血清CEA陰性結(jié)直腸癌患者蛋白組學(xué)比較研究
本文關(guān)鍵詞：廣州市2000～2002年惡性腫瘤的發(fā)病率與死亡率分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
《廣西醫(yī)科大學(xué)》 2011年
血清CEA陰性結(jié)直腸癌患者蛋白組學(xué)比較研究
廖存
【摘要】：背景:結(jié)直腸癌是一種世界性的常見惡性腫瘤,嚴(yán)重威脅著人們的身心健康。因此,加強(qiáng)結(jié)直腸癌的生物學(xué)特性研究,深入探討結(jié)直腸癌的發(fā)生機(jī)制,并尋求有效的早期診斷指標(biāo)和治療方法,對于提高結(jié)直腸癌的療效和預(yù)后具有重要意義。高通量的雙向電泳技術(shù)及質(zhì)譜技術(shù)已廣泛應(yīng)用于各種腫瘤研究領(lǐng)域,成為研究腫瘤靶標(biāo)的一種重要的手段。由于血清在臨床診斷中的具有重要作用,人血清蛋白組學(xué)越來越引起各學(xué)科領(lǐng)域的重視,血清中的蛋白濃度與它的生理功能密切相關(guān)。目前臨床應(yīng)用較多的結(jié)直腸癌相關(guān)性腫瘤標(biāo)志物有癌胚抗原(CEA)、CAl99和CA242等,但均存在存在敏感性與特異性不高的問題,其中CEA作為結(jié)直腸癌的標(biāo)志物應(yīng)用最廣泛,但其敏感性較低及特異度較低,約有1/3的腸癌病人CEA在正常范圍,因此,CEA并不是理想的篩查結(jié)直腸癌患者的腫瘤標(biāo)記物,尤其是CEA陰性的病人。因此,新的和有效的腫瘤標(biāo)志物的研究很有必要。 目的:本研究擬采用蛋白組學(xué)研究方法雙向電泳(2DE)和基質(zhì)輔助激光解吸離子化一串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF/TOF-MS)技術(shù)開展血清CEA陰性結(jié)直腸癌患者相關(guān)的血清蛋白質(zhì)組學(xué)研究,分析鑒定血清CEA陰性結(jié)直腸癌患者和血清CEA陽性結(jié)直腸癌患者血清以及正常人血清的差異表達(dá)蛋白,以期發(fā)現(xiàn)在血清CEA陰性結(jié)直腸癌發(fā)生過程中起重要作用的關(guān)鍵蛋白質(zhì)分子,有利于補(bǔ)充結(jié)直腸癌發(fā)生的分子機(jī)制,并可能發(fā)現(xiàn)一些新的相關(guān)的腫瘤標(biāo)志蛋白,為結(jié)直腸癌的發(fā)生提供新的診斷手段,除此之外,一些新發(fā)現(xiàn)的蛋白還可能成為新的潛在的治療靶點(diǎn)。 方法:血清CEA陰性結(jié)腸癌患者、血清CEA陽性結(jié)腸癌患者與正常人空腹血清標(biāo)本各11例分別等量混合成3組樣本,去除血清中的白蛋白和球蛋白后,利用雙向凝膠電泳(2-DE)分離血清總蛋白質(zhì)后,膠體考馬斯亮藍(lán)染色,經(jīng)圖像分析篩選差異表達(dá)的蛋白點(diǎn).應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS/MS)鑒定差異表達(dá)的蛋白點(diǎn),并對其部分蛋白進(jìn)行生物學(xué)分析。另選新的各組各32例血清標(biāo)本,用Western blot方法對其中某些差異蛋白進(jìn)行表達(dá)驗(yàn)證。 結(jié)果:經(jīng)高豐度蛋白的去除,2DE圖像的優(yōu)化,獲得了重復(fù)性較好的雙向凝膠電泳圖譜,各膠上的蛋白質(zhì)點(diǎn)同時(shí)與參考膠相匹配,對照分析發(fā)現(xiàn)篩選出差異≥2倍以上差異蛋白點(diǎn)共13個(gè),進(jìn)行MALDI-TOF-MS分析:鑒定出1)血清CEA陰性結(jié)腸癌患者與正常人血清比較,表達(dá)下調(diào)的蛋白有纖維膠凝蛋白2前體,纖維膠凝蛋白3,載脂蛋白L1,間a胰蛋白酶抑制劑輕鏈H4,轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白,表達(dá)上調(diào)的蛋白為免疫球蛋白lambda輕鏈,2)血清CEA陽性結(jié)腸癌患者與正常人血清比較,表達(dá)下調(diào)的蛋白有纖維膠凝蛋白2前體,纖維膠凝蛋白3,載脂蛋白L1,間a胰蛋白酶抑制劑輕鏈H4,轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白,表達(dá)上調(diào)的蛋白為:載脂蛋白E,結(jié)合珠蛋白。3)血清CEA陰性結(jié)腸癌患者與血清CEA陽性結(jié)腸癌患者的1個(gè)差異點(diǎn),經(jīng)鑒定為免疫球蛋白lambda輕鏈,并且討論和推測了這些蛋白的功能和抑制腫瘤增殖的機(jī)制。4)經(jīng)Western blot驗(yàn)證顯示:與正常人相比:載脂蛋白L1在血清CEA陰性及陽性的結(jié)腸癌患者中均低表達(dá),結(jié)合珠蛋白在在血清CEA陰性及陽性的結(jié)腸癌患者中均較正常人高表達(dá)。 結(jié)論:利用血清蛋白質(zhì)組學(xué)方法,建立分辨率高和重復(fù)性好的結(jié)直腸癌血清蛋白質(zhì)的雙向凝膠電泳圖譜,從而在血清CEA陰性腸癌患者、血清CEA陽性腸癌患者及正常人血清中尋找了一些差異蛋白,探討其生物功能,找到的一些差異蛋白,載脂蛋白L1及結(jié)合珠蛋白可能作為結(jié)直腸癌的一個(gè)潛在腫瘤標(biāo)志物。
【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R735.3
【目錄】：
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5 記者 馬艷紅;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2010年
6 記者 田雅婷;[N];光明日報(bào);2010年
7 姜瀾;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2011年
8 記者 白毅;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2010年
9 張旭;[N];中國醫(yī)藥報(bào);2011年
10 記者 胡德榮;[N];健康報(bào);2011年
中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 韓黔峰;sFRP4、β-catenin、Cox-2、ER-β、pS2、Keratin 19蛋白和MSI基因在結(jié)直腸癌細(xì)胞中的表達(dá)[D];四川大學(xué);2005年
2 楊桓;主要乙醇代謝酶編碼基因及JWA基因單核苷酸多態(tài)性與結(jié)直腸癌遺傳易感性的關(guān)聯(lián)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2009年
3 李天煜;結(jié)直腸癌細(xì)胞系中表觀遺傳修飾與p33ING1b基因轉(zhuǎn)錄抑制的關(guān)系[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2010年
4 張繼紅;Ang/Tie-2在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及其分子機(jī)制的研究[D];吉林大學(xué);2011年
5 劉麗;TGFβ信號網(wǎng)絡(luò)基因遺傳變異與結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展風(fēng)險(xiǎn)的分子流行病學(xué)研究[D];華中科技大學(xué);2011年
6 陳坤;結(jié)直腸癌環(huán)境與宿主因素的流行病學(xué)研究[D];浙江大學(xué);2003年
7 孔斌;水通道蛋白-1（AQP-1）在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及其與腫瘤微血管形成的關(guān)系研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2010年
8 解方為;異常甲基化調(diào)控結(jié)直腸癌細(xì)胞Irinotecan代謝酶相關(guān)基因的表達(dá)及其意義[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2009年
9 劉冰;環(huán)境因素、Caspase凋亡通路相關(guān)基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)研究[D];浙江大學(xué);2010年
10 馬震;糞便標(biāo)本基因標(biāo)記物mRNA表達(dá)檢測及其對結(jié)直腸癌診斷的研究[D];吉林大學(xué);2011年
中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 王洪敏;結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的臨床因素分析[D];吉林大學(xué);2010年
2 郭曉亮;REIC/Dkk-3基因在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及其意義[D];中國醫(yī)科大學(xué);2010年
3 江偉;FOLFIRI方案治療老年結(jié)直腸癌安全性臨床觀察[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2010年
4 陳尚忠;SOX2在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及意義的初步研究[D];中南大學(xué);2010年
5 石曦雯;核基質(zhì)結(jié)合因子SAFB在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其分子機(jī)制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2010年
6 龍結(jié)根;Testin基因在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及臨床意義[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年
7 廖存;血清CEA陰性結(jié)直腸癌患者蛋白組學(xué)比較研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年
8 劉金星;MMP-9基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌相關(guān)性研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2011年
9 張麗莉;hMLH1-93G/A基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌的相關(guān)性研究[D];南京大學(xué);2011年
10 孟令振;細(xì)絲蛋白A在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及其與MMP-9的關(guān)聯(lián)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2011年
本文關(guān)鍵詞：廣州市2000～2002年惡性腫瘤的發(fā)病率與死亡率分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
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