本文關(guān)鍵詞：miR-21在胰腺癌耐受5-FU過(guò)程中的作用和機(jī)制的研究

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【摘要】：背景:由于耐藥性的存在,通過(guò)化療途徑治療胰腺癌的效果受到了很大的影響。如果我們能夠估測(cè)到化療藥物在治療胰腺癌中的有效性,從而達(dá)到逆轉(zhuǎn)化療耐藥作用的目的,這也成為我們研究化療治療胰腺癌的重中之重。micro RNA(mi RNA)已被證明廣泛參與各種腫瘤細(xì)胞的耐藥產(chǎn)生,且mi RNA由于其自身的很多特點(diǎn)在疾病診治方面具有突出優(yōu)勢(shì)。但是截至目前,在研究胰腺癌化療耐藥方面,涉及mi RNA的很少。本論文從鑒定胰腺癌耐藥相關(guān)mi RNA著手,在胰腺癌細(xì)胞5-Fu耐藥株中,發(fā)現(xiàn)mi R-21表達(dá)顯著上調(diào),并且通過(guò)mi R-21的過(guò)表達(dá)作用,在提升胰腺癌相關(guān)細(xì)胞對(duì)5-Fu的敏感度方面效果十分顯著,細(xì)胞增殖和侵襲能力也得到很大提升。在比較初步的臨床調(diào)查中,結(jié)果顯示mi R-21的表達(dá)水平和胰腺癌患者化療后的生存期是負(fù)相關(guān)的。目的:研究mi R-21在胰腺癌5-Fu耐藥過(guò)程中的作用及具體分子機(jī)制,以改善胰腺癌5-Fu化療耐藥的現(xiàn)狀。方法:胰腺癌細(xì)胞對(duì)5-Fu的反應(yīng)性和耐受性用IC50值表示。利用實(shí)時(shí)定量PCR(real-time PCR)篩選與胰腺癌5-Fu耐藥相關(guān)的mi RNA,針對(duì)這些mi RNA的mature序列設(shè)計(jì)引物,以探究mi R-21在耐.藥細(xì)胞株和相應(yīng)親,本細(xì)胞株間的表達(dá),差,異。隨后構(gòu)建過(guò)表達(dá)mi R-21的慢病毒表達(dá)載體,進(jìn)而感染目的細(xì)胞PANC-1和PATU8988,檢測(cè)mi R-21的過(guò)表達(dá)。用劃痕實(shí)驗(yàn)和transwell實(shí),驗(yàn)檢。測(cè)胰腺癌細(xì)胞的侵襲能力。進(jìn)一步用、invasion實(shí)驗(yàn)檢測(cè)胰腺癌細(xì)胞的遷移能力。用western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)靶基因的表達(dá)變化。同時(shí)過(guò)表達(dá)靶基因和mi R-21,以檢測(cè)靶基因?qū)i R-21促耐藥作用的對(duì)抗效果,驗(yàn)證mi R-21促耐藥的作用機(jī)制。結(jié)果:與親本株P(guān)ATU8988相比,耐藥細(xì)胞株P(guān)ATU8988/5-Fu中mi R-21的表達(dá)顯著上調(diào)。在胰腺癌細(xì)胞系PATU8988和PANC-1中由慢病毒介導(dǎo)mi R-21的過(guò)表達(dá),不僅導(dǎo)致兩種胰腺癌細(xì)胞系PATU8988和PANC-1對(duì)化療藥物5-FU的耐受,也同時(shí)促進(jìn)了胰腺癌細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移。通過(guò)更進(jìn)一步的機(jī)制探索,發(fā)現(xiàn)mi R-21促進(jìn)耐藥是通過(guò)抑制靶基因PTEN和PDCD4的表達(dá)。而增強(qiáng)PTEN和PDCD4的表達(dá)可以減緩由mi R-21引起的5-Fu耐藥作用,并相應(yīng)減緩胰腺癌細(xì)胞的侵襲。結(jié)論:1.mi R-21促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞對(duì)5-FU的耐受性;2.mi R-21通過(guò)調(diào)控靶基因PTEN和PDCD4的表達(dá)而發(fā)揮促耐藥作用。3.作為mi R-21的靶基因,PTEN和PDCD4過(guò)表達(dá)可以減緩由mi R-21導(dǎo)致的5-FU耐受性及其相關(guān)表型。
【學(xué)位授予單位】：河南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R735.9

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 魏雪菊;miR-21在胰腺癌耐受5-FU過(guò)程中的作用和機(jī)制的研究[D];河南大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：1305271