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胞質(zhì)M-CSF誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞侵襲和遷移

發(fā)布時(shí)間:2018-03-14 14:18

  本文選題:巨噬細(xì)胞集落刺激因子 切入點(diǎn):宮頸癌 出處:《生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展》2017年11期  論文類(lèi)型:期刊論文


【摘要】:為探討巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)對(duì)人宮頸癌細(xì)胞(He La細(xì)胞)侵襲和遷移的影響及機(jī)制,采用胞質(zhì)定位空載體p CMV/cyto/myc與重組載體p CMV/cyto/myc-M-CSF穩(wěn)定轉(zhuǎn)染He La細(xì)胞株,建立穩(wěn)定高表達(dá)胞質(zhì)M-CSF的細(xì)胞系(He La-M細(xì)胞).經(jīng)Transwell實(shí)驗(yàn)觀察胞質(zhì)M-CSF對(duì)He La細(xì)胞侵襲和遷移能力的影響,逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)及蛋白質(zhì)印跡檢測(cè)細(xì)胞Rho三磷酸鳥(niǎo)苷酶(Rho GTPases)及基質(zhì)金屬酶的表達(dá),明膠酶譜法檢測(cè)基質(zhì)金屬蛋白酶2的活性.結(jié)果顯示,與轉(zhuǎn)染空載體的He La細(xì)胞(He La-C細(xì)胞)和對(duì)照組He La細(xì)胞比較,胞質(zhì)M-CSF的高表達(dá)可明顯增強(qiáng)He La細(xì)胞在體外的侵襲和遷移能力,其機(jī)制與Rho GTPases的活化,以及MMP2表達(dá)上調(diào)及其活性增高密切相關(guān).
[Abstract]:In order to study the macrophage colony stimulating factor (M-CSF) on human cervical cancer cells (He La cells) and the effects of migration and invasion mechanism, the cytoplasmic localization of CMV/cyto/myc plasmid P and recombinant vector p CMV/cyto/myc-M-CSF stably transfected He cell line La, establish the stable expression of cytoplasmic M-CSF cells (He La-M cells). To observe the effect of cytoplasmic M-CSF on invasion and migration of He La cells by Transwell experiment, reverse transcription polymerase chain reaction and Western blotting detection of cell Rho three GMP enzyme (Rho GTPases) and the expression of matrix metal enzyme, gelatin zymography assay of matrix metalloproteinase 2 activity. The results showed that with the transfection the vector He La cells (He La-C cells) and the control group of He La cells, expression of cytoplasmic M-CSF can significantly increase the He of La cells in migration and invasion in vitro, the activation mechanism and Rho GTPases, and MMP2 The up-regulated expression and high activity of the expression are closely related.

【作者單位】: 湖南中醫(yī)藥大學(xué)組織胚胎學(xué)教研室;南華大學(xué)組織學(xué)與胚胎學(xué)教研室;南華大學(xué)藥物藥理研究所藥物蛋白質(zhì)組學(xué)湖南省高等學(xué)校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;湖南醫(yī)藥學(xué)院生物醫(yī)學(xué)研究中心;
【基金】:湖南省高校創(chuàng)新平臺(tái)開(kāi)放基金項(xiàng)目(09K072,12K120) 湖南省教育廳青年項(xiàng)目(11B110)資助~~
【分類(lèi)號(hào)】:R737.33

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本文編號(hào):1611579

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