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miR-185通過(guò)調(diào)控E2F6抑制肺鱗癌細(xì)胞增殖和侵襲

發(fā)布時(shí)間:2018-06-09 20:13

  本文選題:肺鱗癌 + miR- ; 參考:《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年02期


【摘要】:目的探討微小RNA-185(micro RNA-185,miR-185)對(duì)肺鱗癌細(xì)胞增殖和侵襲能力的作用及其可能的作用機(jī)制。方法人肺鱗癌細(xì)胞系(NCI-H520、NCI-H226)以及正常肺上皮細(xì)胞(BEAS-2B)為實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞;q RT-PCR檢測(cè)miR-185表達(dá)量;miR-NC(對(duì)照)和miR-185 mimics(miR-185類似物)利用Turbofect進(jìn)行轉(zhuǎn)染;Western blot檢測(cè)E2F6的蛋白表達(dá)量;雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)miR-185與E2F6的靶向調(diào)控關(guān)系;MTT檢測(cè)細(xì)胞的增殖能力;細(xì)胞侵襲試劑盒檢測(cè)細(xì)胞的侵襲能力;構(gòu)建pc DNA.3.1-E2F6重組載體,并轉(zhuǎn)染肺鱗癌細(xì)胞過(guò)表達(dá)E2F6。結(jié)果 miR-185表達(dá)量在肺鱗癌細(xì)胞中顯著降低(P0.01)。miR-185靶向抑制E2F6基因(P0.05)。轉(zhuǎn)染miR-185 mimics顯著上調(diào)miR-185的細(xì)胞含量(P0.01)并抑制E2F6蛋白表達(dá)(P0.01),肺鱗癌細(xì)胞增殖能力(P0.05或P0.01)和侵襲能力(P0.05)亦顯著受抑。轉(zhuǎn)染pc DNA.3.1-E2F6到miR-185含量升高的細(xì)胞,E2F6蛋白表達(dá)量顯著升高(P0.01)且細(xì)胞增殖(P0.01)和侵襲能力(P0.05)上升。結(jié)論 miR-185可以通過(guò)靶向E2F6抑制肺鱗癌細(xì)胞增殖和侵襲。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of microRNA-185 micro RNA-185 miR-185 on proliferation and invasion of lung squamous cell carcinoma cells and its possible mechanism. Methods the expression of miR-185 in human lung squamous cell carcinoma cell line NCI-H520 (NCI-H226) and normal lung epithelial cell line (BEAS-2B) was detected by RT-PCR. The protein expression of E2F6 was detected by turbofect transfection with Western blot (control) and miR-185 mimicsmiR-185 analogue. Double luciferase reporter gene was used to detect the targeted regulatory relationship between miR-185 and E2F6. MTT assay was used to detect cell proliferation, cell invasion kit was used to detect cell invasion ability, and pc DNA.3.1-E2F6 recombinant vector was constructed and transfected into lung squamous cell carcinoma cells for overexpression of E2F6. Results the expression of miR-185 was significantly decreased in lung squamous cell carcinoma cells. Transfection of miR-185 mimics significantly up-regulated the cell content of miR-185 (P0.01) and inhibited the expression of E2F6 protein (P0.01a), and the proliferation ability of lung squamous cell carcinoma cells (P0.05 or P0.01) and invasion ability (P0.05) were also significantly inhibited. The expression of E2F6 protein in cells transfected with pc DNA.3.1-E2F6 to miR-185 increased significantly (P0.01), and the cell proliferation P0.01) and invasiveness (P0.05) increased. Conclusion miR-185 can inhibit the proliferation and invasion of lung squamous cell carcinoma cells by targeting E 2 F 6.
【作者單位】: 陜西省人民醫(yī)院胸外科;陜西省新安中心醫(yī)院婦產(chǎn)科;陜西省人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【基金】:陜西省自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(2014JM2-8166)~~
【分類號(hào)】:R734.2

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本文編號(hào):2000690

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