MicroRNA-145和c-myc在急性髓系白血病患者中的表達(dá)及意義
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更多相關(guān)文章: 急性髓系白血病 miR-145 c-myc基因 表達(dá)水平
【摘要】:研究目的:本研究應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),檢測(cè)microRNA-145(miR-145)及c-myc基因在急性髓系白血病患者骨髓細(xì)胞中的表達(dá)情況,分析miR-145及c-myc基因在急性髓系白血病患者中表達(dá)水平的相關(guān)性,并探討其臨床意義。研究方法:1.研究對(duì)象:收集70例急性髓系白血病患者骨髓標(biāo)本,其中初治組46例,按FAB分型M1 6例,M2 11例,M3 11例,M4 7例,M5 6例,M6 5例。緩解組24例,按FAB分型M1 1例,M2 9例,M3 6例,M4 3例,M5 2例,M6 3例。并收集14例非血液系統(tǒng)腫瘤性疾病患者作為對(duì)照組。2.引物設(shè)計(jì)與合成:應(yīng)用軟件premier 5.0設(shè)計(jì)并參照文獻(xiàn)設(shè)計(jì)miR-145、內(nèi)參基因U6、c-myc基因及內(nèi)參基因GAPDH的引物序列。3.采用淋巴細(xì)胞分離液分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞并提取總RNA,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)miR-145及c-myc基因的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),并計(jì)算其相對(duì)表達(dá)值。4.應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。因?yàn)閿?shù)據(jù)呈非正態(tài)分布或方差不齊,所有數(shù)據(jù)均采用中位數(shù)(極小值~極大值)表示,采用Mann-whitney U秩和檢驗(yàn)對(duì)數(shù)據(jù)分別進(jìn)行差異性分析,miR-145表達(dá)水平與c-myc基因、骨髓原始細(xì)胞比例、外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白含量及血小板計(jì)數(shù)相關(guān)性分析行Spearman相關(guān)性檢驗(yàn),P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。研究結(jié)果:1.miR-145在AML各組相對(duì)表達(dá)水平呈偏態(tài)分布:初治組表達(dá)為0.560(0.004~6.037)、緩解組表達(dá)為5.712(1.323~22.846)、對(duì)照組表達(dá)為14.547(2.019~41.466)。初治組miR-145表達(dá)水平明顯低于緩解組及對(duì)照組,具有顯著性差異(P0.001),緩解組低于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0120.05)。2.初診AML患者中miR-145表達(dá)水平與初診時(shí)外周血白細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白、血小板計(jì)數(shù)及初診時(shí)骨髓原始細(xì)胞百分比均無統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性(r=-0.129,P=0.394;r=-0.075,P=0.620;r=-0.009,P=0.95;r=-0.125,P=0.408)。3.通過檢測(cè)9例的初治白血病患者與其第一次緩解后骨髓中miR-145的表達(dá)水平發(fā)現(xiàn),緩解后比初診時(shí)miR-145的表達(dá)水平明顯上調(diào)(P0.05)。4.miR-145在亞型中表達(dá)的差異:46例AML患者中miR-145在預(yù)后較好的M3型表達(dá)為0.639(0.013~5.751),非M3型表達(dá)為0.545(0.004~41.466),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.887)。5.c-myc基因的mRNA在AML患者各組表達(dá)不同,初治組表達(dá)為7.668(0.013~36.098)、緩解組表達(dá)為0.976(0.076~13.212)、對(duì)照組表達(dá)為0.190(0.005~2.702)。初治組c-myc表達(dá)水平明顯高于緩解組及對(duì)照組,具有顯著性差異(P0.001),緩解組高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0150.05)。6.c-myc在亞型中表達(dá)的差異:46例AML患者中c-myc在預(yù)后較好的M3型表達(dá)為7.48(0.06~23.98),非M3型表達(dá)為7.75(0.01~36.10),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.78)。7.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析miR-145和c-myc基因mRNA表達(dá)水平之間的相關(guān)性:初治AML患者中miR-145與靶基因c-myc的表達(dá)水平之間存在負(fù)相關(guān)(r=-0.564,p0.001)。8.結(jié)論:1、AML患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中miR-145的表達(dá)水平比對(duì)照組明顯降低,提示miR-145可能在AML發(fā)病起抑制作用。2、c-myc基因在AML患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中的表達(dá)水平比對(duì)照組明顯增高,c-myc基因與AML的發(fā)生密切相關(guān)。3、AML中miR-145的表達(dá)和c-myc基因mRNA表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)。4、miR-145及與c-myc初診時(shí)外周血白細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量、血小板計(jì)數(shù)、骨髓原始細(xì)胞比例及初診時(shí)AML免疫分型之間均無明顯相關(guān)性。
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R733.71
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,本文編號(hào):1296031
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