姜黃素下調(diào)Tiam1表達(dá)抑制鼻咽癌細(xì)胞5-8F增殖與侵襲
本文關(guān)鍵詞:姜黃素下調(diào)Tiam1表達(dá)抑制鼻咽癌細(xì)胞5-8F增殖與侵襲,出處:《南華大學(xué)》論文類型:學(xué)位論文
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【摘要】:目的:觀察Tiam1蛋白在鼻咽癌組織中表達(dá)情況及臨床病理意義,探究姜黃素對鼻咽癌5-8F細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移的影響及機(jī)制。方法:1.通過免疫組化法檢測57例不同病理類型鼻咽癌組織及10例鼻咽黏膜慢性炎癥組織中Tiam1表達(dá)情況,分析Tiam1表達(dá)與鼻咽癌臨床病理特征之間相關(guān)性;2.利用CCK8法檢測鼻咽癌5-8F細(xì)胞在不同姜黃素濃度處理后增殖活力變化。本實(shí)驗(yàn)設(shè)置姜黃素藥物處理5個(gè)濃度組(10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L)、空白對照組及DMSO溶劑對照組,分別作用24、48、72h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)后檢測5-8F細(xì)胞增殖活力變化并繪制姜黃素對細(xì)胞增殖活力的濃度-時(shí)間關(guān)系圖表,根據(jù)CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇0μmol/L、20μmol/L、60μmol/L、100μmol/L藥物濃度組進(jìn)行劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell、Western blot實(shí)驗(yàn);3.劃痕實(shí)驗(yàn)觀察不同濃度姜黃素處理5-8F細(xì)胞24h后遷移能力變化;4.Transwell實(shí)驗(yàn)觀察各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞在體外穿膜至小室下層細(xì)胞數(shù)目,了解姜黃素處理后對細(xì)胞體外侵襲能力的影響;5.運(yùn)用Western blot免疫印跡法檢測空白對照組及3個(gè)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞在處理24h后Tiam1蛋白含量。結(jié)果:1.免疫組化結(jié)果示:不同病理類型的鼻咽癌組織中Tiam1表達(dá)(36/57 63.2%)高于鼻咽黏膜慢性炎癥組織(1/9 10%)(P0.05);Tiam1陽性表達(dá)率與性別、年齡無相關(guān)性,所選病例中分期越晚,病理類型分化程度越低,Tiam1蛋白表達(dá)率越高,且所有存在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的病例均高表達(dá)Tiam1蛋白(P0.05);2.CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果示姜黃素能體外抑制鼻咽癌5-8F細(xì)胞增殖,隨著姜黃素藥物濃度增加,作用時(shí)間延長,實(shí)驗(yàn)組中5-8F細(xì)胞抑制越顯著,5-8F細(xì)胞增殖與姜黃素作用存在濃度和時(shí)間依賴性;3.劃痕實(shí)驗(yàn)及Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞藥物處理24h后,遷移距離及穿膜細(xì)胞數(shù)明顯低于空白對照組,姜黃素可體外抑制5-8F細(xì)胞的遷移及侵襲能力(P0.05);4.Western blot法檢測不同濃度姜黃素處理5-8F細(xì)胞24小時(shí)后Tiam1蛋白變化,結(jié)果示空白組Tiam1蛋白表達(dá)含量明顯高于實(shí)驗(yàn)組,在實(shí)驗(yàn)組中,20μmol/L組蛋白表達(dá)量最高,100μmol/L組Tiam1蛋白表達(dá)量低于60、20μmol/L組(P0.05)。結(jié)論:1.Tiam1蛋白在鼻咽癌組織中表達(dá)高于鼻咽黏膜慢性炎癥組織,Tiam1表達(dá)與患者T分期、組織分化程度、淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性;2.姜黃素可能通過抑制Tiam1蛋白表達(dá),降低5-8F細(xì)胞增殖、侵襲與轉(zhuǎn)移能力。
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R739.63
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本文編號:1307782
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