本文關(guān)鍵詞：人胚胎干細(xì)胞對(duì)HepG2肝癌體外抗腫瘤作用的研究

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【摘要】：目的研究人胚胎干細(xì)胞H9與人肝癌細(xì)胞Hep G2共培養(yǎng)上清液對(duì)HepG2增值、遷移及凋亡的影響,并且探討其可能機(jī)制。方法體外接觸式共培養(yǎng)H9與HepG2,于共培養(yǎng)不同時(shí)間段后即12h、24h、36h、48h取得上清,離心后獲得上清液,然后把不同時(shí)間不同濃度上清即20%、40%、60%、80%,作用于HepG2細(xì)胞,每日于倒置熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)情況和形態(tài)變化;用MTS法檢測(cè)不同濃度上清分別作用Hep G2細(xì)胞24h、48h后HepG2細(xì)胞的增值情況;應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Hep G2細(xì)胞的凋亡情況;用Hochest33258染色檢測(cè)HepG2細(xì)胞的凋亡情況;Transwell小室法檢測(cè)上清對(duì)HepG2細(xì)胞侵襲遷移的影響;基因芯片法檢測(cè)上清作用HepG2細(xì)胞后,HepG2細(xì)胞表達(dá)譜的變化。結(jié)果不同濃度的共培養(yǎng)上清液均對(duì)HepG2細(xì)胞的增殖有一定的抑制作用,并且40%濃度及以上的濃度能明顯促進(jìn)肝癌細(xì)胞的凋亡,主要是早期和晚期凋亡,小室法也看出,上清對(duì)肝癌細(xì)胞的侵襲和遷移也具有明顯的抑制作用,同時(shí)還能促進(jìn)肝癌細(xì)胞HepG2的死亡,上清作用肝癌Hep G2細(xì)胞后的基因表達(dá)譜和基因功能都有明顯的差異;同時(shí),上清對(duì)正常的肝細(xì)胞LO2無(wú)明顯的作用。結(jié)論胚胎干細(xì)胞與肝癌細(xì)胞HepG2共培養(yǎng)上清能夠在體外明顯抑制肝癌細(xì)胞HepG2的增殖、遷移和侵襲,并且促進(jìn)其凋亡,并且具有濃度依賴性,共培養(yǎng)時(shí)間越長(zhǎng),上清濃度越高,抑制作用效果越好。說(shuō)明肝癌細(xì)胞與胚胎干細(xì)胞共培養(yǎng)上清在體外對(duì)肝癌細(xì)胞Hep G2具有一定的抗腫瘤效應(yīng),具體機(jī)制待后續(xù)研究。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.7

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王穎;陳莉娜;張艷艷;關(guān)偉軍;;飼養(yǎng)層細(xì)胞對(duì)胚胎干細(xì)胞的影響及其分離培養(yǎng)的影響因素[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2007年11期

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本文編號(hào)：1296280