本文選題：巨噬細胞 + 肺癌��； 參考：《中國免疫學(xué)雜志》2017年01期

【摘要】：目的:研究IL-1β在巨噬細胞促進肺癌細胞增殖的作用機制。方法:采用Transwell屮插入式細胞培養(yǎng)皿共培養(yǎng)人肺癌細胞株A549、NCI-H520細胞和巨噬細胞。Brd U-ELISA法檢測巨噬細胞對肺癌細胞的增殖能力。采用Real-time PCR法檢測巨噬細胞和A549、NCI-H520細胞中IL-1βmRNA的表達。應(yīng)用IL-1β的中和抗體抑制IL-1β的活性,觀察IL-1β在巨噬細胞促進肺癌細胞增殖中的作用。利用Western blot法檢測肺癌細胞中自噬標志物Beclin 1的表達。結(jié)果:Brd UELISA檢測結(jié)果:A549細胞與巨噬細胞以1∶0.5的比例共培養(yǎng),A549細胞的OD值從(0.41±0.06)增加到(1.13±0.10),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),且A549細胞的OD值隨共培養(yǎng)巨噬細胞比例的增加而升高(P0.05)。NCI-H520細胞與不同濃度的巨噬細胞共培養(yǎng)后,NCI-H520細胞的OD值變化趨勢與A549細胞相似。Real-time PCR法檢測結(jié)果:在共培養(yǎng)后,巨噬細胞中IL-1βmRNA的表達顯著上調(diào),且有時間依賴性,并顯著高于肺癌細胞中的表達。加入IL-1β中和抗體后,Brd U ELISA法檢測的細胞增殖,結(jié)果顯示IL-1β中和抗體可明顯抑制巨噬細胞對肺癌細胞A549和NCI-H520的增殖促進作用。Western blot法檢測結(jié)果顯示IL-1β可顯著抑制腫瘤細胞Beclin 1的表達。結(jié)論:巨噬細胞和肺癌細胞通過增強IL-1β的表達促進腫瘤細胞的增殖。抑制腫瘤細胞的自噬可能是IL-1β促進肺癌發(fā)展的作用機制。
[Abstract]:Objective: to study the mechanism of IL-1 尾 on macrophage promoting proliferation of lung cancer cells. Methods: the proliferation of human lung cancer cell line A549 NCI-H520 and macrophage. Brd U-ELISA was used to detect the proliferation of human lung cancer cell line A549 and Brd U-ELISA. Real-time PCR was used to detect the expression of IL-1 尾 mRNA in macrophages and A549 NCI-H 520 cells. The neutralizing antibody of IL-1 尾 was used to inhibit the activity of IL-1 尾 and to observe the role of IL-1 尾 in promoting the proliferation of lung cancer cells. The expression of the autophagy marker Beclin 1 in lung cancer cells was detected by Western blot assay. Results the OD value of A549 cells co-cultured with macrophages was increased from (0.41 鹵0.06) to (1.13 鹵0.10). The OD value of A549 cells increased with the increase of co-cultured macrophages (P0.05). After co-culture with different concentrations of macrophages, the change trend of OD value of NCI-H520 cells was similar to that of A549 cells detected by .Real-time PCR: after co-culture, the changes of OD value of NCI-H520 cells were similar to those of A549 cells. The expression of IL-1 尾 mRNA in macrophages was significantly up-regulated and time-dependent, and significantly higher than that in lung cancer cells. The cell proliferation was detected by BrdU Elisa after the addition of IL-1 尾 neutralizing antibody. The results showed that IL-1 尾 neutralizing antibody could significantly inhibit the proliferation of lung cancer cells A549 and NCI-H520. Western blot assay showed that IL-1 尾 could significantly inhibit the expression of Beclin1 in tumor cells. Conclusion: macrophages and lung cancer cells promote the proliferation of tumor cells by enhancing the expression of IL-1 尾. Inhibition of autophagy of tumor cells may be the mechanism of IL-1 尾 promoting the development of lung cancer.
【作者單位】： 蚌埠醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;同濟大學(xué)附屬同濟醫(yī)院檢驗科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81272603,81472179) 安徽省自然科學(xué)基金(KJ2014A162)資助項目
【分類號】：R734.2

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本文編號：2077791