本文關鍵詞：人胚胎干細胞對HepG2肝癌體外抗腫瘤作用的研究

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【摘要】：目的研究人胚胎干細胞H9與人肝癌細胞Hep G2共培養(yǎng)上清液對HepG2增值、遷移及凋亡的影響,并且探討其可能機制。方法體外接觸式共培養(yǎng)H9與HepG2,于共培養(yǎng)不同時間段后即12h、24h、36h、48h取得上清,離心后獲得上清液,然后把不同時間不同濃度上清即20%、40%、60%、80%,作用于HepG2細胞,每日于倒置熒光顯微鏡下觀察細胞的生長情況和形態(tài)變化;用MTS法檢測不同濃度上清分別作用Hep G2細胞24h、48h后HepG2細胞的增值情況;應用流式細胞術檢測Hep G2細胞的凋亡情況;用Hochest33258染色檢測HepG2細胞的凋亡情況;Transwell小室法檢測上清對HepG2細胞侵襲遷移的影響;基因芯片法檢測上清作用HepG2細胞后,HepG2細胞表達譜的變化。結果不同濃度的共培養(yǎng)上清液均對HepG2細胞的增殖有一定的抑制作用,并且40%濃度及以上的濃度能明顯促進肝癌細胞的凋亡,主要是早期和晚期凋亡,小室法也看出,上清對肝癌細胞的侵襲和遷移也具有明顯的抑制作用,同時還能促進肝癌細胞HepG2的死亡,上清作用肝癌Hep G2細胞后的基因表達譜和基因功能都有明顯的差異;同時,上清對正常的肝細胞LO2無明顯的作用。結論胚胎干細胞與肝癌細胞HepG2共培養(yǎng)上清能夠在體外明顯抑制肝癌細胞HepG2的增殖、遷移和侵襲,并且促進其凋亡,并且具有濃度依賴性,共培養(yǎng)時間越長,上清濃度越高,抑制作用效果越好。說明肝癌細胞與胚胎干細胞共培養(yǎng)上清在體外對肝癌細胞Hep G2具有一定的抗腫瘤效應,具體機制待后續(xù)研究。
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R735.7

【參考文獻】

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1 王穎;陳莉娜;張艷艷;關偉軍;;飼養(yǎng)層細胞對胚胎干細胞的影響及其分離培養(yǎng)的影響因素[J];中國畜牧獸醫(yī);2007年11期

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本文編號：1296280