本文選題：非小細胞肺癌 + 肺腺癌�。� 參考：《吉林大學》2017年博士論文

【摘要】：肺癌是一種致死性、惡性疾病,因其發(fā)病率逐年增加、預后差,是嚴重威脅人類的公共健康問題。雖然有大量針對肺癌的分子生物學實驗,但我們對肺癌的發(fā)生、發(fā)展中的分子生物學機制仍不十分清楚。sprouty1是已知的RTK信號轉導通路的抑制劑,可以通過調(diào)節(jié)EGF、FGF、PDGF等多種途徑介導的信號轉導通路影響細胞的增殖、分化、轉移。鑒于國內(nèi)外尚沒有sprouty1在肺腺癌中的表達及其作用機制的相關報道,我們首先構建sprouty1基因敲除小鼠模型,利用免疫組織化學染色和免疫熒光染色的實驗方法,驗證sprouty1在肺組織中的表達情況,觀察sprouty1基因敲除后對小鼠肺組織表型的影響、以及對Ⅱ型肺泡上皮細胞功能的影響。其次,通過HE染色、免疫組化染色的方法比較sprouty1基因敲除小鼠與野生型小鼠的肺癌發(fā)病率的差異,以及兩種基因型小鼠肺組織中TTF1的表達情況。而且將在體外利用細胞轉染技術構建sprouty1過表達的A549細胞系,驗證sprouty1對肺癌細胞增殖、分化的影響。最后,利用免疫熒光染色、western-blot等方法進一步探討sprouty1在肺腺癌發(fā)生、發(fā)展中的生物學功能,以及可能的作用機制,最終揭示sprouty1的抑癌作用本質。通過上述實驗,我們得到以下結果:1、sprouty1在肺組織中高度表達,主要是由Ⅱ型肺泡上皮細胞(alveolar epithelial cell typeⅡ,AECⅡ)表達,sprouty1基因敲除后導致AECⅡ表達PCNA和Ki-67增加,說明sprouty1基因敲除后促進Ⅱ型肺泡上皮細胞的增殖。2、sprouty1基因敲除小鼠較野生型小鼠的肺癌發(fā)生率明顯增加(P0.01),且腫瘤的病理學分型符合肺腺癌。3、體外過表達sprouty1是A549細胞的細胞周期相關蛋白表達減少,說明sprouty1可抑制肺腺癌細胞的增殖。4、sprouty1基因敲除后導致小鼠肺組織中EGFR、FGFR2和p ERK表達增加,且p ERK與PCNA存在共染色,說明sprouty是通過EGF、FGF介導的ERK信號轉導通路調(diào)控細胞的增殖。5、sprouty1基因敲除后小鼠肺組織中vimentin、β1-integrin、SMA、PDGFRβ和fibronectin的蛋白表達增加,說明sprouty1可通過調(diào)控細胞的EMT抑制肺腺癌的侵襲。通過以上實驗結果,我們認為sprouty1可被認為是一種肺腺癌的抑癌基因,主要通過抑制EGF、FGF介導的Ras/ERK信號轉導通路和抑制腺癌細胞的EMT這兩大機制,從而抑制肺腺癌細胞的增殖和侵襲。未來,sprouty1也許可以成為肺癌治療的新靶點。
[Abstract]:Lung cancer is a fatal and malignant disease. Because of its increasing incidence and poor prognosis, lung cancer is a serious public health problem. Although there are a lot of molecular biological experiments aimed at lung cancer, we do not know that the molecular biological mechanism of lung cancer is very clear that .sprouty1 is an inhibitor of known RTK signal transduction pathway. It can affect the proliferation, differentiation and metastasis of cells by regulating the signal transduction pathway mediated by EGFG FGF- PDGF and other pathways. Since there are no reports on the expression and mechanism of sprouty1 in lung adenocarcinoma at home and abroad, we first constructed the sprouty1 gene knockout mouse model and used immunohistochemical staining and immunofluorescence staining methods. To verify the expression of sprouty1 in lung tissue and observe the effect of sprouty1 gene knockout on the phenotype of lung tissue and the function of type 鈪，

本文編號：1861588