IR-780聯(lián)合阿霉素對肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞的殺傷效應(yīng)研究
本文關(guān)鍵詞: IR- 阿霉素 肝腫瘤 腫瘤干細(xì)胞 細(xì)胞毒性 出處:《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年12期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的探討七甲川花菁類熒光小分子IR-780聯(lián)合阿霉素對肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞的殺傷作用。方法利用CCK-8試劑盒檢測不同濃度IR-780(0、1.250、2.500、5.000、10.000、20.000μmol/L)及IR-780聯(lián)合阿霉素(0、0.025、0.050、0.100、0.200、0.400μmol/L)對4種不同肝癌細(xì)胞(QGY-7703、SMMC-7721、Huh-7和Hep G2)的殺傷效應(yīng),并確定后續(xù)實(shí)驗(yàn)IR-780和阿霉素的濃度,采用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測IR-780聯(lián)合阿霉素對肝癌細(xì)胞遷移能力的影響;采用無血清懸浮培養(yǎng)的方法從Huh-7細(xì)胞株中分離并鑒定出具有干細(xì)胞特性的腫瘤細(xì)胞,檢測IR-780聯(lián)合阿霉素對肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞的殺傷作用及遷移能力的影響;在裸鼠皮下荷瘤模型中觀察IR-780聯(lián)合阿霉素對肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞生長的抑制作用。結(jié)果低濃度的IR-780對肝癌細(xì)胞無明顯殺傷作用;采用1.250μmol/L的IR-780聯(lián)合阿霉素可對多種肝癌細(xì)胞產(chǎn)生較強(qiáng)的殺傷作用,其中半數(shù)致死濃度LC50較單藥阿霉素降低25%;采用無血清懸浮培養(yǎng)的方法培養(yǎng)出Huh-7細(xì)胞腫瘤球,比較其與貼壁細(xì)胞的克隆形成能力、致瘤能力和細(xì)胞周期分布,證明懸浮培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞具有腫瘤干細(xì)胞特性;IR-780聯(lián)合阿霉素對肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞具有較強(qiáng)的殺傷作用,單用阿霉素和IR-780聯(lián)合阿霉素對肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞的LC50差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(0.30±0.02)vs(0.22±0.04)μmol/L,P0.05];IR-780聯(lián)合阿霉素可明顯抑制肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞的遷移能力和裸鼠皮下腫瘤的生長。結(jié)論 IR-780可增強(qiáng)阿霉素的抗腫瘤作用,提高對肝癌干細(xì)胞樣細(xì)胞的殺傷效應(yīng)。
[Abstract]:Objective to investigate the cytotoxicity of heptachuan cyanine fluorescent small molecule IR-780 combined with adriamycin on hepatocellular carcinoma stem cell like cells. Methods CCK-8 kit was used to detect the cytotoxicity of different concentrations of IR-7800.2502.5002.5000.0000.0000.000 渭 mol / L) and IR-780 combined with doxorubicin 0.0500.1000.2000.400 渭 mol / L to four different kinds of hepatoma cell line QGY-7703SMMC-7721h- Huh-7. The killing effect of Hep G2, The concentrations of IR-780 and adriamycin were determined and the effect of IR-780 combined with doxorubicin on the migration of hepatoma cells was detected by cell scratch assay. Tumor cells with stem cell characteristics were isolated and identified from Huh-7 cell lines by serum-free suspension culture. The effects of IR-780 combined with adriamycin on the cytotoxicity and migration of hepatoma stem cell-like cells were detected. The inhibitory effects of IR-780 combined with adriamycin on the growth of hepatoma stem cell-like cells were observed in nude mice. Results low concentration of IR-780 had no significant killing effect on hepatoma cells. 1.250 渭 mol/L of IR-780 combined with adriamycin could produce strong killing effect on many kinds of hepatoma cells, in which the LD50 of LC50 was 25% lower than that of single drug adriamycin, and the tumor spheres of Huh-7 cells were cultured by serum-free suspension culture. Compared with the adherent cells, the tumor cells had the characteristics of tumor stem cells. IR-780 combined with adriamycin had a strong killing effect on hepatoma stem cell-like cells. The difference of LC50 between adriamycin and IR-780 combined with adriamycin on hepatoma stem cell like cells was significant [0.30 鹵0.02 IR-780 0.22 鹵0.04 渭 mol / L P 0.05] IR-780 combined with doxorubicin could significantly inhibit the migration of hepatoma stem cell-like cells and the growth of subcutaneous tumor in nude mice. Can enhance the antitumor effect of adriamycin, To increase the killing effect on hepatoma stem cell like cells.
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)軍事預(yù)防醫(yī)學(xué)院全軍復(fù)合傷研究所 創(chuàng)傷、燒傷與復(fù)合傷國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院全軍腫瘤研究所;
【基金】:國家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(81130026) 重慶市研究生創(chuàng)新課題(2014年)~~
【分類號】:R735.7
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,本文編號:1495641
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