本文關(guān)鍵詞：IL-6通過(guò)AKT信號(hào)通路促進(jìn)胃癌細(xì)胞的侵襲和增殖　出處：《蘭州大學(xué)》2016年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的:全世界范圍,多發(fā)惡性腫瘤中胃癌的發(fā)病率排第六,死亡率卻排第四。盡管近年來(lái)胃癌的發(fā)病率在一些地區(qū)有所下降,但由于大多數(shù)胃癌患者一經(jīng)診斷就處于進(jìn)展期,預(yù)后差,使我們面臨著巨大的挑戰(zhàn)。作為細(xì)胞因子家族里重要成員,白介素-6(Interleukin-6,IL-6)已經(jīng)被證明在腫瘤進(jìn)展過(guò)程里扮演著重要角色。有報(bào)道顯示,在胃癌患者中,血清IL-6水平的升高與腫瘤的分期及不良預(yù)后顯著相關(guān)。但是,人們對(duì)IL-6影響胃癌細(xì)胞具體機(jī)制的了解仍不夠確切。在這里,我們?cè)噲D研究IL-6對(duì)胃癌細(xì)胞侵襲及增殖的影響,進(jìn)而深入探索它潛在分子學(xué)機(jī)制。方法:使用不同濃度的IL-6(0、20、50和100 ng/mL)處理胃癌MKN-45細(xì)胞,將IL-6濃度為0 ng/mL作為對(duì)照組。分別使用CCK-8實(shí)驗(yàn)及Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)IL-6對(duì)MKN-45細(xì)胞增殖及侵襲的影響;使用Western blot方法檢測(cè)不同濃度IL-6對(duì)胃癌MKN-45細(xì)胞蘇氨酸/絲氨酸蛋白激酶(Serine/threonine Kinase,Akt),磷酸化Akt(p-Akt),金屬基質(zhì)蛋白酶-9(Matrix metalloproteinases,MMP-9)及c-Myc表達(dá)水平的影響。使用Akt信號(hào)通路抑制劑(SH-5)使Akt信號(hào)通路阻斷,進(jìn)一步明確IL-6促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖及侵襲的過(guò)程中是否有Akt信號(hào)通路參與,同時(shí)確定MMP-9及c-Myc是否為Akt信號(hào)通路的下游蛋白。結(jié)果:CCK-8增值實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明相比于空白對(duì)照組,各實(shí)驗(yàn)組結(jié)果提示胃癌MKN-45細(xì)胞增殖和侵襲能力顯著增加,且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Western blot顯示IL-6上調(diào)了p-Akt、MMP-9及c-Myc在胃癌MKN-45細(xì)胞中的蛋白表達(dá)水平。此外,Akt信號(hào)通路特異性抑制劑(SH-5)明顯抑制了由IL-6誘導(dǎo)的胃癌MKN-45細(xì)胞的侵襲和增殖,同時(shí)MMP-9及c-Myc在胃癌細(xì)胞中的蛋白表達(dá)水平下降,這些結(jié)果表明IL-6影響胃癌細(xì)胞侵襲及增殖過(guò)程里有Akt信號(hào)通路的參與。結(jié)論:IL-6可能經(jīng)由Akt信號(hào)通路增加MMP-9和(或)c-Myc在胃癌細(xì)胞內(nèi)的蛋白表達(dá)量,從而促進(jìn)胃癌細(xì)胞的侵襲和增殖。
[Abstract]:Objective: worldwide, the incidence of gastric cancer in multiple malignant tumors ranked 6th, but the mortality rate was 4th. Although the incidence of gastric cancer has decreased in some areas in recent years. However, the majority of gastric cancer patients are in advanced stage once diagnosed, and the prognosis is poor, which makes us face a great challenge. As an important member of cytokine family. Interleukin-6 (IL-6) has been shown to play an important role in tumor progression. It has been reported in patients with gastric cancer. The elevation of serum IL-6 level is significantly correlated with tumor staging and poor prognosis. However, the specific mechanism of IL-6 affecting gastric cancer cells is still not well understood. We try to study the effect of IL-6 on the invasion and proliferation of gastric cancer cells and explore its potential molecular mechanism. Gastric cancer MKN-45 cells were treated with 50 and 100 ng / mL. The effects of IL-6 on the proliferation and invasion of MKN-45 cells were detected by CCK-8 assay and Transwell assay, respectively, when the concentration of IL-6 was 0 ng/mL as control group. Detection of threonine / serine protein kinase (THR) in gastric cancer MKN-45 cells with different concentrations of IL-6 by Western blot. Serine/threonine Kinase. Aktn, phosphorylated Aktnab-Aktnchus, metalloproteinase-9 matrix metalloproteinases. The effect of MMP-9) and c-Myc expression. Akt signaling pathway was blocked by Akt signal pathway inhibitor (SH-5). To further determine whether IL-6 promotes the proliferation and invasion of gastric cancer cells in the process of Akt signal pathway involved. At the same time, it was determined whether MMP-9 and c-Myc were downstream proteins of Akt signaling pathway. Results compared with the blank control group, MMP-9 and c-Myc were found to be the downstream proteins in the Akt signaling pathway. The results of each experimental group indicated that the proliferation and invasion of gastric cancer MKN-45 cells were significantly increased. The results showed that IL-6 upregulated p-Akt by P0.05. Western blot. Protein expression of MMP-9 and c-Myc in MKN-45 cells of gastric cancer. SH-5, a specific inhibitor of Akt signaling pathway, significantly inhibited the invasion and proliferation of gastric cancer MKN-45 cells induced by IL-6. At the same time, the expression of MMP-9 and c-Myc in gastric cancer cells decreased. These results suggest that IL-6 affects the invasion and proliferation of gastric cancer cells with the involvement of Akt signaling pathway. Expression of c-Myc protein in gastric cancer cells. Thus promoting the invasion and proliferation of gastric cancer cells.
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R735.2

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