本文選題：乳腺癌 + 解聚素-金屬蛋白酶��； 參考：《山東醫(yī)藥》2017年04期

【摘要】：目的探討解聚素-金屬蛋白酶17(ADAM17)-短發(fā)夾RNA(shRNA)對人乳腺癌MCF-7細胞增殖的影響及其可能機制。方法將MCF-7細胞分為無義序列組、對照組、轉染組。針對ADAM17基因設計合成4個特異性ADAM17-shRNA(ADAM17-shRNA-1219、ADAM17-shRNA-1508、ADAM17-shRNA-1134、ADAM17-shRNA-297),采用電穿孔法轉染MCF-7細胞:無義序列組轉染無義序列ADAM17-sh NC,轉染組分別轉染ADAM17-shRNA序列ADAM17-shRNA-1219、ADAM17-shRNA-1508、ADAM17-shRNA-1134、ADAM17-shRNA-297。對照組加入空白PBS,分別采用利用Real-time PCR、Western blotting法、i CELLigence法及流式細胞儀檢測各組ADAM17 mRNA表達水平、ADAM17蛋白表達情況、細胞生長曲線和增殖活性及細胞周期變化。結果 4個ADAM17-shRNA序列對MCF-7細胞的ADAM17基因表達均有抑制作用,以shRNA1219載體的抑制效率最高,與對照組和無義序列組比較差異均具有統(tǒng)計學意義(P均0.05);轉染組ADAM17 mRNA及蛋白的表達水平明顯低于無義序列組和對照組(P均0.05);轉染組細胞增殖活性和細胞生長速度較無義序列組和對照組均顯著降低(P均0.05);轉染組細胞進入S期和G2/M期的比例降低,絕大多數(shù)細胞停留在G0/G1期,與對照組、無義序列組比較差異顯著(P均0.05)。結論 ADAM17-shRNA可抑制人乳腺癌MCF-7細胞的增殖活性,機制與其對ADAM17基因具有沉默作用有關。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of depolymerin-metalloproteinase-17 (ADAM17) -short hairpin RNA-shRNAs (RNA-shRNAs) on the proliferation of human breast cancer MCF-7 cells and its possible mechanism. Methods MCF-7 cells were divided into three groups: nonsense sequence group, control group and transfection group. Four specific ADAM17-shRNA-1219 ADAM17-shRNA-15008 and ADAM17-shRNA-1134-ADAM17-shRNA-297 were designed and synthesized for ADAM17 gene. MCF-7 cells were transfected with ADAM17-shRNA-1134-ADAM17-shRNA-297 by electroporation. The MCF-7 cells were transfected with ADAM17-sh ncRNA-1219 ADAM17-shRNA-1219 ADAM17-shRNA-1508ADAM17-shRNA-1134ADAM17-shRNA-297. the cells were transfected with ADAM17-sh ncRNA-1219ADAM17-shRNA-1219ADAM17-shRNA-1508 ADAM17-shRNA-1134ADAM17-shRNA-297. In the control group, the expression of ADAM17 protein, cell growth curve, proliferative activity and cell cycle were detected by Real-time PCR Western blotting CELLigence and flow cytometry. Results the ADAM17 gene expression in MCF-7 cells was inhibited by four ADAM17-shRNA sequences, and the inhibition efficiency of shRNA1219 vector was the highest. The expression levels of ADAM17 mRNA and protein in transfection group were significantly lower than those in nonsense sequence group and control group, and the cell proliferation activity and cell growth rate in transfection group were significantly lower than those in control group and control group. The percentage of cells in S phase and G 2 / M phase in transfection group was significantly lower than that in control group and S phase, and the ratio of S phase and G 2 / M phase in transfection group was significantly lower than that in control group. Most of the cells remained in the G0/G1 phase, and there were significant differences between the control group and the nonsense sequence group (P < 0.05). Conclusion ADAM17-shRNA can inhibit the proliferation of human breast cancer MCF-7 cells, and the mechanism is related to its silencing effect on ADAM17 gene.
【作者單位】： 華北理工大學附屬醫(yī)院;
【基金】：河北省自然科學基金資助項目(C2010001767) 唐山市科學技術研究與發(fā)展計劃項目[唐科計(2014)16號]
【分類號】：R737.9

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