本文關(guān)鍵詞：姜黃素下調(diào)Tiam1表達抑制鼻咽癌細胞5-8F增殖與侵襲，出處：《南華大學》論文類型：學位論文

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【摘要】：目的:觀察Tiam1蛋白在鼻咽癌組織中表達情況及臨床病理意義,探究姜黃素對鼻咽癌5-8F細胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移的影響及機制。方法:1.通過免疫組化法檢測57例不同病理類型鼻咽癌組織及10例鼻咽黏膜慢性炎癥組織中Tiam1表達情況,分析Tiam1表達與鼻咽癌臨床病理特征之間相關(guān)性;2.利用CCK8法檢測鼻咽癌5-8F細胞在不同姜黃素濃度處理后增殖活力變化。本實驗設(shè)置姜黃素藥物處理5個濃度組(10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L)、空白對照組及DMSO溶劑對照組,分別作用24、48、72h三個時間點后檢測5-8F細胞增殖活力變化并繪制姜黃素對細胞增殖活力的濃度-時間關(guān)系圖表,根據(jù)CCK-8實驗結(jié)果選擇0μmol/L、20μmol/L、60μmol/L、100μmol/L藥物濃度組進行劃痕實驗、Transwell、Western blot實驗;3.劃痕實驗觀察不同濃度姜黃素處理5-8F細胞24h后遷移能力變化;4.Transwell實驗觀察各實驗組細胞在體外穿膜至小室下層細胞數(shù)目,了解姜黃素處理后對細胞體外侵襲能力的影響;5.運用Western blot免疫印跡法檢測空白對照組及3個實驗組細胞在處理24h后Tiam1蛋白含量。結(jié)果:1.免疫組化結(jié)果示:不同病理類型的鼻咽癌組織中Tiam1表達(36/57 63.2%)高于鼻咽黏膜慢性炎癥組織(1/9 10%)(P0.05);Tiam1陽性表達率與性別、年齡無相關(guān)性,所選病例中分期越晚,病理類型分化程度越低,Tiam1蛋白表達率越高,且所有存在遠處轉(zhuǎn)移的病例均高表達Tiam1蛋白(P0.05);2.CCK-8實驗結(jié)果示姜黃素能體外抑制鼻咽癌5-8F細胞增殖,隨著姜黃素藥物濃度增加,作用時間延長,實驗組中5-8F細胞抑制越顯著,5-8F細胞增殖與姜黃素作用存在濃度和時間依賴性;3.劃痕實驗及Transwell實驗結(jié)果說明,實驗組細胞藥物處理24h后,遷移距離及穿膜細胞數(shù)明顯低于空白對照組,姜黃素可體外抑制5-8F細胞的遷移及侵襲能力(P0.05);4.Western blot法檢測不同濃度姜黃素處理5-8F細胞24小時后Tiam1蛋白變化,結(jié)果示空白組Tiam1蛋白表達含量明顯高于實驗組,在實驗組中,20μmol/L組蛋白表達量最高,100μmol/L組Tiam1蛋白表達量低于60、20μmol/L組(P0.05)。結(jié)論:1.Tiam1蛋白在鼻咽癌組織中表達高于鼻咽黏膜慢性炎癥組織,Tiam1表達與患者T分期、組織分化程度、淋巴結(jié)遠處轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性;2.姜黃素可能通過抑制Tiam1蛋白表達,降低5-8F細胞增殖、侵襲與轉(zhuǎn)移能力。
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R739.63

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