本文關(guān)鍵詞： PC-5 furin PC-7 PKG-1 非小細(xì)胞肺癌 前體蛋白酶 cGMP PKG　出處：《華中科技大學(xué)》2015年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：第一部分前體蛋白酶與PKG-1在肺癌組織中的表達(dá)以及臨床意義研究 目的：探討PC家族蛋白和PKG-1蛋白在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)及其與臨床病理特征之間的關(guān)系。 方法：免疫組織化學(xué)法檢測178例非小細(xì)胞肺癌患者,腫瘤組織標(biāo)本以及癌旁組織標(biāo)本中PC家族蛋白以及PKG-1蛋白表達(dá)水平；醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,各因子表達(dá)水平與患者性別、年齡、病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等臨床參數(shù)的相互關(guān)系。 結(jié)果： 1. PC-5、furin、PC-7和PKG-1在非小細(xì)胞肺癌組織中及癌旁組織中的表達(dá)： PC-7、furin在非小細(xì)胞肺癌組織中陽性表達(dá)率分別為：44.4%以及51.7%,均顯著高于非小細(xì)胞肺癌癌旁組織(P0.05)；PC-5在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)(19.1%)低于癌旁組織(20.6%)(P0.05);PKG-1在非小細(xì)胞肺癌及癌旁組織中陽性表達(dá)率分別為6.2%和57.8%(P0.05)。 2. PC-5、furin、PC-7和PKG-1與非小細(xì)胞肺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系： PC-7、furin表達(dá)均與非小細(xì)胞肺癌分期、組織分化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移正相關(guān)(P0.05),與性別、年齡無關(guān)(P0.05)；PC-5在鱗癌表達(dá)率(22.2%)顯著低于腺癌表達(dá)率(75.6%)；與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期負(fù)相關(guān)(P0.05),與性別、年齡無關(guān)(P0.05)。PKG-1與各非小細(xì)胞肺癌臨床病理參數(shù)均無關(guān)(P0.05)。 結(jié)論：PC-7、furin可能在非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生與發(fā)展中起促進(jìn)作用,PKG-1與非小細(xì)胞肺癌的發(fā)展無關(guān)。 第二部分非小細(xì)胞肺癌前體蛋白酶對PKG-1蛋白剪切的研究 目的：通過前體蛋白酶的過表達(dá)以及抑制其活性,檢測cGMP依賴性蛋白激酶的剪切水平,探討cGMP依賴性蛋白激酶選擇性剪切的分子機(jī)制。 方法：構(gòu)建cGMP依賴性蛋白激酶表達(dá)質(zhì)粒pCDNA3-PKG-1,通過hexa-D-arginine、dec-RVKR-cmk以及al-PDX抑制前體蛋白酶活性；過表達(dá)前體蛋白酶表達(dá)的質(zhì)粒；免疫印跡法檢測在抑制以及過表達(dá)前體蛋白酶的條件下,cGMP依賴性蛋白激酶蛋白分子的剪切水平變化；構(gòu)建不同位點(diǎn),點(diǎn)突變的cGMP依賴性蛋白激酶分子異構(gòu)體,檢測前體蛋白酶對cGMP依賴性蛋白激酶剪切的蛋白靶點(diǎn)。通過免疫熒光法檢測抑制前體蛋白酶活性后,對cGMP依賴性蛋白激酶核轉(zhuǎn)位的抑制作用。 結(jié)果：Western-bloting顯示細(xì)胞內(nèi)過表達(dá)前體蛋白酶家族成員furin, PC7能夠促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)cGMP依賴性蛋白激酶蛋白分子剪切,而通過dec-RVKR-cmk以及al-PDX能夠抑制細(xì)胞內(nèi)cGMP依賴性蛋白激酶剪切；通過不同的PKG異構(gòu)體作用�？梢园l(fā)現(xiàn)前體蛋白酶對cGMP依賴性蛋白激酶的剪切位點(diǎn)在161位氨基酸處。抑制前體蛋白酶活性能夠抑制cGMP依賴性蛋白激酶從胞漿中轉(zhuǎn)位進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)。 結(jié)論：前體蛋白酶能夠剪切cGMP依賴性蛋白激酶分子,其剪切位點(diǎn)為161位氨基酸分子,前體蛋白酶對cGMP依賴性蛋白激酶分子的剪切作用是其進(jìn)行核轉(zhuǎn)位的必要過程。
[Abstract]:The expression and clinical significance of precursor protease and PKG-1 in lung cancer. Objective: to investigate the expression of PC family protein and PKG-1 protein in non-small cell lung cancer (NSCLC) and their relationship with clinicopathological features. Methods: immunohistochemical method was used to detect the expression of PC family protein and PKG-1 protein in 178 patients with non-small cell lung cancer (NSCLC). Age, pathological type, lymph node metastasis, clinical stage, distant metastasis and other clinical parameters. Results:. 1. The expression of PC-5 furinine PC-7 and PKG-1 in non-small cell lung cancer (NSCLC) and paracancerous tissues:. The positive expression rates of PC-7furin in non-small cell lung cancer (NSCLC) tissues were 44.4% and 51.7%, respectively, which were significantly higher than those in non-small cell lung cancer (NSCLC) tissues adjacent to NSCLC (P 0.05) and in NSCLC tissues (P < 19.1T).) the expression of PC-7furin in non-small cell lung cancer (NSCLC) tissues was significantly lower than that in NSCLC tissues (P0.05PKG-1) and in non-small cell lung cancer (NSCLC) and paracancerous tissues. The positive expression rates were 6.2% and 57.8% respectively. 2. The relationship between PC-5 furinine PC-7, PKG-1 and clinicopathological parameters of non-small cell lung cancer (NSCLC):. The expression of PC-7 furin was significantly lower than that of adenocarcinoma (P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05, P 0.05@@. There was no correlation between P0.05, PKG-1 and clinicopathological parameters of NSCLC. Conclusion the PKG-1 may play a promoting role in the development and development of non-small cell lung cancer (NSCLC), and there is no correlation between PKG-1 and the development of NSCLC. The second part of the study on the Shear of PKG-1 protein by the precursor Protease of Non-small Cell Lung Cancer. Aim: to detect the shear level of cGMP dependent protein kinase (cGMP) by overexpression and inhibition of its activity, and to explore the molecular mechanism of selective shearing of cGMP dependent protein kinase (cGMP). Methods: cGMP dependent protein kinase expression plasmid pCDNA3-PKG-1 was constructed to inhibit the activity of precursor protease by hexa-D-arginine dec-RVKR-cmk and al-PDX. Western blotting was used to detect the changes of shear level of cGMP dependent protein kinase molecules under the condition of inhibition and overexpression of proproteinases, and to construct the isoforms of cGMP dependent protein kinases at different sites. The protein targets of precursor protease on cGMP dependent protein kinase were detected, and the inhibitory effect of precursor protease on cGMP dependent protein kinase nuclear translocation was detected by immunofluorescence assay. Results the results showed that furin, a member of the protease family, was overexpressed in the cell. PC7 could promote the cleavage of cGMP dependent protein kinase protein, while dec-RVKR-cmk and al-PDX could inhibit the cGMP dependent protein kinase shearing. It was found that the shear site of precursor protease to cGMP-dependent protein kinase was at the amino acid at position 161 by different PKG isomers. Inhibition of precursor protease activity could inhibit the translocation of cGMP-dependent protein kinase from cytoplasm to nucleus. Conclusion: the precursor protease can shear cGMP dependent protein kinase molecule, and its shear site is 161 amino acid molecule. The shear effect of precursor protease on cGMP dependent protein kinase molecule is necessary for its nuclear translocation.
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R734.2

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 許運(yùn)龍,郭昭揚(yáng),張?jiān)婆d,許賢榮;血管內(nèi)皮生長因子在人非小細(xì)胞肺癌中表達(dá)的臨床研究[J];中華腫瘤雜志;2000年05期

2 王繼營,高珊,崔黎,黃麗春,宋立友;“雙異”聯(lián)合治療晚期非小細(xì)胞肺癌37例[J];中國肺癌雜志;2000年02期

3 田靜,李蓓蘭;老年晚期非小細(xì)胞肺癌的化療:一種新趨勢[J];中國肺癌雜志;2000年05期

4 張世雯,周清華;不同的分割方案與化療聯(lián)合治療非小細(xì)胞肺癌[J];中國肺癌雜志;2000年05期

5 胡發(fā)明,華波;血清白介素-10水平是晚期非小細(xì)胞肺癌病人的一項(xiàng)預(yù)后因素[J];國外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊);2000年11期

6 于亮,王梅,張燦灼;微血管在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及臨床意義[J];泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2000年04期

7 朱建英;預(yù)計(jì)2009年非小細(xì)胞肺癌藥物市場將達(dá)20億美元[J];國外醫(yī)藥(合成藥 生化藥 制劑分冊);2001年02期

8 張利偉,劉樹秋,陳海英,萬錦華;立體定向適形放療配合常規(guī)放療治療非小細(xì)胞肺癌近期療效分析[J];黑龍江醫(yī)藥科學(xué);2001年05期

9 王肇炎;晚期非小細(xì)胞肺癌的解救化療[J];腫瘤研究與臨床;2001年01期

10 朱堯武,楊宇飛;非小細(xì)胞肺癌的術(shù)后輔助治療[J];中國臨床醫(yī)生;2001年12期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 張新民;唐蜜;李代強(qiáng);;磷酸化酪氨酸蛋白在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其意義[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

2 胡旭東;楊國仁;霍宗偉;方永存;陳鳴陸;;~(99m)Tc-MIBI SPECT顯像觀察非小細(xì)胞肺癌多藥耐藥的研究[A];首屆全國腫瘤核醫(yī)學(xué)新技術(shù)研討會(huì)論文集[C];2007年

3 秦慶亮;熊海健;王愛;邊海蓉;盧振國;楊培英;朱斌耀;王蕓;;立體定向放射治療放療后復(fù)發(fā)非小細(xì)胞肺癌[A];2007第六屆全國放射腫瘤學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2007年

4 馮耘;萬歡英;高蓓莉;項(xiàng)軼;劉嘉琳;;血管緊張素轉(zhuǎn)換酶二在非小細(xì)胞肺癌腫瘤生長和血管生成中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第五屆全國胸部腫瘤及內(nèi)窺鏡學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

5 ;非小細(xì)胞肺癌術(shù)后輔助治療及一線治療[A];天津市抗癌協(xié)會(huì)肺癌專業(yè)委員會(huì)2011年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2011年

6 蔣峰;許林;史美祺;;1560例非小細(xì)胞肺癌患者多因素預(yù)后分析[A];第13屆全國肺癌學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2013年

7 張華;;術(shù)前中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞比值對非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后的影響[A];第13屆全國肺癌學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2013年

8 王子平;;老年晚期非小細(xì)胞肺癌治療思考[A];第三屆中國腫瘤內(nèi)科大會(huì)教育集暨論文集[C];2009年

9 張沂平;;非小細(xì)胞肺癌個(gè)體化化療[A];2009年浙江省腫瘤學(xué)術(shù)年會(huì)暨腫瘤診治新進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2009年

10 劉嘉湘;施志明;李和根;徐振曄;朱晏偉;趙麗紅;高虹;劉苓霜;朱惠蓉;張暉;;益肺抗瘤飲治療271例非小細(xì)胞肺癌臨床觀察[A];中醫(yī)藥優(yōu)秀論文選（下）[C];2009年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 李穎;特羅凱對中國非小細(xì)胞肺癌患者效果佳[N];科技日報(bào);2007年

2 曉白;非小細(xì)胞肺癌研究獲重大進(jìn)展[N];人民日報(bào);2008年

3 記者 張文天;非小細(xì)胞肺癌中醫(yī)藥綜合醫(yī)療方案研究進(jìn)展順利[N];科技日報(bào);2009年

4 辛勇　張先穩(wěn);早期非小細(xì)胞肺癌的治療進(jìn)展[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2004年

5 記者高新軍;專家提出 建非小細(xì)胞肺癌中醫(yī)臨床指南[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2009年

6 上海長海醫(yī)院呼吸科 夏陽 整理 邱志濤;非小細(xì)胞肺癌放虎歸山還是乘勝追擊[N];健康報(bào);2013年

7 記者 王丹;新研究揭示炎癥促非小細(xì)胞肺癌發(fā)生機(jī)制[N];健康報(bào);2014年

8 記者 李穎;凱美納成晚期非小細(xì)胞肺癌治療優(yōu)選方案[N];科技日報(bào);2014年

9 白京麗;非小細(xì)胞肺癌最佳治療方案[N];中國醫(yī)藥報(bào);2000年

10 ;表皮生長因子受體抑制劑在治療非小細(xì)胞肺癌中的作用[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 白艷（Bai Sally）;整合素αvβ5合并EGFR檢測用于非小細(xì)胞肺癌轉(zhuǎn)移及預(yù)后評估的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

2 王筱恬;PLZF和DACH1的異常表達(dá)影響非小細(xì)胞肺癌發(fā)生與發(fā)展的分子機(jī)制[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

3 洪專;木犀草素治療EGF受體繼發(fā)性突變的非小細(xì)胞肺癌的實(shí)驗(yàn)研究[D];南京大學(xué);2014年

4 張沛;ILT4在非小細(xì)胞肺癌中的作用及分子機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

5 王世坤;RBP2誘導(dǎo)非小細(xì)胞肺癌和食管鱗癌表皮間質(zhì)化[D];山東大學(xué);2015年

6 趙世俊;~(18)F-FDG PET/CT在非小細(xì)胞肺癌預(yù)后評估中的應(yīng)用研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

7 邱晨;影響非小細(xì)胞肺癌手術(shù)后遠(yuǎn)期生存的相關(guān)因素分析[D];山東大學(xué);2015年

8 姜遠(yuǎn)矚;術(shù)前血液學(xué)指標(biāo)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后關(guān)系的研究[D];山東大學(xué);2015年

9 朱良明;STAT3及其靶基因?qū)Ψ切〖?xì)胞肺癌生物學(xué)行為調(diào)控機(jī)制的初步實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2015年

10 周菊;HPV-16感染對非小細(xì)胞肺癌和A549細(xì)胞的影響及miRNAs表達(dá)改變的研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王勇;誘導(dǎo)型一氧化氮合酶在非小細(xì)胞肺癌中表達(dá)的臨床意義[D];中國醫(yī)科大學(xué);2006年

2 陳婷;非小細(xì)胞肺癌調(diào)強(qiáng)放射治療預(yù)后因素分析[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

3 王波;單向式全胸腔鏡下解剖性肺葉切除術(shù)治療早期非小細(xì)胞肺癌的學(xué)習(xí)曲線[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

4 施桂清;血管內(nèi)皮抑制素聯(lián)合放化療治療非小細(xì)胞肺癌的療效及安全性研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

5 王靜;Eg5、Ki-67在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及臨床意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 覃建穎;IL-21和Tc1細(xì)胞在非小細(xì)胞肺癌患者外周血及癌灶中的變化及相互作用[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2015年

7 張瑞;ⅢA-N2期非小細(xì)胞肺癌手術(shù)治療和放射治療的療效對比及相關(guān)預(yù)后因素的分析[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

8 石姣姣;基于多肽構(gòu)建抗腫瘤靶向藥物的應(yīng)用研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

9 胡世霖;非小細(xì)胞肺癌中醫(yī)辨證分型與Napsin A、TTF-1在肺癌組織中表達(dá)的相關(guān)性研究[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2015年

10 王婷婷;細(xì)胞因子活化殺傷細(xì)胞治療非小細(xì)胞肺癌臨床研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：1525698