【摘要】：目的:探究紫外線(UV)對黑色素瘤細(xì)胞A375自噬的誘導(dǎo)效應(yīng)及自噬與凋亡之間的相互調(diào)控。方法:模擬日光UV(95%UVA,5%UVB)照射A375后,自噬慢病毒監(jiān)測不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞自噬的變化;流式細(xì)胞術(shù)分析30 m J/cm2混合照后6、9 h細(xì)胞凋亡的變化;蛋白質(zhì)印跡法檢測30 m J/cm2照并干擾自噬后對凋亡標(biāo)志蛋白的影響。結(jié)果:(1)UV能誘導(dǎo)A375自噬,10、30 m J/cm2的UV照后6 h能監(jiān)測到細(xì)胞形成自噬體、9 h達(dá)高峰,50 m J/cm2照射組在照后6 h達(dá)自噬高峰且持續(xù)到觀察時(shí)間的結(jié)束;(2)單純UVB對自噬的誘導(dǎo)能力明顯高于單純UVA,且二者表現(xiàn)為協(xié)同效應(yīng);(3)30 m J/cm2的UV照射,在照后9 h發(fā)現(xiàn)Caspase 3、9表達(dá)降低,抑制自噬后,6、9 h凋亡標(biāo)志蛋白Caspase 3、9表達(dá)增高,兩組細(xì)胞在6、9 h的早期凋亡百分率差異顯著(P0.01)。結(jié)論:UV能夠誘導(dǎo)A375自噬,UVB的貢獻(xiàn)高于UVA。UV誘導(dǎo)的自噬能夠推遲凋亡發(fā)生,對細(xì)胞起保護(hù)作用。
[Abstract]:Aim: to investigate the induction effect of ultraviolet (UV) on autophagy of melanoma cell A375 and the mutual regulation between autophagy and apoptosis. Methods: after simulated solar UV (95 UVA5 UVB) irradiation to A375, autophagy lentivirus monitored the changes of autophagy at different time points, flow cytometry was used to analyze the changes of cell apoptosis at 6 h and 9 h after 30 m J/cm2 mixed irradiation. The effect of 30 m J/cm2 irradiation on apoptotic marker protein after autophagy was detected by Western blot. Results: (1) UV could induce A375 autophagy 1030m J/cm2 UV to induce autophagy to reach the peak at 9 h after irradiation and last until the end of observation time 6 h after irradiation in A375 autophagy group. (2) the induction of autophagy by UVB alone could be observed at the end of the observed time. (2) the induction of autophagy by UVB alone could be observed at 6 h after irradiation and reached the peak at 6 h after exposure to A375 autophagy. The conductance of UVA, was significantly higher than that of UVA, and the two showed synergistic effect. (3) 30 m J/cm2 UV irradiation, At 9 h after irradiation, the expression of Caspase 3H 9 decreased, and the expression of apoptosis marker Caspase 39 9 increased at 6 h after autophagy. There was a significant difference in the percentage of early apoptosis between the two groups at 6 h after autophagy (P0.01). Conclusion the contribution of UVA.UV induced autophagy UVB was higher than that of UVA.UV induced autophagy.
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院放射醫(yī)學(xué)系;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號:81472922)
【分類號】：R739.5

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