反義RNA抑制c-myc表達(dá)增強(qiáng)骨肉瘤細(xì)胞對順鉑的敏感性
發(fā)布時間:2017-12-15 23:34
本文關(guān)鍵詞:反義RNA抑制c-myc表達(dá)增強(qiáng)骨肉瘤細(xì)胞對順鉑的敏感性
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【摘要】:目的:通過重組反義c-myc腺病毒的制備及鑒定,并轉(zhuǎn)染骨肉瘤MG-63細(xì)胞(P53缺失型)和U20S細(xì)胞(P53野生型),通過對以上兩種骨肉瘤細(xì)胞進(jìn)行重組反義c-myc腺病毒基因干擾后,使骨肉瘤細(xì)胞產(chǎn)生低表達(dá)c-myc,再通過使用不同濃度的順鉑作用不同時間,研究順鉑對骨肉瘤細(xì)胞凋亡產(chǎn)生的影響。方法:重組反義c-myc腺病毒體外轉(zhuǎn)染MG-63細(xì)胞和U20S細(xì)胞后12h、24h、48h后,構(gòu)建反義c-myc的重組腺病毒(Ad-Asc-myc), c-myc基因表達(dá)測定及c-my蛋白表達(dá)測定后在體外感染骨肉瘤MG-63細(xì)胞和U20S細(xì)胞,并與濃度為2.0、5.0μg/ml的順鉑作用2h、4h、8h后,采用蛋白免疫印跡(Western blot)方法檢測干擾水平;再通過瑞氏染色和MTT檢測,從形態(tài)學(xué)和統(tǒng)計學(xué)上檢驗(yàn)不同濃度的順鉑作用于c-myc低表達(dá)的骨肉瘤細(xì)胞對MG-63細(xì)胞和U20S細(xì)胞凋亡作用。結(jié)果:構(gòu)建培養(yǎng)的腺病毒Ad-Asc-myc載體體外感染MG-63細(xì)胞和U20S細(xì)胞48h后,可明顯降低骨肉瘤細(xì)胞c-myc蛋白的表達(dá)水平;同時,順鉑對低c-myc表達(dá)的骨肉瘤MG-63細(xì)胞和U20S細(xì)胞的抑制作用均明顯增強(qiáng)。結(jié)論:抑制骨肉瘤細(xì)胞c-myc的表達(dá)可以增強(qiáng)骨肉瘤對順鉑化療的敏感性,但與順鉑濃度及作用時間統(tǒng)計學(xué)無明顯意義。
【學(xué)位授予單位】:蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R738.1
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號:1293871
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