本文關(guān)鍵詞：HBV通過(guò)上調(diào)miR-331-3p的表達(dá)從而促進(jìn)肝癌細(xì)胞的增殖

  更多相關(guān)文章： HCC HBV miR-331-3p VHL ING5

【摘要】：目的研究miR-331-3p在HBV相關(guān)肝癌發(fā)生發(fā)展中所起到的作用及其機(jī)制。方法1.通過(guò)基因芯片技術(shù)篩選在HepG2和HepG2.2.15細(xì)胞系中差異性表達(dá)的miRNA,用qRT-PCR的方法對(duì)差異表達(dá)的miRNA進(jìn)行驗(yàn)證；選取在HepG2.2.15中表達(dá)穩(wěn)定上升的miR-331-3p作為研究對(duì)象,在穩(wěn)定和瞬時(shí)表達(dá)HBV的肝癌細(xì)胞系中檢測(cè)HBV對(duì)miR-331-3p的作用。2.構(gòu)建miR-331-3p啟動(dòng)子表達(dá)質(zhì)粒,檢測(cè)HBV對(duì)miR-331-3p啟動(dòng)子的作用,研究HBV調(diào)節(jié)miR-331-3p的機(jī)制。3.用MTS、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-331-3p對(duì)SMMC7721細(xì)胞增殖的影響。4.通過(guò)生物信息學(xué)網(wǎng)站尋找miR-331-3p的靶基因。通過(guò)構(gòu)建靶基因3’-UTR表達(dá)質(zhì)粒,檢測(cè)miR-331-3p對(duì)靶基因3’-UTR活性的影響。用qRT-PCR和Western blot分別在mRNA水平和蛋白水平檢測(cè)miR-331-3p對(duì)靶基因的作用。5.用qRT-PCR和Western blot檢測(cè)HBV對(duì)靶基因的作用,并研究HBV、miR-331-3p和靶基因三者之間的關(guān)系。6.構(gòu)建靶基因ING5真核表達(dá)質(zhì)粒和穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系,MTS、平板克隆形成等實(shí)驗(yàn)檢測(cè)靶基因?qū)MMC7721細(xì)胞增殖的影響。7.用裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)和免疫組化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-331-3p和靶基因ING5對(duì)裸鼠體內(nèi)腫瘤增殖的影響。8.用Western blot的方法檢測(cè)伴隨HBV感染的肝癌病人標(biāo)本中靶基因ING5的表達(dá)量。結(jié)果1.MiR-331-3p在表達(dá)HBV的肝癌細(xì)胞系中表達(dá)上升。2.HBV通過(guò)上調(diào)miR-331-3p啟動(dòng)子從而上調(diào)其表達(dá)。3.MiR-331-3p能夠促進(jìn)SMMC7721增殖。4.MiR-331-3p能夠通過(guò)結(jié)合VHL、ING53'-UTR從而抑制靶基因VHL、ING5的表達(dá)。VHL和ING5是miR-331-3p的靶基因。5.HBV能夠抑制靶基因ING5的表達(dá),并且其抑制作用是通過(guò)上調(diào)miR-331-3p的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。6.ING5能夠抑制SMMC7721細(xì)胞增殖。7.MiR-331-3p促進(jìn)裸鼠皮下腫瘤生長(zhǎng),ING5抑制腫瘤生長(zhǎng)。8.伴隨HBV感染的肝癌病人標(biāo)本中ING5的表達(dá)量下降。結(jié)論HBV能夠通過(guò)上調(diào)niR-331-3p進(jìn)而抑制靶基因ING5的表達(dá),影響HCC的發(fā)生和發(fā)展。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R735.7

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王勇姿,俞超芹,凌昌全,衛(wèi)立辛;肝癌細(xì)胞系的研究概況[J];上海醫(yī)學(xué);2000年02期

2 王蓬,陳孝平,PBSLai,CK Leow,Joseph W Y Lau;二十碳五烯酸對(duì)三種肝癌細(xì)胞系作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華普通外科雜志;2001年01期

3 彭林,王衛(wèi)東,孫建,簡(jiǎn)志祥,杜嘉林,區(qū)金銳;穩(wěn)定表達(dá)促血管生成素基因肝癌細(xì)胞系的建立及產(chǎn)物的檢測(cè)[J];廣東醫(yī)學(xué);2003年07期

4 趙蕩;陳宏武;許磊;劉飛勇;;不同時(shí)期肝癌免疫殺傷腫瘤細(xì)胞效應(yīng)探討[J];中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版);2006年S1期

5 郭曉林;姜雅秋;金清龍;;多藥耐藥相關(guān)蛋白-3表達(dá)與肝癌耐藥的相關(guān)性[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2010年11期

6 ;離體培養(yǎng)的人體肝癌細(xì)胞系的建立[J];醫(yī)學(xué)研究通訊;1978年10期

7 陸榮華;陳尊器;陳瑞銘;;人體肝癌細(xì)胞系體外惡性浸潤(rùn)行為的研究[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;1982年02期

8 張志培,施新猷,李六金,劉雪松,江遜,彭磊,趙佐慶;小鼠免疫力對(duì)接種人類(lèi)肝癌細(xì)胞系9724生長(zhǎng)的影響[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2001年07期

9 張志仁,徐順清,周宜開(kāi),任恕,劉志偉,呂斌,徐永俊;一株受二VA英類(lèi)化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)表達(dá)的螢光素酶肝癌細(xì)胞系[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2001年06期

10 董琳,王桂珍;從分子基因水平開(kāi)展中醫(yī)藥防治肝癌的研究[J];甘肅中醫(yī);2002年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 符兆英;劉凱歌;徐光華;;肝癌細(xì)胞系中乙型肝炎病毒x蛋白與缺氧誘導(dǎo)因子-1α表達(dá)的研究[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)大會(huì)、青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2005年

2 張朵;朱海英;謝東莆;胡以平;;肝癌細(xì)胞中存在SP細(xì)胞[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)大會(huì)、青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2005年

3 汪謙;曹良啟;陳錫林;甄茂川;黃曉卉;傅新暉;;過(guò)氧化物酶增殖物激活受體活化抑制肝癌細(xì)胞遷移的研究[A];廣東省肝臟病學(xué)會(huì)2007年年會(huì)論文集[C];2007年

4 鄧欣;蔣小玲;李輝;吳其愷;聶廣;劉欽;;表達(dá)耐拉米夫定乙型肝炎病毒肝癌細(xì)胞系的建立[A];第一次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合傳染病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

5 吳塵軒;杜智;朱爭(zhēng)艷;高英堂;王毅軍;只丹琮;孫泉;;肝癌免疫治療微環(huán)境和樹(shù)突狀細(xì)胞體外誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)研究[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)2007年學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2007年

6 趙主江;單云峰;樊紅;程欲超;成建;權(quán)艷梅;張建瓊;謝維;;DNMT3A siRNA穩(wěn)定表達(dá)載體的構(gòu)建及其沉默效率的鑒定[A];江蘇省遺傳學(xué)會(huì)第七屆代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2006年

7 田德安;;RhoA短發(fā)夾狀雙鏈RNA對(duì)肝癌細(xì)胞生物學(xué)行為的調(diào)控研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下冊(cè)）[C];2007年

8 高倩;;肝癌HepG2細(xì)胞系分泌的免疫抑制物質(zhì)的研究[A];第六屆全國(guó)免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2008年

9 代智;劉銀坤;馮巨濤;宋海燕;申華麗;張麗君;崔杰峰;;高低轉(zhuǎn)移潛能肝癌細(xì)胞系差異糖蛋白質(zhì)組學(xué)研究[A];中國(guó)蛋白質(zhì)組學(xué)第二屆學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要論文集[C];2004年

10 張盛周;俞明月;謝晶;戴谷;李朝軍;;Met與Fas基因在肝癌組織和肝癌細(xì)胞系中的表達(dá)[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2003年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 記者 胡德榮;肝癌患者自噬性缺陷表型與預(yù)后不良緊密相關(guān)[N];健康報(bào);2008年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王驥;凝集素富集糖肽聯(lián)合酶促~(18)O_3標(biāo)記的定量N-糖蛋白組學(xué)方法在肝癌術(shù)后轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)研究中的應(yīng)用[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

2 劉坤;Bcl-2/Twist1蛋白互作在缺氧促進(jìn)肝癌血管生成擬態(tài)形成中的作用[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

3 張春虎;丹皮酚聯(lián)合氟尿嘧啶抗人不同肝癌細(xì)胞系作用及其機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2007年

4 張妤;基于微流控芯片的循環(huán)肝癌細(xì)胞檢測(cè)和微量腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

5 周e，

本文編號(hào)：1304425