本文選題：乳腺癌 + miR-29b　； 參考：《南昌大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：乳腺癌(Breast Cancer)是一種女性惡性腫瘤,對患者身心產(chǎn)生巨大傷害。目前對于造成乳腺癌患者死亡的具體原因機(jī)制并不清楚。在腫瘤等多種疾病中,微小RNA(microNRA,miRNA)具有重要的功能,miRNA既可作為抑癌基因也可作為致癌基因,從而在腫瘤發(fā)生發(fā)展的全過程中發(fā)揮不同的作用,同時(shí)miRNA自身也可以發(fā)生突變或缺失等現(xiàn)象,進(jìn)而影響相關(guān)基因的表達(dá)發(fā)生異常。對miRNA進(jìn)行分析,可發(fā)現(xiàn)多種miRNA與生命活動(dòng)關(guān)鍵蛋白和信號(hào)通路的調(diào)節(jié)有關(guān),通過對這些蛋白和通路進(jìn)行研究,可了解miRNA發(fā)揮的作用的具體機(jī)制。而乳腺癌的發(fā)生發(fā)展與轉(zhuǎn)移等過程是由許多miRNA信號(hào)分子調(diào)控的,通過上述通路調(diào)節(jié)的研究,我們可以得出miRNA在乳腺癌中的的作用,從而為乳腺癌的前期診斷和后期治療提供一些新的思路和方法。miR-29b作為miRNA中的成員之一,參與了多種腫瘤細(xì)胞的增殖、分化、凋亡、侵襲和轉(zhuǎn)移過程。miR-29b已成為與腫瘤診斷、治療和預(yù)后相關(guān)的具有潛在價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物。然而,miR-29b在乳腺癌中的作用目前尚未明確,因此,研究miR-29b在乳腺癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用及其作用靶點(diǎn)的探討十分具有意義。目的:探討微小RNA-29b(miRNA-29b)在乳腺癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)水平,分析miRNA-29b的表達(dá)與乳腺癌患者臨床病理參數(shù)及預(yù)后的相關(guān)性,觀察miRNA-29b對乳腺癌細(xì)胞周期、增殖、凋亡和遷移的影響,生物信息學(xué)預(yù)測miRNA-29b的靶基因,并初步探討其可能的作用機(jī)制。方法:采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法檢測miR-29b在乳腺癌細(xì)胞株和乳腺癌患者癌組織中的表達(dá),采用總RNA提取試劑盒提取新鮮冰凍組織及細(xì)胞株中總RNA,使用PrimeScript RT試劑盒反轉(zhuǎn)錄法合成cDNA,ABI 7500熒光定量PCR儀進(jìn)行PCR反應(yīng);采用統(tǒng)計(jì)分析法對乳腺癌癌組織中mi R-29b水平與患者臨床病理參數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析。CCK8法和細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)分別檢測過表達(dá)mi R-29b后乳腺癌細(xì)胞增殖和遷移,流式細(xì)胞術(shù)檢測乳腺癌細(xì)胞的細(xì)胞周期和凋亡情況。通過TargetScan和miRanda等靶基因預(yù)測數(shù)據(jù)庫對miR-29b的靶基因進(jìn)行預(yù)測,分析miR-29b過表達(dá)與HER-2表達(dá)的相關(guān)性,研究miR-29b過表達(dá)對HER-2蛋白的影響,Western blotting檢測過表達(dá)miR-29b的乳腺癌細(xì)胞中HER-2的表達(dá),初步驗(yàn)證miR-29b的作用靶點(diǎn)。結(jié)果:miR-29b在乳腺癌組織和乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)顯著下調(diào);miR-29b過表達(dá)能夠抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖,促進(jìn)起凋亡,并減弱其遷移和侵襲能力(P0.01);miR-29b與HER-2存在直接靶向負(fù)作用關(guān)系,乳腺癌患者癌組織中mi R-29b的表達(dá)水平與患者年齡和浸潤程度之間無顯著相關(guān)性(P0.05),而與患者乳腺癌組的腫瘤大小和HER-2及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有顯著相關(guān)性(P0.01),乳腺癌患者的預(yù)后與乳腺癌組織中miR-29b的表達(dá)有很明顯的關(guān)系:miR-29b表達(dá)越低,患者預(yù)后越差(P0.01)
[Abstract]:Breast Cancer (Breast Cancer) is a female malignant tumor that causes great damage to the body and mind of patients. The specific causes of breast cancer deaths are unclear. In many diseases, such as tumor, microRNAs have important function: miRNAs can be used as tumor suppressor gene and oncogene, so they play different roles in the whole process of tumorigenesis and development. At the same time, miRNA itself can be mutated or deleted, thus affecting the abnormal expression of related genes. Through the analysis of miRNA, we can find that many miRNAs are related to the regulation of vital proteins and signaling pathways. Through the study of these proteins and pathways, we can understand the specific mechanism of miRNA's action. However, the development and metastasis of breast cancer are regulated by many miRNA signaling molecules. Through the study of the regulation of these pathways, we can conclude the role of miRNA in breast cancer. As a member of miRNA, miR-29b is involved in the proliferation, differentiation, apoptosis, invasion and metastasis of many kinds of tumor cells. A potentially valuable tumor marker associated with treatment and prognosis. However, the role of miR-29b in breast cancer is not clear, so it is of great significance to study the role and target of miR-29b in the development of breast cancer. Objective: to investigate the expression level of miRNA-29b in breast cancer tissues and cells, analyze the relationship between miRNA-29b expression and clinicopathological parameters and prognosis of breast cancer patients, and observe the effect of miRNA-29b on cell cycle, proliferation, apoptosis and migration of breast cancer. The target gene of miRNA-29b was predicted by bioinformatics and its possible mechanism was discussed. Methods: the expression of miR-29b in breast cancer cell line and breast cancer tissue was detected by real-time fluorescent quantitative PCR. Total RNA extraction kit was used to extract total RNAs from fresh frozen tissues and cell lines. CDNAABI 7500 was synthesized by reverse transcription of primeScript RT kit for PCR reaction. The correlation between the expression of mi R-29b and the clinicopathological parameters of breast cancer tissues was analyzed by statistical analysis. The proliferation and migration of breast cancer cells after overexpression of mi R-29b were detected by CCK8 method and cell scratch assay. Cell cycle and apoptosis of breast cancer cells were detected by flow cytometry. The target gene of miR-29b was predicted by target gene prediction database such as TargetScan and miRanda. The correlation between the overexpression of miR-29b and HER-2 expression was analyzed. The effect of overexpression of miR-29b on HER-2 protein was studied. The expression of HER-2 in breast cancer cells with miR-29b overexpression was detected by Western blotting. The action target of miR-29b was preliminarily verified. Results the overexpression of miR-29b in breast cancer tissues and breast cancer cells significantly down-regulated the expression of miR-29b, which could inhibit the proliferation of breast cancer cells, promote apoptosis, and weaken the migration and invasion ability of human breast cancer cells. There was a direct and negative relationship between the expression of miR-29b and HER-2 in breast cancer tissues and breast cancer cells. There was no significant correlation between the expression of mi R-29b in breast cancer tissue and age and degree of invasion (P 0.05), but a significant correlation with tumor size, HER-2 and lymph node metastasis in patients with breast cancer (P 0.01). The lower the expression of miR-29b, the lower the expression of miR-29b in breast cancer. The worse the prognosis was (P0.01)
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.9

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 黃嘯原;用“印度閱兵”形容乳腺癌合適嗎?[J];診斷病理學(xué)雜志;2001年02期

2 張嘉慶,王殊,喬新民;乳腺癌的現(xiàn)狀和遠(yuǎn)景[J];中華外科雜志;2002年03期

3 張維彬,汪波,石靈春;中醫(yī)藥在現(xiàn)代乳腺癌治療中的運(yùn)用[J];中國中西醫(yī)結(jié)合急救雜志;2002年01期

4 薛志勇;食物與乳腺癌[J];山東食品科技;2002年04期

5 王旬果,王建軍,鄭國華;乳腺癌相關(guān)標(biāo)志物的研究進(jìn)展[J];山東醫(yī)藥;2002年33期

6 陸尚聞;;男人也患乳腺癌[J];環(huán)境;2003年12期

7 ;新技術(shù)清晰拍攝早期乳腺癌細(xì)胞[J];上海生物醫(yī)學(xué)工程;2005年04期

8 田富國;郭向陽;張華一;;乳腺癌診治研究新進(jìn)展[J];腫瘤研究與臨床;2005年S1期

9 馬濤,谷俊朝;血管內(nèi)皮生長因子與乳腺癌的臨床研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(外科學(xué)分冊);2005年01期

10 郭慶良,谷俊朝;乳腺癌和瘦素相關(guān)性研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊;2005年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 于永利;;抗乳腺癌免疫治療融合蛋白[A];中國免疫學(xué)會(huì)第四屆學(xué)術(shù)大會(huì)會(huì)議議程及論文摘要集[C];2002年

2 郭紅飛;;中醫(yī)治療乳腺癌的策略[A];江西省中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合腫瘤學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2012年

3 龐朋沙;伍會(huì)健;;乳腺癌治療靶標(biāo)的研究進(jìn)展[A];北方遺傳資源的保護(hù)與利用研討會(huì)論文匯編[C];2010年

4 陸勁松;邵志敏;吳炅;韓企夏;沈鎮(zhèn)宙;;新型維甲酸抑制乳腺癌細(xì)胞的生長及誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制研究[A];2000全國腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2000年

5 劉愛國;胡冰;;乳腺癌臨床治療進(jìn)展[A];安徽省抗癌協(xié)會(huì)第四次代表大會(huì)暨乳腺癌、肺癌專業(yè)委員會(huì)成立會(huì)議、安徽省腫瘤防治進(jìn)展學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2001年

6 張嘉慶;王殊;喬新民;;乳腺癌的現(xiàn)狀和遠(yuǎn)景[A];第一屆全國中西醫(yī)結(jié)合乳腺疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2002年

7 劉清俊;;乳腺癌綜合治療的新進(jìn)展[A];山西省抗癌協(xié)會(huì)第六屆腫瘤學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2003年

8 邵志敏;;21世紀(jì)乳腺癌治療的展望[A];第三屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會(huì)教育論文集[C];2004年

9 陳松旺;張明;;乳腺癌治療的回顧與展望[A];西部地區(qū)腫瘤學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

10 白霞;傅建新;丁凱陽;王兆鉞;阮長耿;;組織因子途徑抑制物-2在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)研究[A];第10屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 ;血檢有望揭示乳腺癌治療效果[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2004年

2 記者 鄭曉春;乳腺癌細(xì)胞擴(kuò)散基因被找到[N];科技日報(bào);2007年

3 中國軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤中心主任 宋三泰;乳腺癌有了新療法[N];中國婦女報(bào);2002年

4 王艷紅;抑制ＤＮＡ修補(bǔ)可消滅乳腺癌細(xì)胞[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年

5 詹建;乳腺癌飲食 兩個(gè)時(shí)期不一樣[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2006年

6 辛君;乳腺癌擴(kuò)散基因“浮出水面”[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2009年

7 記者 毛黎;美發(fā)現(xiàn)有效抑制乳腺癌細(xì)胞生長的分子[N];科技日報(bào);2010年

8 記者 吳春燕　通訊員 王麗霞;乳腺癌治療將有新途徑[N];光明日報(bào);2011年

9 王樂　沈基飛;我科學(xué)家發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致乳腺癌耐藥的新標(biāo)志物[N];科技日報(bào);2011年

10 劉霞;一種天然分子能阻止乳腺癌惡化[N];科技日報(bào);2011年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 柴紅燕;疾病狀態(tài)下CYP4Z1和4A的生物學(xué)行為及其藥物干預(yù)研究[D];武漢大學(xué);2012年

2 李凱;ID(inhibitor of DNA binding)家族蛋白調(diào)控乳腺細(xì)胞的分化并影響乳腺癌的預(yù)后[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 江一舟;乳腺癌新輔助化療前后基因變異檢測及其功能論證[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 馬邵;酪氨酸去磷酸化增強(qiáng)表皮生長因子受體在乳腺癌治療中靶向性的研究[D];山東大學(xué);2015年

5 姚若斯;精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶PRMT7誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞發(fā)生表皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)換及轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制研究[D];東北師范大學(xué);2015年

6 侯培鋒;α-酮戊二酸二甲酯(DM-2KG)上調(diào)缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)誘發(fā)高致瘤性干細(xì)胞樣乳腺癌細(xì)胞機(jī)制研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2014年

7 李麗麗;分泌蛋白SHON調(diào)控乳腺癌細(xì)胞EMT的分子機(jī)制研究[D];東北師范大學(xué);2015年

8 陳麗艷;PI3K抑制劑聯(lián)合組蛋白去乙酰化酶抑制劑對乳腺癌協(xié)同殺傷作用的分子機(jī)制研究[D];延邊大學(xué);2015年

9 樸俊杰;乳腺癌差異基因篩選及PAIP1對其生物學(xué)行為的影響[D];延邊大學(xué);2015年

10 汪[?如;染色體6q25.1區(qū)域基因多態(tài)性與乳腺癌遺傳易感性的關(guān)聯(lián)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 杜文英;乳腺癌分子亞型的臨床與病理特點(diǎn)[D];鄭州大學(xué);2011年

2 單系金;Mfn2磷酸化修飾對其調(diào)控乳腺癌細(xì)胞增殖功能的重要性的研究[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

3 徐晶;缺氧對乳腺癌細(xì)胞miR-210表達(dá)及侵襲能力的影響[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

4 李麗;Mfn2對乳腺癌細(xì)胞MCF-7侵襲遷移能力的影響及機(jī)制探究[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

5 楊洋;醌氧化還原酶及其抑制劑在乳腺癌增殖與遷移中的作用研究[D];延邊大學(xué);2015年

6 張秀娟;免疫組化與熒光原位雜交檢測乳腺癌Her-2表達(dá)的對比研究及17號(hào)染色多體對檢測結(jié)果的影響[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2014年

7 韓晶;納米脂質(zhì)體多西他賽抑制乳腺癌細(xì)胞增殖降低骨髓毒性的機(jī)制[D];安徽大學(xué);2015年

8 鐘顯峰;乳腺癌的分子亞型與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系研究[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2014年

9 張碩穩(wěn);MTDH、IκB、NF-κB P65在乳腺癌組織中的表達(dá)及意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

10 謝少利;RNAi阻低UBE3A后對乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231生物學(xué)行為的影響及其機(jī)制研究[D];川北醫(yī)學(xué)院;2015年

，

本文編號(hào)：2010920