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莪術(shù)醇對膀胱癌細(xì)胞增殖和凋亡及EZH2表達(dá)的影響

發(fā)布時間:2018-05-14 22:30

  本文選題:膀胱癌 + 莪術(shù)醇; 參考:《桂林醫(yī)學(xué)院》2017年碩士論文


【摘要】:目的:我們前期研究證實(shí)EZH2基因在膀胱癌組織中高表達(dá),在膀胱癌進(jìn)展中有著重要的作用,而通過文獻(xiàn)可知莪術(shù)醇能夠?qū)Χ喾N腫瘤的生長產(chǎn)生影響。因此通過體外實(shí)驗(yàn)研究莪術(shù)醇對兩種人膀胱癌細(xì)胞系(EJ、T24)生長的影響,以及是否對這兩種細(xì)胞系中EZH2的表達(dá)產(chǎn)生影響,初步探討莪術(shù)醇在膀胱癌中可能的作用機(jī)制。方法:用不同濃度莪術(shù)醇(0、12.5、25、50、100mg/L)干預(yù)處理人膀胱癌EJ和T24細(xì)胞。1.使用CCK-8法檢測莪術(shù)醇對EJ和T24細(xì)胞增殖抑制作用;2.通過克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測莪術(shù)醇對兩種細(xì)胞克隆形成能力的影響;3.通過流式細(xì)胞術(shù)PI染色法測定莪術(shù)醇對EJ和T24細(xì)胞凋亡的影響;4.q RT-PCR法分析莪術(shù)醇對兩種細(xì)胞中EZH2m RNA表達(dá)的影響;5.Western blot法檢測兩種細(xì)胞中EZH2蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:1.CCK-8法結(jié)果表明,莪術(shù)醇對兩種膀胱癌細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用,并且該作用隨著藥物濃度增加和孵育時間延長而增強(qiáng)。2.克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,莪術(shù)醇處理組與對照組相比,細(xì)胞克隆形成能力下降,細(xì)胞增殖受到抑制。3.流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率,結(jié)果顯示膀胱癌EJ細(xì)胞凋亡率分別為:(0.50±0.05)%、(3.60±0.60)%、(6.20±1.00)%、(16.50±1.50)%、(29.00±2.15)%;T24細(xì)胞凋亡率為(2.40±0.10)%、(4.93±0.15)%、(6.03±0.15)%、(13.50±0.89)%、(25.80±0.66)%;莪術(shù)醇處理組EJ和T24細(xì)胞凋亡率與對照組相比均增加,并且隨著莪術(shù)醇濃度增加其細(xì)胞凋亡率也逐漸增加,存在一定的濃度依賴性。4.q RT-PCR和Western blot法結(jié)果均顯示莪術(shù)醇對膀胱癌EJ和T24細(xì)胞中EZH2基因的表達(dá)有明顯抑制作用。結(jié)論:莪術(shù)醇對膀胱癌EJ和T24細(xì)胞有增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡的作用,其機(jī)制可能與下調(diào)細(xì)胞中EZH2基因表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:Objective: our previous study confirmed the high expression of EZH2 gene in bladder cancer tissue, and it has an important role in the progression of bladder cancer. It is known that curcumaol can affect the growth of various tumors. Therefore, the effects of zedool on the growth of two human bladder cancer cell lines (EJ, T24) are studied in vitro. The expression of EZH2 in the two cell lines was affected, and the possible mechanism of curcumal in bladder cancer was preliminarily discussed. Methods: using different concentrations of zedoary alcohol (0,12.5,25,50100mg/L) to treat human bladder cancer EJ and T24 cells.1. using CCK-8 method to detect the proliferation inhibition of zedool to EJ and T24 cells, and 2. to detect zedoary by cloning and forming experiment. Effects of alcohol on the formation of two cell clones; 3. the effects of curcumal on the apoptosis of EJ and T24 cells were measured by flow cytometry PI staining; 4.q RT-PCR was used to analyze the effect of zedool on the expression of EZH2m RNA in two cells; 5.Western blot method was used to detect the expression of EZH2 protein in two cells. Results: 1.CCK-8 method results showed that zedoary The effect of alcohol on the proliferation of two bladder cancer cells was obviously inhibited, and the effect of this effect was enhanced with the increase of the concentration of drug and the prolongation of incubation time. The experimental results showed that the cell clone formation ability of zedorol treatment group was lower than that of the control group, and the cell proliferation was inhibited by the inhibition of.3. flow cytometry to detect the apoptosis rate of.2. cells. The apoptotic rate of EJ cells in bladder cancer cells was (0.50 + 0.05)%, (3.60 + 0.60)%, (6.20 + 1)%, (16.50 + 1.50)%, (29 + 2.15)%, T24 cell apoptosis rate was (2.40 + 0.10)%, (4.93 +%)%, (1%)%, (6.20)%, EJ and T24 cell apoptosis rate increased compared with the control group, and with zedoary zedoary zedoary The apoptosis rate of cells increased gradually. There was a certain concentration dependent.4.q RT-PCR and Western blot method. The results showed that curcumazol could inhibit the expression of EZH2 gene in EJ and T24 cells of bladder cancer. Conclusion: the effect of curcumal on the proliferation and apoptosis of EJ and T24 cells in bladder cancer is possible, and the mechanism may be possible. It is related to the downregulation of EZH2 gene expression in cells.

【學(xué)位授予單位】:桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R737.14

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