本文關(guān)鍵詞：miR-495基因啟動(dòng)子甲基化對(duì)胃癌細(xì)胞的PRL-3基因表達(dá)影響研究

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【摘要】：目的:探討在胃癌腹膜侵襲轉(zhuǎn)移中靶向調(diào)控PRL-3的內(nèi)源性micro RNA分子mi R-495基因上游Cp G島甲基化對(duì)胃癌細(xì)胞的PRL-3基因表達(dá)影響。方法:培養(yǎng)2株正常胃黏膜上皮細(xì)胞系(GES-1和HFE-145)和4株轉(zhuǎn)移潛能不同的胃癌細(xì)胞系(MKN28,SGC7901,MKN45,BGC823),用Western Blot方法檢測(cè)細(xì)胞中PRL-3蛋白水平,用q RT-PCR技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中mi R-495表達(dá)情況,通過(guò)甲基化特異性PCR(MSP)及亞硫酸氫鈉測(cè)序法(bisulfite genomic sequencing,BSP)檢測(cè)mi R-495基因啟動(dòng)子甲基化水平,Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)4種腫瘤細(xì)胞侵襲及轉(zhuǎn)移能力。利用不同濃度(0u M、1u M、5u M、10u M)的DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑5-氮雜胞苷-2’-脫氧胞苷(5-aza-2’-dc)處理后,37℃、5%CO2的孵箱繼續(xù)孵育48小時(shí),同樣利用以上方法測(cè)定PRL-3蛋白水平、mi R-495表達(dá)情況、mi R-495基因啟動(dòng)子甲基化水平以及腫瘤細(xì)胞侵襲及轉(zhuǎn)移能力的變化。結(jié)果:胃癌細(xì)胞在DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑5-氮雜胞苷-2’-脫氧胞苷去甲基化處理后,mi R-495表達(dá)均明顯增加,且明顯抑制了PRL-3蛋白及m RNA的表達(dá),Transwell侵襲遷移實(shí)驗(yàn)表明,胃癌細(xì)胞在去甲基化處理后,侵襲和遷移能力均明顯下降。結(jié)論:在胃癌腹膜侵襲轉(zhuǎn)移中靶向調(diào)控PRL-3的內(nèi)源性micro RNA分子mi R-495基因上游Cp G島甲基化使mi R-495表達(dá)下調(diào),進(jìn)而導(dǎo)致胃癌腹膜轉(zhuǎn)移中PRL-3
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.2

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鄒小農(nóng);孫喜斌;陳萬(wàn)青;鄭榮壽;張思維;代珍;劉衛(wèi)東;趙德利;;2003—2007年中國(guó)胃癌發(fā)病與死亡情況分析[J];腫瘤;2012年02期

2 Masatsugu Hiraki;Yoshihiko Kitajima;Seiji Sato;Jun Nakamura;Kazuyoshi Hashiguchi;Hirokazu Noshiro;Kohji Miyazaki;;Aberrant gene methylation in the peritoneal fluid is a risk factor predicting peritoneal recurrence in gastric cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2010年03期

3 凡時(shí)財(cái);張學(xué)工;;DNA甲基化的生物信息學(xué)研究進(jìn)展[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2009年02期

4 詹文華;韓方海;;我國(guó)胃癌外科治療的現(xiàn)狀和思考[J];實(shí)用腫瘤雜志;2008年02期

5 Mohammad Reza Abbaszadegan;Omeed Moaven;Hamid Reza Sima;Kamran Ghafarzadegan;Azadeh A'rabi;Mohammad Naser Forghani;Hamid Reza Raziee;Ali Mashhadinejad;Mostafa Jafarzadeh;Ehsan Esmaili-Shandiz;Ezzat Dadkhah;;p16 promoter hypermethylation:A useful serum marker for early detection of gastric cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2008年13期

6 ;Re-expression of methylation-induced tumor suppressor gene silencing is associated with the state of histone modification in gastric cancer cell lines[J];World Journal of Gastroenterology;2007年46期

7 關(guān)志宇;戴冬秋;孟春風(fēng);;5-aza-2’-deoxycitydine誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞系TIMP3基因去甲基化和轉(zhuǎn)錄上調(diào)的實(shí)驗(yàn)性探討[J];中國(guó)腫瘤臨床;2006年23期

8 鄧瑋;易永芬;劉丹丹;;胃癌組織Maspin,uPA,MMP-7表達(dá)的意義[J];世界華人消化雜志;2006年07期

9 Gen Tamura;;Alterations of tumor suppressor and tumor-related genes in the development and progression of gastric cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2006年02期

10 ;Peritoneal lavage cytology and carcinoembryonic antigen determination in predicting peritoneal metastasis and prognosis of gastric cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2005年46期

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本文編號(hào)：1299901