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內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對(duì)胃癌細(xì)胞侵襲遷移能力的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-12-17 10:08

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【摘要】:研究背景和目的多種應(yīng)激因素如營養(yǎng)剝奪、缺血缺氧、鈣代謝障礙及蛋白質(zhì)糖基化受阻等均可導(dǎo)致蛋白質(zhì)折疊障礙,未折疊蛋白質(zhì)堆積于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi),細(xì)胞的這種生存狀態(tài)稱為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress,ERS)。由此誘發(fā)細(xì)胞發(fā)生一系列自我保護(hù)性反應(yīng),稱為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)或未折疊蛋白反應(yīng)(unfolded protein response,UPR)。近年來,有學(xué)者發(fā)現(xiàn)ERS在腫瘤組織中普遍存在。它作為細(xì)胞的一種自我保護(hù)性反應(yīng),參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展,并參與調(diào)控腫瘤的浸潤與轉(zhuǎn)移。但目前ERS與胃癌浸潤轉(zhuǎn)移的關(guān)系,尚報(bào)道甚少。本課題擬以胃癌細(xì)胞系SGC7901和BGC823作為研究對(duì)象,使用ERS經(jīng)典誘導(dǎo)劑衣霉素(tunicamycin,TM)處理胃癌細(xì)胞,誘導(dǎo)其產(chǎn)生ERS,探討ERS對(duì)胃癌細(xì)胞侵襲及遷移能力的影響。方法1.ERS細(xì)胞模型的建立ERS誘導(dǎo)劑衣霉素(5μg/ml)分別處理胃癌細(xì)胞系SGC7901和BGC823后,于處理后0h、12h、24h及36h提取總蛋白,采用Western blot技術(shù)檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志蛋白GRP78的表達(dá)。2.細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)衣霉素(5μg/ml)分別處理SGC7901和BGC823 0h、12h、24h及36h后,使用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)分別觀察兩種胃癌細(xì)胞在各時(shí)間點(diǎn)的劃痕愈合度,使用Transwell法分別檢測兩種胃癌細(xì)胞在各時(shí)間點(diǎn)遷移或侵襲到下室的細(xì)胞數(shù)。3.檢測ERS對(duì)侵襲遷移相關(guān)蛋白表達(dá)的影響以胃癌細(xì)胞系SGC7901和BGC823為處理對(duì)象,衣霉素處理12h、24h、36h后,Western blot檢測侵襲遷移相關(guān)蛋白MMP-9和VEGF蛋白的變化。4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示,應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù),P0.05為差異有顯著性。結(jié)果:1.衣霉素可誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞系SGC7901和BGC823發(fā)生ERS與0h相比,衣霉素處理胃癌細(xì)胞系SGC7901和BGC823,12h、24h及36h后,GRP78在蛋白水平的表達(dá)量均明顯提高,具有時(shí)間依賴性(P0.05)。2.ERS對(duì)胃癌細(xì)胞系SGC7901和BGC823侵襲遷移能力的影響與對(duì)照組相比,衣霉素處理胃癌細(xì)胞系SGC7901和BGC823 12h、24h及36h后,胃癌細(xì)胞的侵襲遷移能力均有明顯的增加,且具有時(shí)間依賴性(P0.05)。3.ERS對(duì)侵襲遷移相關(guān)蛋白表達(dá)的影響與0h相比,衣霉素處理胃癌細(xì)胞系SGC7901和BGC823,12h、24h及36h后,MMP-9在蛋白水平的表達(dá)量均明顯提高,具有時(shí)間依賴性(P0.05)。而VEGF在12h、24h的表達(dá)量增高,36h相對(duì)24h表達(dá)量下降(P0.05)。結(jié)論:內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可上調(diào)胃癌細(xì)胞內(nèi)MMP-9及VEGF的表達(dá),促進(jìn)胃癌細(xì)胞的侵襲與遷移。
【學(xué)位授予單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R735.2

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 任黔川;彭芝蘭;譚欣;;羅格列酮對(duì)人卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖和凋亡的研究[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年02期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 任黔川;PPARγ在上皮性卵巢癌的表達(dá)及其配體促凋亡作用機(jī)制初探[D];四川大學(xué);2006年

2 王鵬飛;鱖熱休克蛋白和低氧反應(yīng)基因的克隆和表達(dá)研究[D];中山大學(xué);2014年



本文編號(hào):1299700

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