【摘要】：目的:乳腺癌是全世界女性最常見的惡性腫瘤。我國女性的乳腺癌發(fā)病率雖然低于全球水平,但發(fā)病率逐年迅猛增長,位列我國女性惡性腫瘤死亡原因第二位。PI3K-AKT信號通路的異�；罨诎┌Y中被發(fā)現(xiàn)超過20年。PI3K-AKT信號通路對于細(xì)胞周期、增殖、生長、生存、蛋白質(zhì)合成和葡萄糖代謝至關(guān)重要。AKT位于PI3K的下游,p-AKT為AKT的活化形式。當(dāng)AKT活化后,可以磷酸化其下游的許多底物,包括:m TOR、GSK-3、p21WAF1和p27Kip1、Fox O轉(zhuǎn)錄因子、Bcl-2、MDM2等,從而發(fā)揮其促進(jìn)細(xì)胞增殖、生長和抗凋亡的作用。通過對醫(yī)學(xué)數(shù)據(jù)庫的檢索發(fā)現(xiàn):PI3K-AKT信號通路在廣泛腫瘤譜中發(fā)生變異,但在臨床病理學(xué)角度(整體水平)對AKT及p-AKT在乳腺癌組織中的表達(dá)水平存在一定的爭議。大多研究認(rèn)為:AKT、p-AKT在乳腺癌組織中的表達(dá)水平與乳腺癌的臨床分期、組織學(xué)分級具有相關(guān)性。然而,鮮有關(guān)于AKT、p-AKT與乳腺癌預(yù)后相關(guān)的報(bào)道。此外,馬力教授等[1]通過對轉(zhuǎn)染了細(xì)胞增殖抑制基因(Mfn2)的乳腺癌細(xì)胞MCF-7研究,發(fā)現(xiàn)Mfn2通過下調(diào)PI3K-AKT信號通路促進(jìn)細(xì)胞凋亡和抑制細(xì)胞增殖。檢索相關(guān)文獻(xiàn)資料未見關(guān)于乳腺癌組織中Mfn2與AKT、p-AKT表達(dá)水平是否相關(guān)的報(bào)道。本研究通過采用免疫組化Max Vision TM一步法,檢測乳腺正常導(dǎo)管上皮組織及乳腺原發(fā)性浸潤性導(dǎo)管癌組織中AKT、p-AKT的表達(dá)情況。探討AKT、p-AKT的表達(dá)情況與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系,并探究乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中Mfn2與AKT、p-AKT的表達(dá)情況是否存在相關(guān)性,進(jìn)一步揭示Mfn2基因及PI3K-AKT信號通路在乳腺癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用,從整體水平初步印證我們的前期工作。方法:1隨機(jī)連續(xù)收集河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院乳腺中心2008年接受手術(shù)治療的原發(fā)性乳腺浸潤性導(dǎo)管癌石蠟包埋組織126例(均有完整隨訪和臨床病理資料)作為研究對象,以病理證實(shí)的正常乳腺導(dǎo)管上皮組織10例作為對照組。于我院病理科采用免疫組化Max Vision TM一步法檢測所有患者病理組織的AKT、p-AKT、Mfn2表達(dá)情況,并按照病理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)復(fù)診原有病理切片。2將AKT、p-AKT在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的表達(dá)情況與患者年齡、術(shù)后的腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目、術(shù)后TNM臨床分期、組織學(xué)分級、是否存在脈管瘤栓、分子分型、ER、PR、HER2、Ki-67的表達(dá)情況以及DFS、OS等隨訪結(jié)果相結(jié)合探討AKT、p-AKT的表達(dá)情況與乳腺癌患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。3觀察乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中Mfn2與AKT、p-AKT的表達(dá)情況是否存在相關(guān)性。4應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,以P0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AKT、p-AKT表達(dá)情況與臨床病理特征結(jié)果采用卡方檢驗(yàn)及Spearman相關(guān)性檢驗(yàn)。AKT、p-AKT表達(dá)情況與預(yù)后關(guān)系應(yīng)用Kaplan-Meier生存曲線進(jìn)行單因素生存分析,COX回歸模型進(jìn)行多因素生存分析。結(jié)果:1在126例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織標(biāo)本中,p-AKT陰性者共54例(54/126,42.9%),p-AKT陽性者共72例(72/126,57.1%)。AKT陰性者共26例(26/126,20.6%),AKT陽性者共100例(100/126,79.4%)。在10例正常乳腺導(dǎo)管上皮組織標(biāo)本中,p-AKT陰性者共9例(9/10,90%),p-AKT陽性者共1例(1/10,10%)。AKT陰性者共5例(5/10,50%),AKT陽性者共5例(5/10,50%)。p-AKT在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中的陽性表達(dá)率高于正常乳腺導(dǎo)管上皮組織標(biāo)本(57.1%vs 10%),χ2=6.493,P=0.011,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AKT在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中的陽性表達(dá)率雖高于正常乳腺導(dǎo)管上皮組織標(biāo)本(79.4%vs 50%),χ2=3.024,P=0.082,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2根據(jù)術(shù)后病理標(biāo)本的腫瘤大小,將126例患者分為:≤2cm組,共54例(54/126,42.9%);2cm且≤5cm組,共62例(62/126,49.2%);5cm組,共10例(10/126,7.9%)。三組的p-AKT陽性率分別為44.4%,62.9%,90.0%。進(jìn)行卡方檢驗(yàn),結(jié)果示χ2=8.804,P=0.012,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。進(jìn)行Spearman相關(guān)性分析,r=0.254,P=0.004。提示原發(fā)腫瘤直徑與p-AKT的表達(dá)呈正相關(guān)。3根據(jù)術(shù)后石蠟標(biāo)本淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個(gè)數(shù),將126例患者分為:N0(無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)組,共57例(57/126,45.2%);N1(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移1~3枚)組,共26例(26/126,20.6%);N2(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移4~9枚)組,共25例(25/126,19.9%);N3(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移≥10枚)組,共18例(18/126,14.3%)。四組的p-AKT陽性率分別為:42.1%,50.0%,80.0%,83.3%。通過卡方檢驗(yàn)對四組進(jìn)行比較,χ2=16.180,P=0.001,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。進(jìn)行Spearman相關(guān)性分析,r=0.338,P0.001。提示淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目與p-AKT的表達(dá)呈正相關(guān)。4根據(jù)術(shù)后TNM臨床分期,將126例乳腺癌分為:Ⅰ期患者32例(32/126,25.4%),Ⅱ期患者55例,(55/126,43.7%),Ⅲ期患者39例(39/126,30.9%)。三組的p-AKT陽性率分別為40.6%,47.3%,84.6%。應(yīng)用卡方進(jìn)行分析,χ2=17.772,P0.001,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Spearman相關(guān)性分析結(jié)果示:r=0.347,P0.001。提示術(shù)后TNM臨床分期與p-AKT的表達(dá)呈正相關(guān)。5根據(jù)術(shù)后病理診斷中的組織學(xué)分級,將126例患者分為3組,分別是Ⅰ級組,共0例(0/126,0%);Ⅱ級組,共103例(103/126,81.7%),其中p-AKT陰性者50例(50/103,48.5%),p-AKT陽性者53例(53/103,51.5%);Ⅲ級組,共23例(23/126,18.3%),其中p-AKT陰性者4例(4/23,17.4%),p-AKT陽性者19例(19/23,82.6%)。采用卡方檢驗(yàn)分析兩組間p-AKT的表達(dá)情況,χ2=7.451,P=0.006,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示術(shù)后病理組織學(xué)分級Ⅲ級組中p-AKT的陽性表達(dá)率較高。6根據(jù)HER2表達(dá)情況分為:HER2陰性組共92例(92/126,73.0%),其中p-AKT陽性者47例(47/92,51.1%);HER2陽性組共34例(34/126,27.0%),其中p-AKT陽性者25例(25/34,73.4%)。應(yīng)用卡方檢驗(yàn)分析p-AKT在兩組中的表達(dá)情況:χ2=5.106,P=0.024,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示在HER2陽性組中p-AKT陽性率較高。7根據(jù)患者在隨訪過程中是否發(fā)生過復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移等不良事件的情況將126例乳腺癌患者分為:無復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組,共83例(83/126,65.9%);復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組,共43例(43/126,34.1%)。兩組p-AKT陽性率分別為50.6%和69.8%�？ǚ綑z驗(yàn)結(jié)果示兩組間p-AKT的表達(dá)情況差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,χ2=4.248,P=0.039。提示發(fā)生復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移組p-AKT陽性率較高。8按照隨訪終點(diǎn)患者的存活情況將患者分為:存活組,共95例(95/126,75.4%);死亡組,共31例(31/126,24.6%)。兩組p-AKT陽性率分別為49.5%和80.6%。采用卡方檢驗(yàn)分析,結(jié)果示:χ2=9.247,P=0.002,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示在死亡組中p-AKT陽性率較高。9 p-AKT表達(dá)情況與患者年齡、組織學(xué)分級、有無脈管瘤栓及ER、PR、Ki-67的表達(dá)情況均無關(guān)(均P0.05)。10 AKT表達(dá)情況與患者年齡、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目、術(shù)后TNM臨床分期、組織學(xué)分級、有無脈管瘤栓及ER、PR、HER2、Ki-67的表達(dá)情況、DFS、OS均無關(guān)(均P0.05)。11 p-AKT陽性組五年OS低于p-AKT陰性組(73.6%,92.6%),χ2=9.461,P=0.002,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。p-AKT陽性組五年DFS低于p-AKT陰性組(62.5%,83.3%),χ2=5.002,P=0.025,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這兩項(xiàng)結(jié)果均提示p-AKT的陽性表達(dá)與不良預(yù)后有關(guān)。12將單因素分析得到的對乳腺癌患者生存期有影響的因素納入COX多因素分析,發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況(P=0.033,HR=8.726)、術(shù)后TNM臨床分期(P=0.015,HR=8.348)是影響乳腺癌患者OS的有意義的預(yù)后獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素。13將單因素分析得到的對乳腺癌患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移有影響的因素納入COX多因素分析,發(fā)現(xiàn)只有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況(P=0.004,HR=13.324)是影響乳腺癌患者DFS的有意義的預(yù)后獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素。14根據(jù)Mfn2表達(dá)情況將126例患者分為:Mfn2(-)組,共21例(21/126,16.7%);Mfn2(+)組,共55例(55/126,43.7%);Mfn2(++)組,共25例(25/126,19.8%);Mfn2(+++)組,共25例(25/126,19.8%)。四組中p-AKT的陽性率分別為:76.2%,74.5%,48.0%,12.0%。采用卡方檢驗(yàn)分析四組間p-AKT的表達(dá)情況,χ2=31.569,P0.001,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。p-AKT表達(dá)情況與Mfn2表達(dá)情況進(jìn)行相關(guān)分析,結(jié)果顯示:r=-0.455,P0.001,說明p-AKT表達(dá)情況與Mfn2表達(dá)情況呈負(fù)線性相關(guān)。Mfn2的表達(dá)降低了p-AKT的表達(dá)水平,提示Mfn2可能是潛在的抑癌基因。結(jié)論:1 p-AKT在乳腺癌組織中的陽性率較乳腺正常導(dǎo)管上皮組織升高,提示p-AKT可能與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。2 p-AKT的表達(dá)水平與術(shù)后的腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、病理TNM臨床分期均呈正相關(guān),在組織學(xué)分級Ⅲ組及HER2陽性組中p-AKT陽性率較高。較大的腫瘤直徑、較多的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、HER2陽性、較高的TNM臨床分期及組織學(xué)分級均為提示不良預(yù)后的危險(xiǎn)因素,提示p-AKT的陽性表達(dá)與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的腫瘤惡性程度呈正相關(guān)。3 p-AKT的陽性表達(dá)與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者DFS及OS呈負(fù)相關(guān),生存分析結(jié)果顯示p-AKT的陽性表達(dá)與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者的預(yù)后不良有關(guān),但其不能作為影響乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者的獨(dú)立預(yù)后因素。4 AKT的表達(dá)情況與患者年齡、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目、術(shù)后TNM臨床分期、組織學(xué)分級、有無脈管瘤栓及ER、PR、Ki-67、HER2的表達(dá)、DFS、OS均無關(guān)(均P0.05)。提示AKT的表達(dá)情況與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的惡性程度及預(yù)后無關(guān)。5 Mfn2的表達(dá)水平與p-AKT的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān),提示Mfn2高表達(dá)可抑制p-AKT的表達(dá),揭示Mfn2基因可能成為治療乳腺癌的潛在靶點(diǎn)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R737.9

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2259386