發(fā)布時(shí)間：2017-12-20 22:23

  本文關(guān)鍵詞：脂肪因子網(wǎng)膜素-1與結(jié)直腸癌發(fā)病的相關(guān)性研究　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：第一部分 結(jié)直腸癌患者與血漿網(wǎng)膜素-1水平變化的相關(guān)因素分析目的:探討血漿脂肪因子網(wǎng)膜素-1(Omentin-1)水平和結(jié)直腸癌(CRC)的相關(guān)關(guān)系。方法:選取經(jīng)術(shù)后病理檢查明確診斷為CRC患者42例(腫瘤組)和接受纖維結(jié)腸鏡檢查為正常的健康志愿者42例(對照組),兩組間年齡、性別均匹配。采用ELISA法測定腫瘤組以及對照組結(jié)腸鏡檢查前空腹血漿omentin-1水平,應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件,組間比較采用t檢驗(yàn)。應(yīng)用Pearson相關(guān)分析以及多元線性回歸分析方法,分析血漿Omentin-1與其他變量之間的相關(guān)關(guān)系。檢驗(yàn)水準(zhǔn)p=0.05。結(jié)果:兩組間年齡、性別構(gòu)成、腰臀比(WHR)、體重指數(shù)(BMI)、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、甘油三酯(TG)、HDL-C(高密度脂蛋白),空腹血糖(FBG)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與對照組相比,腫瘤組LDL-C(低密度脂蛋白,0.94±0.43 vs 0.61±0.33,P0.05)、FINS(空腹胰島素,9.44±6.11 vs 7.03±3.49 m U/L,p0.05)、HOMA-IR(胰島素抵抗指數(shù),0.94±0.43 vs0.61±0.33,P0.05).、Omentin-1(71.54±31.80 vs 31.22±19.87 ng/m L,P0.001)明顯增高,TC(總膽固醇,3.27±1.14 vs4.83±1.08 mmol/L)則明顯降低(P0.05)。Pearson相關(guān)分析顯示,血漿Omentin-1與高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)呈正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)r=0.57,P0.01),與血清甘油三酯(TG)、空腹胰島素(FINS)、腰臀比(WHR)、穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)均呈負(fù)相關(guān)(相關(guān)系數(shù)r分別為-0.668、-0.493、-0.395、-0.371,P0.05~0.01)。多元逐步線性回歸分析顯示,TG、HDL-C、WHR為CRC患者血漿omentin-1的影響因素。結(jié)論:Omentin-1可能與CRC發(fā)生有關(guān)。第二部分網(wǎng)膜素-1對人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞生物學(xué)行為影響的研究目的觀察在高糖環(huán)境下不同濃度的網(wǎng)膜素-1(Omentin-1)對人結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480增殖和凋亡的影響;探討AKt(絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶)信號通路在Omentin-1抑制結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡過程中的作用。方法將不同濃度(0μg/m L、1μg/m L、5μg/m L)的Omentin-1加入葡萄糖含量為4.5 g/L的高糖培養(yǎng)基(DEME培養(yǎng)基)中培養(yǎng)的結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480 24h、48h,分為高糖不加Omentin-1組(網(wǎng)膜素0組)、高糖+1μg/m L Omentin-1組(網(wǎng)膜素1組)、高糖+5μg/m L Omentin-1組(網(wǎng)膜素2組),同時(shí)應(yīng)用葡萄糖含量為1.0 g/L的低糖培養(yǎng)基(DEME培養(yǎng)基)培養(yǎng)SW480細(xì)胞作為對照組(NC組)。應(yīng)用MTT法以觀察細(xì)胞的增殖活性;劃痕實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞的遷移;平板克隆形成檢測細(xì)胞的克隆形成能力;在每組中加入4μg/m L DDP(順鉑),應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞凋亡率;應(yīng)用Western blot檢測細(xì)胞內(nèi)Akt及磷酸化p-Akt蛋白表達(dá)情況。結(jié)果(1)在MTT實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)用Omentin-1干預(yù)SW480細(xì)胞24 h后,網(wǎng)膜素2組細(xì)胞吸光度值(OD值)較網(wǎng)膜素0組、網(wǎng)膜素1組均顯著增高(P0.05);干預(yù)48 h后,網(wǎng)膜素1組、網(wǎng)膜素2組OD值均較網(wǎng)膜素0組顯著增高(P0.05),且網(wǎng)膜素2組較網(wǎng)膜素1組OD值顯著增高(P0.05)。(2)在劃痕實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)組與對照組相比,Omentin-1干預(yù)后24 h的細(xì)胞遷移速率隨著濃度的增加而增快,促進(jìn)了劃痕的愈合;網(wǎng)膜素干預(yù)后48 h時(shí)后尤為明顯。(3)在平板克隆實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)組與對照組相比,隨著Omentin-1濃度的增大,克隆形成數(shù)目及大小隨之增加。(4)在細(xì)胞凋亡檢測中,應(yīng)用不同濃度的Omentin-1與DDP共同干預(yù)SW480細(xì)胞12 h后,網(wǎng)膜素2組細(xì)胞凋亡率顯著低于網(wǎng)膜素0組、網(wǎng)膜素1組(P0.05)。(5)Western-blot結(jié)果顯示:與網(wǎng)膜素0組比較,網(wǎng)膜素1組、網(wǎng)膜素2組p-Akt蛋白表達(dá)均顯著增高(P0.05);網(wǎng)膜素2組p-Akt蛋白表達(dá)較網(wǎng)膜素1組顯著增加(P0.05)。結(jié)論(1)Omentin-1可促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480細(xì)胞的增殖,抑制其凋亡,效應(yīng)呈濃度和時(shí)間依賴關(guān)系。(2)Omentin-1可促進(jìn)結(jié)腸癌細(xì)胞遷移能力及克隆形成能力。(3)Omentin-1抑制凋亡效應(yīng)可能與Omentin-1通過激活A(yù)kt通路有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.34

【參考文獻(xiàn)】

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1 陳萬青;張思維;鄭榮壽;雷正龍;李光琳;鄒小農(nóng);趙平;;中國腫瘤登記地區(qū)2007年腫瘤發(fā)病和死亡分析[J];中國腫瘤;2011年03期

2 鄭榮壽;張思維;吳良有;李光琳;趙平;赫捷;陳萬青;;中國腫瘤登記地區(qū)2008年惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析[J];中國腫瘤;2012年01期

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本文編號：1313634