發(fā)布時(shí)間：2018-04-15 11:03

  本文選題：H22 + 地塞米松�。� 參考：《第四軍醫(yī)大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：研究背景:原發(fā)性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC),是惡性腫瘤,生存期很短,且發(fā)病率仍在逐年遞增,我國肝癌患者占世界肝癌病例的一半。糖皮質(zhì)激素(glucocorticoid,GC)是臨床常用的藥物之一,并常作為化療方案中的必要組成。有意思的是,關(guān)于糖皮質(zhì)激素在腫瘤治療中的作用,評(píng)價(jià)卻眾口不一。一般認(rèn)為,糖皮質(zhì)激素可改善腫瘤患者化療中的多種毒副作用,提高患者對(duì)化療的耐受度。吊詭的是,患者對(duì)化療耐受性的提高,往往也意味著腫瘤細(xì)胞對(duì)化療耐藥性的升高。并且,糖皮質(zhì)激素具有很強(qiáng)的免疫抑制作用。傳統(tǒng)的觀念認(rèn)為,免疫系統(tǒng)是機(jī)體抑制腫瘤發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移的重要屏障,糖皮質(zhì)激素的應(yīng)用不可避免的將抑制機(jī)體的免疫效應(yīng),消弱免疫系統(tǒng)的這些抗腫瘤的免疫編輯(Immunoediting)作用。不少研究者發(fā)現(xiàn),糖皮質(zhì)激素具有誘導(dǎo)血液腫瘤細(xì)胞凋亡的作用,但對(duì)實(shí)體瘤細(xì)胞的凋亡卻有抑制作用,從而影響化療的效果,據(jù)此建議再化療時(shí)不用糖皮質(zhì)激素藥物。免疫反應(yīng)、炎癥與腫瘤之間的關(guān)系非常錯(cuò)綜。與多數(shù)人的觀點(diǎn)相反,腫瘤免疫的發(fā)現(xiàn)者Prehn教授長期以來堅(jiān)持免疫反應(yīng)促進(jìn)腫瘤的發(fā)展,因而建議通過抑制免疫治療腫瘤。從病理學(xué)的角度看,免疫反應(yīng)在組織形態(tài)學(xué)上就是炎癥反應(yīng)。而炎癥對(duì)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展的促進(jìn)作用是舉世公認(rèn)的。有意思的是,上述貌似截然相反的觀點(diǎn)在生物相對(duì)論的原則下得到了統(tǒng)一。生物相對(duì)論認(rèn)為,生物的壽命與繁殖力呈反向關(guān)系。免疫反應(yīng)對(duì)腫瘤細(xì)胞具有殺傷作用,使腫瘤細(xì)胞的平均生存縮短。在免疫/炎癥和其它環(huán)境應(yīng)激因素的選擇壓力下,腫瘤細(xì)胞必須通過不斷繁殖來保證生存。這種微進(jìn)化的結(jié)果就是,壓力越大,腫瘤細(xì)胞的生存期越短,其繁殖力越強(qiáng),惡性度越高,而患者的生存期越短。從生物相對(duì)論的原則出發(fā),我們推測(cè),糖皮質(zhì)激素或可通過抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡,抑制腫瘤細(xì)胞的分裂增殖,并減少其向其他器官轉(zhuǎn)移的壓力,從而使患者的生存受益。我們用小鼠的肝癌模型進(jìn)行了初步研究。小鼠Hepa22肝癌模型屬于同種移植模型,引進(jìn)我國五十多年來,已經(jīng)廣泛地應(yīng)用于腫瘤的基礎(chǔ)研究。本研究應(yīng)用小鼠H22腹水型及皮下移植型肝癌模型,觀察地塞米松這一臨床常用的糖皮質(zhì)激素對(duì)H22肝癌的生長、荷瘤小鼠的生存狀態(tài)及生存期的影響,并進(jìn)一步進(jìn)行地塞米松與化療藥的作用比較,探討化療藥對(duì)小鼠H22肝癌的影響。利用小鼠來研究其小鼠肝癌,通過延長小鼠的代瘤生存期,為地塞米松治療腫瘤、延長帶瘤生存提供相關(guān)的依據(jù),并為減少細(xì)胞凋亡而抑制腫瘤生長的觀點(diǎn)提供直接的實(shí)驗(yàn)證據(jù)。目的通過建立小鼠H22腹水型肝癌模型,觀察地塞米松和5-FU對(duì)小鼠生存期及腹水量的影響。通過建立小鼠H22皮下移植型肝癌模型,觀察地塞米松和5-FU對(duì)小鼠抑瘤率及生存期的影響。并進(jìn)一步通過流式細(xì)胞儀和Realtime-PCR,分析地塞米松對(duì)H22腫瘤的細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期、糖皮質(zhì)激素受體的表達(dá)的影響。方法1.建立小鼠H22腹水型肝癌模型,抽取腹水細(xì)胞提總RNA,做逆轉(zhuǎn)錄,PCR擴(kuò)增并進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,檢測(cè)腹水型H22腫瘤細(xì)胞中是否存在糖皮質(zhì)激素受體。2.建立小鼠H22腹水型肝癌模型,選定地塞米松的最佳劑量。3.建立小鼠H22腹水型肝癌模型,檢測(cè)地塞米松對(duì)腹水瘤的影響。4.建立小鼠H22腹水型肝癌模型,進(jìn)行地塞米松不同用藥天數(shù)的效果比較。5.建立小鼠H22腹水型肝癌模型,抽取兩組小鼠腹水細(xì)胞提總RNA,做逆轉(zhuǎn)錄并進(jìn)行Realtime-PCR,檢測(cè)使用DEX后,H22腹水細(xì)胞中的GCR是上調(diào),還是下調(diào)。6.建立小鼠H22腹水型肝癌模型,進(jìn)行5-FU和地塞米松的效果比較。7.流式細(xì)胞儀檢測(cè)DEX與對(duì)照組小鼠腹水細(xì)胞凋亡情況及細(xì)胞周期分布。8.建立小鼠H22皮下移植型肝癌模型,提取瘤塊總RNA,做逆轉(zhuǎn)錄,PCR擴(kuò)增并進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,檢測(cè)皮下移植型瘤塊中是否存在糖皮質(zhì)激素受體。9.建立小鼠H22皮下移植型肝癌模型,觀察地塞米松和5-FU對(duì)移植瘤抑瘤率的影響。10.建立小鼠H22皮下移植型肝癌模型,提取瘤塊總RNA,做逆轉(zhuǎn)錄并進(jìn)行Realtime-PCR,檢測(cè)使用DEX后,皮下移植型瘤塊中的GCR是上調(diào),還是下調(diào)。結(jié)果1.小鼠H22腹水型肝癌的腹水細(xì)胞中存在糖皮質(zhì)激素受體。2.10 mg/kg劑量組小鼠的生存期比5 mg/kg、1 mg/kg、0.5 mg/kg劑量組小鼠的生存期長,腹水量比5 mg/kg及0.5 mg/kg劑量組小鼠的腹水量少。3.地塞米松組小鼠的生存期比生理鹽水組小鼠的長,且腹水量少。4.從第5、6天開始給藥比從第7、8天開始給藥的生存期長,腹水量少。5.使用地塞米松后,H22腹水細(xì)胞中糖皮質(zhì)激素受體的表達(dá)降低。6.H22腹水型肝癌,地塞米松組和生理鹽水組小鼠的生存期比5-FU組和5-FU+DEX組小鼠的生存期長,但是腹水量多。7.使用地塞米松后,細(xì)胞凋亡比例減少,處于分裂周期的細(xì)胞比例下降。8.小鼠H22皮下移植型肝癌的瘤塊中存在糖皮質(zhì)激素受體。9.H22皮下移植型肝癌,地塞米松組和生理鹽水組小鼠的生存期均比5-FU組和5-FU+DEX組小鼠的生存期長,但是瘤塊大。10.使用地塞米松后,H22移植瘤塊中糖皮質(zhì)激素受體的表達(dá)降低。結(jié)論1.小鼠H22腹水型及移植型肝癌模型的建立非常成功。2.地塞米松可以抑制H22腹水細(xì)胞凋亡,使處于靜止期的細(xì)胞比例增多,處于分裂增殖期的細(xì)胞比例減少。并且,可以下調(diào)H22腫瘤細(xì)胞中糖皮質(zhì)激素受體的表達(dá)。3.地塞米松對(duì)小鼠H22肝癌腹水型腫瘤的生存期有明顯的延長作用,且早期用藥較晚期用藥效果好。與鹽水組小鼠腫瘤相比,地塞米松組腹水量少,生存狀態(tài)較好。然而,化療藥雖然可以有效抑制腫瘤的生長,但對(duì)H22腹水型肝癌小鼠的生存期無作用,甚至?xí)蛊渖嫫诳s短。4.化療藥對(duì)小鼠H22肝癌皮下移植瘤有明顯的抑制作用,但也會(huì)致使小鼠死亡。地塞米松對(duì)小鼠H22肝癌移植瘤雖然無明顯的抑制作用,但小鼠生存狀態(tài)良好,不會(huì)致使小鼠死亡。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7

【參考文獻(xiàn)】

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1 王瑞安;李擒龍;王敬博;覃君慧;李增山;閆慶國;;腫瘤細(xì)胞周期的長與短及凋亡的多與少——腫瘤生長的定律[J];醫(yī)學(xué)爭(zhēng)鳴;2012年03期

2 李海燕,方肇勤,梁尚華;小鼠移植性肝癌(H_(22))模型的研究及在中醫(yī)藥抗腫瘤中的應(yīng)用[J];中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志;2000年01期

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本文編號(hào)：1753827