本文關(guān)鍵詞：KLF4調(diào)控MMP9對(duì)原發(fā)性肝癌的侵襲遷移能力的影響

  更多相關(guān)文章： KLF4 MMP9 肝細(xì)胞性肝癌 侵襲 遷移

【摘要】：目的:研究KLF4基因與MMP9基因在肝癌組織和肝癌癌旁組織中的表達(dá)情況,探討KLF4基因調(diào)節(jié)MMP9基因的表達(dá)變化對(duì)肝癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響,探討肝細(xì)胞癌侵襲和轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制,腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的分子網(wǎng)絡(luò),為肝癌轉(zhuǎn)移侵襲的治療提供理論基礎(chǔ)。方法:1、原發(fā)性肝癌病人癌和癌旁組織(距病灶2cm的組織)標(biāo)本搜集后,通過(guò)免疫組化、q RT-PCR和WB檢測(cè)50例肝癌組織及對(duì)應(yīng)癌旁組織中KLF4基因和MMP9基因的表達(dá)。2、質(zhì)粒(生物公司代為設(shè)計(jì)合成)轉(zhuǎn)染后,上調(diào)肝癌細(xì)胞Hep G2中KLF4基因的表達(dá),檢測(cè)MMP9基因m RNA及蛋白表達(dá)水平的變化;3、運(yùn)用Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)、劃痕實(shí)驗(yàn)觀測(cè)轉(zhuǎn)染后Hep G2細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力的變化。4、統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件,正態(tài)分布、方差齊的測(cè)量數(shù)據(jù),以c±s表示,用t檢驗(yàn)做組間比較,用單因素方差分析做多組均數(shù)間比較,P0.05,說(shuō)明差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1、q RT-PC R檢測(cè)發(fā)現(xiàn)肝癌組織標(biāo)本中KLF4基因m RN A的表達(dá)較對(duì)應(yīng)的癌旁組織標(biāo)本更低(P0.05);而MMP9 m RNA的表達(dá)較對(duì)應(yīng)的癌旁組織標(biāo)本更高(P0.05)。WB檢測(cè)肝癌組織KLF4蛋白表達(dá)低于癌旁組織;而MMP9蛋白的表達(dá)高于癌旁組織。2、免疫組化檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)KLF4蛋白在76%(38/50)的病例肝癌組織呈低表達(dá),而僅有10%(5/50)的癌旁組織中呈低表達(dá);MMP9蛋白在84%(42/50)的病例肝癌組織呈高表達(dá),而僅有12%(6/50)的癌旁組織中呈高表達(dá)。3、q RT-PCR和WB檢測(cè)發(fā)現(xiàn)過(guò)表達(dá)KLF4組中KLF4 m RNA和蛋白的表達(dá)較正常對(duì)照組和空白質(zhì)粒組明顯升高(P0.05),而正常對(duì)照組、空白質(zhì)粒組之間KLF4 m RN A表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。另外,過(guò)表達(dá)KLF4后,發(fā)現(xiàn)MMP9m RNA和蛋白的表達(dá)降低(P0.05)。4、Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)顯示:相對(duì)于正常對(duì)照組和空白質(zhì)粒組,過(guò)表達(dá)KLF4組的細(xì)胞侵襲能力降低(P0.05);劃痕試驗(yàn)結(jié)果顯示:相對(duì)于正常對(duì)照組和空白質(zhì)粒組,過(guò)表達(dá)KLF4組細(xì)胞的劃痕愈合率明顯下降(P0.05)。結(jié)論:1、在原發(fā)性肝癌中,KLF4基因的表達(dá)明顯低于癌旁組織,而MMP9基因表達(dá)明顯高于癌旁組織。2、在肝癌細(xì)胞Hep G2中上調(diào)KLF4基因的表達(dá)可引起MMP9基因的表達(dá)下降,進(jìn)而抑制肝癌細(xì)胞的侵襲和遷移。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7

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本文編號(hào)：1293607