本文選題：乳腺癌 + 解聚素-金屬蛋白酶　； 參考：《山東醫(yī)藥》2017年04期

【摘要】：目的探討解聚素-金屬蛋白酶17(ADAM17)-短發(fā)夾RNA(shRNA)對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖的影響及其可能機(jī)制。方法將MCF-7細(xì)胞分為無(wú)義序列組、對(duì)照組、轉(zhuǎn)染組。針對(duì)ADAM17基因設(shè)計(jì)合成4個(gè)特異性ADAM17-shRNA(ADAM17-shRNA-1219、ADAM17-shRNA-1508、ADAM17-shRNA-1134、ADAM17-shRNA-297),采用電穿孔法轉(zhuǎn)染MCF-7細(xì)胞:無(wú)義序列組轉(zhuǎn)染無(wú)義序列ADAM17-sh NC,轉(zhuǎn)染組分別轉(zhuǎn)染ADAM17-shRNA序列ADAM17-shRNA-1219、ADAM17-shRNA-1508、ADAM17-shRNA-1134、ADAM17-shRNA-297。對(duì)照組加入空白PBS,分別采用利用Real-time PCR、Western blotting法、i CELLigence法及流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組ADAM17 mRNA表達(dá)水平、ADAM17蛋白表達(dá)情況、細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)和增殖活性及細(xì)胞周期變化。結(jié)果 4個(gè)ADAM17-shRNA序列對(duì)MCF-7細(xì)胞的ADAM17基因表達(dá)均有抑制作用,以shRNA1219載體的抑制效率最高,與對(duì)照組和無(wú)義序列組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05);轉(zhuǎn)染組ADAM17 mRNA及蛋白的表達(dá)水平明顯低于無(wú)義序列組和對(duì)照組(P均0.05);轉(zhuǎn)染組細(xì)胞增殖活性和細(xì)胞生長(zhǎng)速度較無(wú)義序列組和對(duì)照組均顯著降低(P均0.05);轉(zhuǎn)染組細(xì)胞進(jìn)入S期和G2/M期的比例降低,絕大多數(shù)細(xì)胞停留在G0/G1期,與對(duì)照組、無(wú)義序列組比較差異顯著(P均0.05)。結(jié)論 ADAM17-shRNA可抑制人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的增殖活性,機(jī)制與其對(duì)ADAM17基因具有沉默作用有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of depolymerin-metalloproteinase-17 (ADAM17) -short hairpin RNA-shRNAs (RNA-shRNAs) on the proliferation of human breast cancer MCF-7 cells and its possible mechanism. Methods MCF-7 cells were divided into three groups: nonsense sequence group, control group and transfection group. Four specific ADAM17-shRNA-1219 ADAM17-shRNA-15008 and ADAM17-shRNA-1134-ADAM17-shRNA-297 were designed and synthesized for ADAM17 gene. MCF-7 cells were transfected with ADAM17-shRNA-1134-ADAM17-shRNA-297 by electroporation. The MCF-7 cells were transfected with ADAM17-sh ncRNA-1219 ADAM17-shRNA-1219 ADAM17-shRNA-1508ADAM17-shRNA-1134ADAM17-shRNA-297. the cells were transfected with ADAM17-sh ncRNA-1219ADAM17-shRNA-1219ADAM17-shRNA-1508 ADAM17-shRNA-1134ADAM17-shRNA-297. In the control group, the expression of ADAM17 protein, cell growth curve, proliferative activity and cell cycle were detected by Real-time PCR Western blotting CELLigence and flow cytometry. Results the ADAM17 gene expression in MCF-7 cells was inhibited by four ADAM17-shRNA sequences, and the inhibition efficiency of shRNA1219 vector was the highest. The expression levels of ADAM17 mRNA and protein in transfection group were significantly lower than those in nonsense sequence group and control group, and the cell proliferation activity and cell growth rate in transfection group were significantly lower than those in control group and control group. The percentage of cells in S phase and G 2 / M phase in transfection group was significantly lower than that in control group and S phase, and the ratio of S phase and G 2 / M phase in transfection group was significantly lower than that in control group. Most of the cells remained in the G0/G1 phase, and there were significant differences between the control group and the nonsense sequence group (P < 0.05). Conclusion ADAM17-shRNA can inhibit the proliferation of human breast cancer MCF-7 cells, and the mechanism is related to its silencing effect on ADAM17 gene.
【作者單位】： 華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院;
【基金】：河北省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(C2010001767) 唐山市科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目[唐科計(jì)(2014)16號(hào)]
【分類(lèi)號(hào)】：R737.9

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7 馬f，

本文編號(hào)：1962077