本文關(guān)鍵詞：KLF4調(diào)控MMP9對原發(fā)性肝癌的侵襲遷移能力的影響

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【摘要】：目的:研究KLF4基因與MMP9基因在肝癌組織和肝癌癌旁組織中的表達情況,探討KLF4基因調(diào)節(jié)MMP9基因的表達變化對肝癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響,探討肝細胞癌侵襲和轉(zhuǎn)移的分子機制,腫瘤細胞侵襲和轉(zhuǎn)移的分子網(wǎng)絡,為肝癌轉(zhuǎn)移侵襲的治療提供理論基礎(chǔ)。方法:1、原發(fā)性肝癌病人癌和癌旁組織(距病灶2cm的組織)標本搜集后,通過免疫組化、q RT-PCR和WB檢測50例肝癌組織及對應癌旁組織中KLF4基因和MMP9基因的表達。2、質(zhì)粒(生物公司代為設(shè)計合成)轉(zhuǎn)染后,上調(diào)肝癌細胞Hep G2中KLF4基因的表達,檢測MMP9基因m RNA及蛋白表達水平的變化;3、運用Transwell侵襲實驗、劃痕實驗觀測轉(zhuǎn)染后Hep G2細胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力的變化。4、統(tǒng)計分析采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件,正態(tài)分布、方差齊的測量數(shù)據(jù),以c±s表示,用t檢驗做組間比較,用單因素方差分析做多組均數(shù)間比較,P0.05,說明差異具有統(tǒng)計學意義。結(jié)果:1、q RT-PC R檢測發(fā)現(xiàn)肝癌組織標本中KLF4基因m RN A的表達較對應的癌旁組織標本更低(P0.05);而MMP9 m RNA的表達較對應的癌旁組織標本更高(P0.05)。WB檢測肝癌組織KLF4蛋白表達低于癌旁組織;而MMP9蛋白的表達高于癌旁組織。2、免疫組化檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)KLF4蛋白在76%(38/50)的病例肝癌組織呈低表達,而僅有10%(5/50)的癌旁組織中呈低表達;MMP9蛋白在84%(42/50)的病例肝癌組織呈高表達,而僅有12%(6/50)的癌旁組織中呈高表達。3、q RT-PCR和WB檢測發(fā)現(xiàn)過表達KLF4組中KLF4 m RNA和蛋白的表達較正常對照組和空白質(zhì)粒組明顯升高(P0.05),而正常對照組、空白質(zhì)粒組之間KLF4 m RN A表達量差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。另外,過表達KLF4后,發(fā)現(xiàn)MMP9m RNA和蛋白的表達降低(P0.05)。4、Transwell侵襲實驗顯示:相對于正常對照組和空白質(zhì)粒組,過表達KLF4組的細胞侵襲能力降低(P0.05);劃痕試驗結(jié)果顯示:相對于正常對照組和空白質(zhì)粒組,過表達KLF4組細胞的劃痕愈合率明顯下降(P0.05)。結(jié)論:1、在原發(fā)性肝癌中,KLF4基因的表達明顯低于癌旁組織,而MMP9基因表達明顯高于癌旁組織。2、在肝癌細胞Hep G2中上調(diào)KLF4基因的表達可引起MMP9基因的表達下降,進而抑制肝癌細胞的侵襲和遷移。
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7

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本文編號：1293607