本文關(guān)鍵詞：調(diào)控自噬對(duì)二氫青蒿素誘導(dǎo)膀胱癌細(xì)胞凋亡影響的體外研究

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【摘要】：目的:體外研究二氫青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)和自噬抑制劑聯(lián)合用藥抑制膀胱癌T24和5637細(xì)胞增殖的情況并探究其可能機(jī)制。方法:采用不同濃度(0、12.5、25、50、100μmol/L)的二氫青蒿素及加入自噬抑制劑3-MA(5mmol/L)分別處理膀胱癌T24和5637細(xì)胞24h、48h、72h后,通過(guò)噻唑藍(lán)(MTT)實(shí)驗(yàn)分析細(xì)胞存活率,Annexin V/PI雙染和流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞凋亡情況,Western blot檢測(cè)凋亡標(biāo)記蛋白procaspase-3、t-PARP和cleaved-PARP的表達(dá)水平。50μmol/L二氫青蒿素作用于膀胱癌T24細(xì)胞24h后,丹酰戊二胺(monodansylcadaverine,MDC)染色后采用熒光顯微鏡對(duì)自噬進(jìn)行形態(tài)觀察,透射電子顯微鏡(transmission electron microscopy,TEM)觀察自噬體超微結(jié)構(gòu),Western blot檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白LC3、Beclin-1和p62的表達(dá)。利用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法原理,計(jì)量資料采用完全隨機(jī)方差分析,計(jì)數(shù)資料比較采用X2檢驗(yàn);計(jì)量資料比較采用LSD-t檢驗(yàn),P0.05時(shí)差異顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:二氫青蒿素(DHA)抑制膀胱癌T24和5637細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)其凋亡,作用呈濃度和時(shí)間依賴性,與空白對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);與空白對(duì)照組、3-MA和DHA單藥組相比,自噬抑制劑3-MA和DHA聯(lián)合用藥可增加膀胱癌細(xì)胞的凋亡率,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。熒光顯微鏡下觀察到MDC熒光染色陽(yáng)性的自噬泡呈點(diǎn)狀結(jié)構(gòu)分布在細(xì)胞核的胞漿內(nèi)。透射電子顯微鏡下觀察到多個(gè)雙層膜包裹胞質(zhì)形成的自噬體。Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示:二氫青蒿素處理膀胱癌T24細(xì)胞后,與對(duì)照組相比,自噬相關(guān)蛋白LC3、Beclin-1及凋亡標(biāo)記蛋白cleaved-PARP的表達(dá)量增加,而自噬相關(guān)蛋白p62和凋亡標(biāo)記蛋白procaspase-3、t-PARP表達(dá)水平降低;加入自噬抑制劑3-MA后,與對(duì)照組相比,cleaved-PARP的表達(dá)量增加及procaspase-3、t-PARP表達(dá)水平降低這一趨勢(shì)更加明顯。結(jié)論:1、二氫青蒿素可抑制膀胱癌T24和5637細(xì)胞的增殖,具有抗癌作用;2、二氫青蒿素誘發(fā)膀胱癌T24細(xì)胞凋亡時(shí)產(chǎn)生自噬現(xiàn)象,且自噬在細(xì)胞凋亡過(guò)程中起保護(hù)性作用;3、抑制自噬可增強(qiáng)二氫青蒿素誘導(dǎo)的膀胱癌細(xì)胞凋亡,為膀胱癌的治療提供了一種潛在的方法。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.14

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 黃健;陳旭;林天歆;;膀胱癌精準(zhǔn)治療現(xiàn)狀與展望[J];中華泌尿外科雜志;2015年07期

2 高玉仁;張德福;王梁;劉志宇;;檜木醇激活膀胱癌J82細(xì)胞自噬誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[J];中國(guó)癌癥雜志;2015年05期

3 鄭清水;李曉東;許寧;陳少豪;陳錦添;魏勇;薛學(xué)義;;3-甲基腺嘌呤促進(jìn)吡柔比星誘導(dǎo)膀胱癌BIU-87細(xì)胞凋亡及機(jī)制[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2015年01期

4 杜玉丹;余立群;羅瑾;;二氫青蒿素對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞的抑制作用[J];腫瘤防治研究;2014年04期

5 葉獻(xiàn)詞;薛剛;束慶文;;雷帕霉素聯(lián)合順鉑誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡和自噬及對(duì)細(xì)胞侵襲力的影響[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2014年07期

6 王國(guó)強(qiáng);袁亞光;朱小軍;閆駿;;二氫青蒿素對(duì)膀胱癌T24細(xì)胞株的抑制作用及其機(jī)制研究[J];中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2013年03期

7 韓蘇軍;張思維;陳萬(wàn)青;李長(zhǎng)嶺;;中國(guó)膀胱癌發(fā)病現(xiàn)狀及流行趨勢(shì)分析[J];癌癥進(jìn)展;2013年01期

8 鄧淑文;殷清華;蘇琦;莊英幟;;姜黃素誘導(dǎo)人胃癌SGC7901細(xì)胞自噬性凋亡的研究[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2012年31期

9 王雙佳;孫備;潘尚哈;陳華;孔瑞;李軍;薛東波;白雪巍;姜洪池;;二氫青蒿素聯(lián)合吉西他賓治療胰腺癌的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華外科雜志;2010年07期

10 張佳麗;王增;莊蓓蓓;周慧君;;二氫青蒿素聯(lián)合環(huán)氧化酶2抑制劑抗S180肉瘤作用機(jī)制研究[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2009年03期

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本文編號(hào)：1299777