本文關(guān)鍵詞：伊馬替尼治療中miRNA及其靶基因在慢�；颊咧械谋磉_(dá)分析　出處：《第四軍醫(yī)大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 慢性粒細(xì)胞白血病 miR-21 PTEN PDCD4 伊馬替尼 耐藥 敏感

【摘要】：慢性粒細(xì)胞白血病(CML),簡稱慢粒,是一種惡性克隆增殖性造血系統(tǒng)疾病,起源于骨髓多能造血干細(xì)胞。95%的慢�；颊咴谶z傳學(xué)上具有Ph染色體,是9號(hào)染色體上的ABL基因與22號(hào)染色體上的BCR基因相互融合,最后形成bcr-abl融合基因,其編碼的P210融合蛋白參與形成了慢粒特征性的分子生物學(xué)標(biāo)志。因?yàn)镻210蛋白具有失調(diào)的酪氨酸激酶活性,故bcr-abl融合基因可以導(dǎo)致白血病的發(fā)生。最后造成造血細(xì)胞出現(xiàn)過度增殖,對(duì)骨髓基質(zhì)的粘附性較前下降和凋亡喪失等生物學(xué)特性的改變。BCR-ABL融合蛋白同時(shí)能激活多條與細(xì)胞增殖有關(guān)的信號(hào)通路,能改變DNA損傷修復(fù)途徑,最后引起致命性的血液系統(tǒng)腫瘤。因此,目前慢粒的各種治療方法都是圍繞著bcr-abl基因和其編碼的融合蛋白。CML治療的顯著性進(jìn)展為酪氨酸激酶抑制劑伊馬替尼的臨床應(yīng)用,在慢性期患者中療效顯著,在加速期和急變期的患者中同樣能夠明顯延長患者的生存時(shí)間,是目前治療慢性粒細(xì)胞白血病的主要藥物之一,美國國家癌癥綜合網(wǎng)絡(luò)(NCCN)首推伊馬替尼作為治療慢粒的藥物。從2000年開始我國在臨床上應(yīng)用伊馬替尼進(jìn)行治療CML,最近幾年的臨床觀察結(jié)果顯示,常規(guī)劑量伊馬替尼(300~400 mg/d)對(duì)大部分慢性期Ph+CML患者可以取得滿意的療效。然而隨著伊馬替尼的臨床應(yīng)用,逐漸出現(xiàn)了耐藥現(xiàn)象,且在慢性粒細(xì)胞白血病加速期(AP)或急變期(Bc)的患者中更為多見。近幾年來關(guān)于伊馬替尼耐藥機(jī)制的研究很多,但普遍認(rèn)為導(dǎo)致伊馬替尼耐藥的機(jī)制主要有:bcr-abl基因突變和擴(kuò)增,繼發(fā)其他核型改變,如del(7q)、de1(20q)、tri8、mono7等�，F(xiàn)多項(xiàng)研究表明micro RNA(mi RNA)可以作為腫瘤抑制基因和(或)癌基因,mi RNA的異常表達(dá)通過促進(jìn)癌細(xì)胞克隆的自我更新而引發(fā)一系列的耐藥。miRNA是一類非編碼的微小RNA分子,它的生成主要經(jīng)歷了原始轉(zhuǎn)錄本、前體和成熟體,最終的成熟體為19到24個(gè)堿基(nt)大小,能夠通過與靶m RNA3’非編碼區(qū)(UTR)特異性結(jié)合,在翻譯和轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控靶基因的表達(dá),與生物細(xì)胞的發(fā)展、分化、凋亡和增殖關(guān)系密切。所以本課題旨在利用Real-time quantitative PCR(RT-PCR)技術(shù)從細(xì)胞水平檢測慢粒慢性期與病情進(jìn)展的患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中mi RNA分子的表達(dá)有無差異,具體篩選的mi RNA分子分別為micro RNA-21(mi R-21)、mi R-10a、mi R-31、mi R-34a、mi R-155,如果表達(dá)確有明顯差異,我們進(jìn)一步觀察上述mi RNA及其靶基因在CML敏感組與耐藥組患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中的表達(dá)差異情況。為慢粒耐藥患者提供新的治療靶點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)一目的:探討慢性期和進(jìn)展期慢�；颊適i RNA的表達(dá)水平方法:收集CML慢性期患者和病情進(jìn)展患者的骨髓標(biāo)本共35例。制備骨髓單個(gè)核細(xì)胞并抽提總RNA,利用紫外分光光度儀檢測RNA提取液的濃度和純度,最后利用RT-PCR技術(shù)檢測mi R-21、mi R-10a、mi R-31、mi R-34a、mi R-155在慢性期和進(jìn)展期慢�；颊咧械南鄬�(duì)表達(dá)水平。結(jié)果:CML患者服用伊馬替尼后進(jìn)展組的骨髓單個(gè)核細(xì)胞中mi R-21的表達(dá)明顯高于慢性期組,mi R-10a、mi R-31、mi R-34a、mi R-155在兩組患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中的表達(dá)水平并無顯著差異,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:mi R-21的高表達(dá)可能與慢性粒細(xì)胞白血病患者服用伊馬替尼期間出現(xiàn)病情進(jìn)展有關(guān)。實(shí)驗(yàn)二目的:探討伊馬替尼治療敏感組和耐藥組患者mi R-21的表達(dá)水平方法:收集伊馬替尼治療敏感和耐藥的慢粒患者骨髓標(biāo)本共37例。制備骨髓單個(gè)核細(xì)胞并抽提總RNA,利用紫外分光光度儀檢測RNA提取液的濃度和純度,最后利用RT-PCR技術(shù)檢測mi R-21在敏感組和耐藥組患者中的相對(duì)表達(dá)水平。結(jié)果:CML耐藥組患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中mi R-21的表達(dá)明顯高于敏感組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0001)。結(jié)論:mi R-21可能與CML患者口服伊馬替尼后出現(xiàn)耐藥存在密切關(guān)系。實(shí)驗(yàn)三目的:探討mi R-21的靶基因在伊馬替尼治療敏感組和耐藥組患者中的表達(dá)水平。方法:收集伊馬替尼治療敏感和耐藥的慢粒患者骨髓標(biāo)本共37例。制備骨髓單個(gè)核細(xì)胞并抽提總RNA,利用紫外分光光度儀檢測RNA提取液的濃度和純度,制備c DNA,最后利用RT-PCR技術(shù)檢測PDCD4、PTEN在敏感組和耐藥組患者中的相對(duì)表達(dá)水平。結(jié)果:CML耐藥組患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中PDCD4相對(duì)表達(dá)水平顯著低于敏感組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0002)。耐藥組的骨髓單個(gè)核細(xì)胞中PTEN相對(duì)表達(dá)水平顯著低于敏感組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0001)。結(jié)論:CML患者伊馬替尼治療期間出現(xiàn)耐藥可能與mi R-21通過調(diào)控靶基因PDCD4、PTEN存在密切關(guān)系。
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R733.72

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Lindsey E.Becker Buscaglia;;Apoptosis and the target genes of microRNA-21[J];癌癥;2011年06期

，

本文編號(hào)：1327038