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腺苷干預(yù)人結(jié)直腸癌SW480細(xì)胞RECK基因甲基化及其機(jī)制

發(fā)布時間:2018-08-08 20:08
【摘要】:目的探討腺苷干預(yù)人結(jié)直腸癌SW480細(xì)胞RECK基因甲基化及其機(jī)制。方法分別用0、3.0 mmol/L的腺苷干預(yù)SW480細(xì)胞72 h后,亞硫酸氫鹽測序法(BSP)檢測RECK基因啟動子區(qū)Cp G島甲基化情況;逆轉(zhuǎn)錄PCR、Western blot、流式細(xì)胞儀檢測腺苷處理前后RECK基因mRNA和蛋白的表達(dá)、甲基轉(zhuǎn)移酶(methyltransferases DNMT1,DNMT3a)蛋白表達(dá)及細(xì)胞凋亡的變化。結(jié)果腺苷干預(yù)后RECK基因甲基化程度明顯低于對照組[(49.14±2.38)%vs(74.84±2.38)%,P0.01];腺苷干預(yù)后RECK基因mRNA轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)、細(xì)胞凋亡均明顯高于對照組[0.335 3±0.350 2 vs 0.080 0±0.003 6,0.603 0±0.017 8 vs 0.090 0±0.003 0;(27.90±2.32)%vs(5.09±0.30)%,P0.01];甲基轉(zhuǎn)移酶(DNMT1、DNMT3a)蛋白表達(dá)均明顯低于對照組(0.141 3±0.002 1 vs 0.645 0±0.009 2,0.130 0±0.004 6 vs 0.526 7±0.009 5,P0.01)。結(jié)論腺苷通過抑制甲基轉(zhuǎn)移酶的活性,降低RECK基因DNA啟動子區(qū)域的甲基化水平,使RECK基因mRNA及蛋白表達(dá)水平增加,促使SW480細(xì)胞凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of adenosine on methylation of RECK gene in human colorectal cancer SW480 cells and its mechanism. Methods after SW480 cells were treated with adenosine for 72 h, methylation of RECK gene promoter was detected by (BSP), reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and flow cytometry were used to detect the expression of mRNA and protein of RECK gene before and after adenosine treatment. Expression of methyltransferase (methyltransferases DNMT1, DNMT3a) and apoptosis. Results the methylation degree of RECK gene after adenosine intervention was significantly lower than that in the control group [(49.14 鹵2.38) vs (74.84 鹵2.38) P 0.01], and the mRNA transcription and protein expression of RECK gene after adenosine intervention were significantly lower than those in the control group (49.14 鹵2.38). Apoptosis was significantly higher than that in the control group [0.335 3 鹵0.350 2 vs 0.080 0 鹵0.003 6 鹵0.6030 鹵0.017 8 vs 0.090 0 鹵0.003 0; (27.90 鹵2.32) vs (5.09 鹵0.30) P 0.01], and the expression of DNMT1 + DNMT3a protein was significantly lower than that in the control group (0.141 3 鹵0.002 1 vs 0.645 0 鹵0.009 2 鹵0.130 0 鹵0.004 6 vs 0.526 7 鹵0.009 5P0.01), and the expression of DNMT1a protein was significantly lower than that in the control group (0.141 3 鹵0.002 1 vs 0.645 0 鹵0.009 2 鹵0.004 6 vs 0.526 7 鹵0.009 5P0.01). Conclusion adenosine can inhibit the activity of methyltransferase, decrease the methylation level of DNA promoter of RECK gene, increase the expression of mRNA and protein of RECK gene, and promote the apoptosis of SW480 cells.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二臨床學(xué)院胃腸外科;美國俄勒岡州Legacy研究所;
【基金】:重慶市自然科學(xué)基金(CSTC2012jja10063)~~
【分類號】:R735.34

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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2 李瀚e,

本文編號:2172915


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