTT test, colony formation test, DAPI staining, scratch healing test and tubule formation test. Results: there was no significant difference between KYSE150 cells and KYSE150/cDDP cells in morphology, MTT assay showed that compared with KYSE150 cells, the drug resistance index of KYSE150/cDDP cells to cDDP was 6.35, and the viability of KYSE150/cDDP cells decreased. The colony forming rate of KYSE150/cDDP cells was (15.00 鹵3.05)%, while that of KYSE150 cells was (86.70 鹵6.57)%. The apoptosis rate of KYSE150/cDDP cells was (0.63 鹵0.09)% and that of KYSE150 cells was (8.46 鹵1.33)% by DAPI staining. Scratch healing test showed that the ability of scratch healing of KYSE150/cDDP cells was stronger than that of KYSE150 cells, and the migration rate of KYSE150/cDDP cells was higher than that of KYSE150 cells. Tubule formation assay showed that the angiogenesis number of KYSE150/cDDP cells was 76.20 鹵3.18, while that of KYSE150 cells was 50.60 鹵1.33%. Western blot assay showed that the expression of MMP-2 and VEGFR2 in KYSE150/cDDP cells was higher than that in KYSE150 cells. Conclusion: KYSE150/cDDP cells have drug-resistant phenotype, slow growth, decreased apoptosis, and increased migration and angiogenesis ability after drug resistance, which may be an important reason for the failure of clinical chemotherapy.
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學生物化學與分子生物學教研室;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(No.81372676) 中國博士后基金資助項目(No.2014M551058) 山西省自然科學基金資助項目(No.201601D011130)
【分類號】：R735.1

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 王淑美,徐曉玉,張文亮;調控血管生成中藥的研究現(xiàn)狀[J];時珍國醫(yī)國藥;2004年09期

2 王國慶,易成,周宏遠;因特網上的血管生成研究資源[J];中國微循環(huán);2004年04期

3 練燕;抑制血管生成:第五類抗癌療法?[J];國外醫(yī)學.護理學分冊;2004年10期

4 金艷,王秀琴;血管生成與抗血管生成策略[J];食品與藥品;2005年09期

5 賈林,袁世珍;腫瘤抗血管治療現(xiàn)狀與血管生成抑制-細胞毒療法[J];廣州醫(yī)學院學報;2000年02期

6 方全;血管生成素與腫瘤新生血管生成[J];國外醫(yī)學(生理、病理科學與臨床分冊);2001年05期

7 曹健,郭德玉,張恩娟;血管生成與疾病治療[J];中國藥房;2001年07期

8 王國慶,易成;血管形成新方式——擬血管生成[J];國外醫(yī)學(腫瘤學分冊);2003年04期

9 鄒戈;腫瘤血管生成與抗血管生成研究進展[J];國外醫(yī)學.泌尿系統(tǒng)分冊;2003年01期

10 張?zhí)祜w,蔣登金,郭光金;血管內皮生長因子與血管生成的研究進展[J];局解手術學雜志;2003年04期

相關會議論文 前10條

1 馬強;陳剛;徐曉玉;;中藥對血管生成影響研究進展[A];全國第3屆臨床中藥學學術研討會論文集[C];2010年

2 林秀坤;;新生血管生成與靶向抗腫瘤海洋藥物的研制策略[A];2007年全國生化與生物技術藥物學術年會論文集[C];2007年

3 戰(zhàn)忠利;孫蕾娜;孫慧;賈春實;;肺癌血管生成與血管生成抑制物之間相互關系的研究[A];第四屆中國腫瘤學術大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學術會議論文集[C];2006年

4 戰(zhàn)忠利;;肺癌血管生成與血管生成抑制物之間相互關系的研究[A];中華醫(yī)學會病理學分會2006年學術年會論文匯編[C];2006年

5 劉麗華;易愛純;;抗血管生成與血管依賴性實體瘤的治療[A];2009年中國藥學大會暨第九屆中國藥師周論文集[C];2009年

6 劉麗華;易愛純;;抗血管生成與血管依賴性實體瘤的治療[A];2010年中國藥學大會暨第十屆中國藥師周論文集[C];2010年

7 李平;王國慶;;血管靶向及抗血管生成聯(lián)合放射治療的研究進展[A];第一屆中國腫瘤靶向治療技術大會論文集[C];2003年

8 卞修武;;癌癥和慢性炎癥血管生成的調控差異及其治療學意義[A];第三屆中國腫瘤學術大會教育論文集[C];2004年

9 李龍江;溫玉明;王昌美;陳江;;抑制血管生成誘導腫瘤細胞凋亡的實驗研究[A];第一屆全國口腔頜面部腫瘤學術會議論文匯編[C];2001年

10 沈明秀;王凱;蔡連香;岳開琴;張樹成;李巧風;陳秋梅;;試探中醫(yī)血足則子宮易于容物的內涵實驗之一血管生成[A];全國第六屆中西醫(yī)結合婦產科學術會議論文及摘要集[C];2002年

相關重要報紙文章 前10條

1 王迪;血管生成藥等待發(fā)力[N];醫(yī)藥經濟報;2007年

2 丁志山 沃興德;中藥對血管生成影響的研究進展[N];中國醫(yī)藥報;2003年

3 徐蓓;血管生成：從藥用植物到血管的研究 Angiogenesis:From Plants to Blood Vessels[N];中國醫(yī)藥報;2006年

4 白冰　編譯;癌細胞血管生成學說有新變化[N];中國醫(yī)藥報;2008年

5 劉道安;抑制肺癌血管生成“餓死”癌細胞[N];中國醫(yī)藥報;2002年

6 徐峰;腫瘤與血管生成息息相關[N];醫(yī)藥經濟報;2001年

7 記者劉道安;中藥對肺癌血管生成有抑制作用[N];中國中醫(yī)藥報;2002年

8 記者 白毅;miRNA在多糖介導的血管生成抑制中起重要作用[N];中國醫(yī)藥報;2014年

9 漁陽;抗血管生成類藥物：有前瞻性的暴利領域[N];醫(yī)藥經濟報;2006年

10 徐峰;腫瘤與血管生成息息相關[N];醫(yī)藥經濟報;2001年

相關博士學位論文 前10條

1 王付海;T7肽通過下調Ang-2表達及聯(lián)合3-MA發(fā)揮其抗血管生成的實驗研究[D];山東大學;2015年

2 向勁松;基于轉基因斑馬魚模型的清熱解毒類中藥抗血管生成篩選及對照研究[D];成都中醫(yī)藥大學;2015年

3 胡峗;miR-29c通過胰島素樣生長因子1抑制人血管內皮細胞遷移和血管生成的研究[D];重慶醫(yī)科大學;2015年

4 高鐘秀子;聲動力治療抑制血管生成和腫瘤生長[D];哈爾濱醫(yī)科大學;2013年

5 杜澄利;MiR-126對肝細胞肝癌的轉移和血管生成的作用及機制研究[D];浙江大學;2016年

6 楊勐航;三氧化二砷對肺癌新生血管生成的作用及其機制研究[D];第二軍醫(yī)大學;2016年

7 劉建昆;IL-17在結直腸癌血管生成中的作用及機制研究[D];第三軍醫(yī)大學;2011年

8 王心華;力達霉素和大黃素的抗血管生成和抗轉移作用及其機制研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2001年

9 張彥民;塔斯品堿抑制血管生成的作用及初步機制研究[D];西安交通大學;2008年

10 董豪杰;血管生成素對miR-141的調控作用及其在血管生成中的功能[D];浙江大學;2014年

相關碩士學位論文 前10條

1 劉玉芝;含硒復合物對犬乳腺腫瘤細胞CTM1211的生長抑制和血管生成相關因子的調節(jié)作用[D];華中農業(yè)大學;2015年

2 榮倩倩;參芪抑瘤方對荷瘤小鼠H_(22)肝癌的抑制作用及抗血管生成機制研究[D];甘肅中醫(yī)藥大學(原名：甘肅中醫(yī)學院);2015年

3 閆鍇;血管生成素-2（Angiopoietin-2）調節(jié)小鼠下肢缺血血管生成的研究[D];四川醫(yī)科大學;2015年

4 于玲;遠隔預處理對大鼠腦缺血后血管生成及其相關因子表達影響的研究[D];復旦大學;2014年

5 陳士雯;MiR-494調控蛻膜MSCs影響子癇前期發(fā)病的機制研究[D];南京大學;2015年

6 丁s，

本文編號：2445907