精氨酸酶抑制劑nor-NOHA誘導(dǎo)HepG2肝癌細(xì)胞凋亡并抑制其侵襲和遷移
本文選題:肝細(xì)胞癌 + 精氨酸酶。 參考:《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2017年04期
【摘要】:目的探討精氨酸酶抑制劑nor-NOHA對(duì)HepG2肝癌細(xì)胞的抑制作用及其機(jī)制。方法采用CCK-8法及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)(0.0、0.5、1.0、2.0、3.0)ng/μL nor-NOHA對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞的增殖抑制作用和細(xì)胞凋亡的促進(jìn)作用;Western blot法檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞內(nèi)精氨酸酶1(Arg1)、P53、基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)以及上皮鈣黏素(ECD)蛋白表達(dá)的影響;實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(i NOS)m RNA的表達(dá);Griess法檢測(cè)各組HepG2細(xì)胞產(chǎn)生的一氧化氮(NO)濃度;TranswellTM實(shí)驗(yàn)及細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)測(cè)定HepG2細(xì)胞的侵襲、遷移能力。結(jié)果 nor-NOHA抑制肝癌細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)其凋亡;nor-NOHA降低Arg1、MMP-2的表達(dá)水平,升高P53、ECD的水平并增加NO的合成;nor-NOHA降低肝癌細(xì)胞的侵襲、遷移能力。結(jié)論nor-NOHA通過(guò)抑制Arg1,可誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡并降低其侵襲、遷移能力,其機(jī)制與升高i NOS的表達(dá),產(chǎn)生高濃度NO有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the inhibitory effect of arginase inhibitor nor-NOHA on HepG2 hepatoma cells and its mechanism. Methods CCK-8 assay and flow cytometry were used to detect the inhibitory effect of nor-NOHA on proliferation and apoptosis of human hepatoma HepG2 cells. Western blot assay was used to detect the intracellular arginase 1 Arg1 P53, matrix metalloproteinase 2 (MMP-2) and epithelial cadherin (E-cadherin) in human hepatoma HepG2 cells. The effect of ECD) protein expression; The expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) NOS)m RNA was detected by real-time quantitative PCR. The concentration of nitric oxide (no) produced by HepG2 cells in each group was detected by Griess method. The invasion and migration ability of HepG2 cells was measured by cell scratch assay and cell scratch assay. Results nor-NOHA inhibited the proliferation of hepatoma cells and induced apoptosis. Nor-NOHA decreased the expression of Arg1 and MMP-2, increased the level of P53, and increased the synthesis of no. Nor-NOHA decreased the invasion and migration ability of hepatoma cells. Conclusion nor-NOHA can induce apoptosis and decrease the invasion and migration ability of hepatoma cells by inhibiting Arg 1. The mechanism is related to the increase of I NOS expression and the production of high concentration no.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院肝膽外科;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81372481)
【分類號(hào)】:R735.7
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,本文編號(hào):1961815
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