本文關(guān)鍵詞：FAM172A在甲狀腺乳頭狀癌發(fā)病中的作用初步研究　出處：《蘇州大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：第一部分FAM172A在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)目的研究FAM172A在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)。方法1)運(yùn)用免疫組化方法觀察FAM172A在甲狀腺腺瘤旁正常組織、甲狀腺腺瘤及甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)情況。2)運(yùn)用Western blot在蛋白水平觀察FAM172A在甲狀腺腺瘤旁正常組織,甲狀腺腺瘤及甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)情況。結(jié)果免疫組化及Western blot技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)FAM172A在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)明顯高于正常甲狀腺和甲狀腺腺瘤組織,而且FAM172A在同一患者的甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)也明顯高于其癌旁組織。結(jié)論FAM172A在甲狀腺乳頭狀癌組織中高表達(dá)。第二部分FAM172A通過(guò)p38 MAPK信號(hào)通路促進(jìn)甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞增殖目的研究新蛋白FAMl72A對(duì)人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞IHH-4增殖的影響及其機(jī)制。方法1)以前期研究工作中所構(gòu)建的PDC315-FAMl72A質(zhì)粒用脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染IHH-4細(xì)胞,同時(shí)用PDC315質(zhì)粒作為對(duì)照轉(zhuǎn)染IHH-4細(xì)胞。2)用MTT法和細(xì)胞生長(zhǎng)曲線法觀察過(guò)表達(dá)FAMl72A基因?qū)HH-4細(xì)胞增殖的影響。3)應(yīng)用Western blot技術(shù)對(duì)幾個(gè)較常見的參與細(xì)胞增殖的通路包括PI3K、AMPK、p38MAPK信號(hào)通路進(jìn)行篩選,對(duì)篩選出的信號(hào)通路進(jìn)一步驗(yàn)證研究。結(jié)果1)與轉(zhuǎn)染PDC315質(zhì)粒的IHH-4細(xì)胞相比,MTT法顯示PDC315-FAMl72A質(zhì)粒轉(zhuǎn)染使細(xì)胞增殖增加約18%(24小時(shí))。細(xì)胞生長(zhǎng)曲線法顯示PDC315-FAM172A轉(zhuǎn)染組(24、48、72、96小時(shí))較對(duì)照組細(xì)胞生長(zhǎng)速度更快。2)過(guò)表達(dá)FAM172A可以激活I(lǐng)HH-4細(xì)胞內(nèi)p38 MAPK信號(hào)通路。3)FAM172A激活p38 MAPK信號(hào)通路可被p38 MAPK抑制劑SB202190阻斷,同時(shí)FAM172A對(duì)IHH-4細(xì)胞的增殖作用也可被SB202190明顯抑制。結(jié)論1)FAMl72A蛋白促進(jìn)IHH-4細(xì)胞增殖,提示FAMl72A蛋白的生理功能之一是參與細(xì)胞生長(zhǎng)的調(diào)控。2)FAM172A蛋白可能通過(guò)激活p38 MAPK信號(hào)通路參與甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞增殖調(diào)控。第三部分FAM172A對(duì)甲狀腺乳頭狀癌裸鼠成瘤的影響目的1)建立具有攝锝功能甲狀腺乳頭狀癌皮下移植瘤裸鼠模型,為研究甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)病機(jī)制提供工具。2)初步研究FAM172A對(duì)甲狀腺乳頭狀癌裸鼠成瘤的影響。方法1)取人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞系IHH-4,以1×107細(xì)胞數(shù)制成200ul細(xì)胞懸液接種于9只裸鼠(5周齡雌性裸鼠,品系BALB/c-nu/nu)皮下,觀察成瘤時(shí)間。并用PET-CT觀察腫瘤大小及形態(tài),用放射性核素發(fā)射式計(jì)算機(jī)斷層(emission computed tomography,ECT)觀察移植瘤的攝锝功能。2)PDC315、PDC315-FAMl72A質(zhì)粒轉(zhuǎn)染IHH-4細(xì)胞后,接種于6只裸鼠皮下,成瘤后觀察腫瘤的大小、重量及生長(zhǎng)方式。ECT觀察裸鼠移植瘤大小及攝锝功能,Western blot法研究FAM172A在腫瘤中的表達(dá)情況。結(jié)果1)裸鼠皮下成瘤率為100.0%(9/9),細(xì)胞接種后1周裸鼠皮下可以形成肉眼可見的腫瘤,4周時(shí)PET-CT觀察腫瘤大小,ECT顯示腹腔注射放射性99m锝后15分鐘移植瘤可以顯像。2)與對(duì)照組相比,過(guò)表達(dá)FAM172A的IHH-4細(xì)胞注射后的裸鼠成瘤更大、更重,而且腫瘤呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng),同時(shí)裸鼠本身的體重也明顯減輕。結(jié)論1)應(yīng)用人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞系IHH-4成功建立甲狀腺乳頭狀癌皮下移植瘤裸鼠模型,移植瘤具有良好的攝锝功能,為甲狀腺乳頭狀癌發(fā)病機(jī)制的研究提供了良好的動(dòng)物模型。2)FAM172A可促進(jìn)裸鼠腫瘤浸潤(rùn)性生長(zhǎng),動(dòng)物水平進(jìn)一步提示FAM172A參與甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)病過(guò)程。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R736.1

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 錢碧云;何敏;陳可欣;高明;;天津城市居民甲狀腺乳頭狀癌發(fā)病率和構(gòu)成比的長(zhǎng)期時(shí)間趨勢(shì)分析[J];中國(guó)實(shí)用外科雜志;2011年05期

2 張仁雯;康艷芳;喬雍;郝曉花;常路絲;李紅敏;任慧;張曉靜;孟雪;李興旺;魏紅山;;FAM172A及其異構(gòu)體重組蛋白對(duì)體外培養(yǎng)肝細(xì)胞增殖的影響[J];中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志(電子版);2013年03期

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本文編號(hào)：1315713