【摘要】：實驗背景:乳腺癌(Breast cancer)是全世界女性最常見的惡性腫瘤之一。近年來,隨著生活壓力的逐年遞增及環(huán)境惡化等各方面因素的影響,全世界女性乳腺癌的發(fā)病率逐年遞增,其病死率位居第二位,僅次于肺癌,幾乎所有乳腺癌患者的死亡原因都是遠處轉(zhuǎn)移。因此,闡明乳腺癌轉(zhuǎn)移的發(fā)生機制將有助于乳腺癌防治。Wnt信號通路是一條在進化上高度保守的生物分子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,該信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路調(diào)控胚胎形成、神經(jīng)系統(tǒng)形成等多種發(fā)育過程,并且在維持機體的動態(tài)平衡中起到了至關(guān)重要作用,同時也參與了細胞的增殖、分化、存活、凋亡,以及各種腫瘤細胞的侵襲和遷移。β-catenin在細胞內(nèi)累積是Wnt信號通路異常的核心,并通過其下游轉(zhuǎn)導(dǎo)通路引起特異靶基因的轉(zhuǎn)錄。DKK1是DKK家族中的成員之一,也是抑制Wnt/β-catenin生物分子信號通路傳導(dǎo)作用最強的一種分泌性糖蛋白。DKK1作為Wnt/β-catenin生物分子信號通路的抑制劑,可通過調(diào)控Wnt/β-catenin通路來決定細胞的遷移、增殖等特性。已有文獻證實DKK1對于肝癌、肺癌及胃癌的發(fā)生發(fā)展起著重要作用,但是DKK1在乳腺癌轉(zhuǎn)移中的作用及其機制目前尚不清楚,這是本課題主要解決的問題。實驗?zāi)康?本文以乳腺癌細胞系和臨床乳腺癌組織標本為研究對象,探討DKK1在乳腺癌轉(zhuǎn)移中的作用及其作用機制。實驗方法:采用RT-PCR和Western blot實驗檢測乳腺癌及癌旁組織、四種乳腺癌細胞(MDA-MB-453,MCF-7,MDA-MB-231和HCC-1937)和一種乳腺癌原代培養(yǎng)細胞中DKK1 mRNA及其蛋白的表達。在乳腺癌細胞系中過表達或基因敲減DKK1,通過MTT比色法、劃痕(傷口愈合)實驗和Transwell實驗分別檢測乳腺癌細胞增殖、遷移和侵襲能力;通過Western blot實驗檢測Wnt/β-catenin信號通路中β-catenin,E-caherin,MMP-7等相關(guān)蛋白的表達。通過免疫組化實驗檢測乳腺癌組織中DKK1,β-catenin,MMP-7,E-caherin的表達。實驗結(jié)果:1、與癌旁組織相比,乳腺癌組織中DKK1在mRNA和蛋白水平的表達相對較低。2、在四種乳腺癌細胞及原代培養(yǎng)細胞中,DKK1在mRNA及蛋白水平上的表達無明顯差異。3、在乳腺癌細胞系中過表達DKK1能夠明顯抑制乳腺癌細胞的增殖、遷移和侵襲能力;相反,基因敲減乳腺癌細胞中DKK1能夠明顯促進乳腺癌細胞的增殖、遷移和侵襲能力。4、在乳腺癌細胞系中過表達DKK1能明顯減少乳腺癌細胞MCF-7、MDA-MB-231中β-catenin和MMP-7蛋白的表達、上調(diào)E-cadherin的表達,而短發(fā)夾RNA(shRNA)敲減DKK1后,β-catenin和MMP-7在乳腺癌細胞MCF-7、MDA-MB-231中的蛋白表達顯著增加、E-cadherin的表達顯著減少。5、臨床標本結(jié)果顯示:乳腺癌組織中β-catenin、MMP-7表達明顯較癌旁組織多,與DKK1的表達成負相關(guān),而E-cadherin的表達在乳腺癌組織中明顯較癌旁組織低,與DKK1的表達成正相關(guān)。實驗結(jié)論:1、乳腺癌中DKK1表達的下調(diào)促進了乳腺癌的增殖和轉(zhuǎn)移。2、乳腺癌中DKK1表達的下調(diào)導(dǎo)致了Wnt/β-catenin信號通路的激活,使β-catenin及其下游蛋白MMP-7的表達上調(diào),進而MMP-7通過水解E-cadherin促進了乳腺癌的增殖和轉(zhuǎn)移。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：河南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.9

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6 ;藥物抑制乳腺癌轉(zhuǎn)移[J];中國腫瘤;1996年06期

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