本文選題：肝細(xì)胞癌　切入點(diǎn)：伏立諾他　出處：《華中科技大學(xué)》2015年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：第一部分伏立諾他通過抑制胸苷酸合成酶表達(dá)增強(qiáng)肝癌細(xì)胞對5-氟尿嘧啶的化療敏感性 目的：研究伏立諾他和5-氟尿嘧啶在肝癌細(xì)胞中的聯(lián)合作用,探討兩者聯(lián)用的協(xié)同效應(yīng)。 方法：用伏立諾他和(或)5-氟尿嘧啶處理HepG2、SMMC7721及BEL7402細(xì)胞。進(jìn)行細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞周期檢測、細(xì)胞凋亡檢測、普通PCR、蛋白免疫印跡、免疫組織化學(xué)及動物實(shí)驗(yàn)。 結(jié)果：伏立諾他及5-氟尿嘧啶均能抑制HepG2、SMMC7721及BEL7402細(xì)胞的增殖。在這三種細(xì)胞系中，兩者聯(lián)合作用的聯(lián)合指數(shù)均小于1,減量指數(shù)均大于1,表明兩者具有協(xié)同效應(yīng)。兩者聯(lián)用引起G0/G1期細(xì)胞周期阻滯和caspase相關(guān)通路的細(xì)胞凋亡。兩者聯(lián)用在體內(nèi)體外均使成瘤能力下降。5-氟尿嘧啶能引起胸苷酸合成酶表達(dá)的上調(diào),而無論其存在與否,伏立諾他均能抑制胸苷酸合成酶的表達(dá)。 結(jié)論：伏立諾他及5-氟尿嘧啶在肝癌中聯(lián)用具有協(xié)同效應(yīng)。兩者聯(lián)用通過引起細(xì)胞周期阻滯和凋亡以及抑制胸苷酸合成酶表達(dá)在體內(nèi)體外均抑制細(xì)胞增殖和成瘤能力。這兩者的合用或許能在肝癌治療中起到一定作用。 第二部分伏立諾他通過抑制Notch通路增強(qiáng)肝癌細(xì)胞對奧沙利鉑的化療敏感性 目的：探討伏立諾他和奧沙利鉑在肝癌細(xì)胞中的聯(lián)合作用及兩者聯(lián)用的協(xié)同效應(yīng)。 方法：用伏立諾他和(或)奧沙利鉑處理SMMC772、BEL7402及HepG2細(xì)胞。進(jìn)行細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞周期分析、細(xì)胞凋亡分析、蛋白免疫印跡、動物皮下成瘤實(shí)驗(yàn)及免疫組織化學(xué)。 結(jié)果：伏立諾他及奧沙利鉑均能抑制：SMMC7721、BEL7402及HepG2細(xì)胞的增殖。兩者聯(lián)合作用后,這三種細(xì)胞系中的聯(lián)合指數(shù)均小于1,而減量指數(shù)均大于1,表明兩者具有協(xié)同效應(yīng)。兩者聯(lián)用引起G2/M期細(xì)胞周期阻滯和caspase相關(guān)通路的細(xì)胞凋亡。在體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)中,兩者聯(lián)用均抑制成瘤能力。奧沙利鉑激活Notch信號通路表達(dá),而無論其存在與否,伏立諾他均能抑制Notch信號通路的表達(dá),從而增加奧沙利鉑的化療敏感性。 結(jié)論：體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)伏立諾他及奧沙利鉑在肝癌中協(xié)同抑制細(xì)胞增殖和成瘤能力。這是通過引起細(xì)胞周期阻滯和凋亡以及抑制]Notch通路表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。這兩種藥物的聯(lián)用可能在今后的肝癌治療中發(fā)揮作用。
[Abstract]:Part one: Volinotaxel enhances the chemosensitivity of hepatoma cells to 5-fluorouracil by inhibiting the expression of thymidine synthase. Aim: to study the synergistic effect of volenotta and 5-fluorouracil in hepatocellular carcinoma cells. Methods: HepG2SM-SMMC7721 and BEL7402 cells were treated with volenostata and (or 5-fluorouracil). Cytotoxicity test, plate clone formation test, soft Agar clone formation assay, cell cycle detection, apoptosis detection, ordinary PCR, Western blotting were performed. Immunohistochemistry and animal experiments. Results: both volenotta and 5-fluorouracil inhibited the proliferation of HepG2SMMC7721 and BEL7402 cells. The combined index of the combined action was less than 1, and the decrement index was greater than 1, which indicated that both of them had synergistic effect. Combined use of both could induce cell cycle arrest in G _ 0 / G _ 1 phase and apoptosis of caspase related pathway. In vitro and in vivo, both of them were used in vitro and in vivo. Decreased tumorigenesis. 5 fluorouracil could induce the up-regulation of thymidine synthase expression. Volenoate inhibited the expression of thymidine synthase, whether it existed or not. Conclusion: the combined use of volenotta and 5-fluorouracil in hepatocellular carcinoma has synergistic effect, which can inhibit cell proliferation and proliferation in vitro and in vivo by inducing cell cycle arrest and apoptosis and inhibiting thymidine synthase expression in vitro and in vivo. Tumor capacity. The combination of the two may play a role in the treatment of liver cancer. The second part of Volinoxat enhances the chemosensitivity of hepatoma cells to oxaliplatin by inhibiting the Notch pathway. Aim: to investigate the synergistic effect of volenotta and oxaliplatin in hepatocellular carcinoma cells. Methods: SMMC772BEL7402 and HepG2 cells were treated with volenostata and / or oxaliplatin. The cell activity, plate clone formation, soft Agar clone formation, cell cycle analysis, apoptosis analysis, Western blot analysis were performed. Animal subcutaneous tumorigenesis and immunohistochemistry. Results: both volenotta and oxaliplatin could inhibit the proliferation of HepG2 and BEL7402 cells. The combined index of these three cell lines is less than 1, and the decrement index is greater than 1, which indicates that both have synergistic effect. The combination of them can induce cell cycle arrest and apoptosis related to caspase pathway in G 2 / M phase. In vitro and in vivo, Oxaliplatin activates the expression of Notch signaling pathway, but volenoside inhibits the expression of Notch signaling pathway, thus increasing the chemosensitivity of oxaliplatin. Conclusion: in vitro and in vivo experiments have proved that volenotta and oxaliplatin co-inhibit cell proliferation and tumorigenesis in hepatocellular carcinoma by inducing cell cycle arrest and apoptosis and inhibiting the expression of] Notch pathway. Combination of these drugs may play a role in the treatment of liver cancer in the future.
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7

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本文編號：1642213