本文關(guān)鍵詞：RACK1對肺腺癌細胞株A549生物學(xué)行為及VEGF，Bcl-2，CyclinD1表達的影響

  更多相關(guān)文章： 肺腺癌 活化的蛋白激酶C受體1 shRNA干擾 流式細胞術(shù)

【摘要】：目的:研究RACK1基因沉默對肺腺癌A549細胞生物學(xué)行為的影響,探究其對VEGF,Bcl-2,CyclinD1表達的影響。方法:采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將針對RACK1基因的RACK1 shRNA及空載質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染至A549細胞中,分別設(shè)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的實驗組、陰性對照組和空白對照組,并進行以下實驗:(1)Western Blot法檢測轉(zhuǎn)染前后的A549細胞中RACK1蛋白表達的變化;(2)CCK-8法、平板克隆形成實驗以及軟瓊脂集落形成實驗檢測shRNA干擾后細胞的生長增殖狀況;(3)劃痕愈合實驗觀察體外A549細胞運動遷移的改變;(4)流式細胞術(shù)檢測A549細胞周期和細胞凋亡率的變化;(5)Western Blot法檢測轉(zhuǎn)染前后的A549細胞中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、抗細胞凋亡基因(Bcl-2)、細胞周期蛋白Dl(CyclinD1)表達的變化。結(jié)果:(1)Western blot檢測顯示,在shRNA干擾48 h后,轉(zhuǎn)染了特異性針對RACK1的shRNA的4組細胞RACK1蛋白的表達水平均明顯下調(diào)(P0.05),其中轉(zhuǎn)染了shRNA1的A549細胞組的RACK1蛋白表達水平較另外三組的表達水平顯著降低(P0.05),而空載質(zhì)粒干擾A549細胞后,RACK1的表達無明顯變化(P0.05);(2)CCK-8法、平板克隆形成實驗顯示實驗組細胞生長明顯受到抑制(P0.05);(3)劃痕愈合實驗表明實驗組細胞的遷移能力顯著減弱(P0.05);(4)流式細胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)實驗組細胞G0/G1期比例增加、凋亡率增高(P0.05);(5)Western blot結(jié)果顯示,實驗組A549細胞內(nèi)VEGF,Bcl-2,CyclinD1的表達明顯下調(diào)(P0.05)。結(jié)論:RACK1基因沉默能抑制肺腺癌A549細胞增殖和遷移,誘導(dǎo)其凋亡,下調(diào)VEGF,Bcl-2,CyclinD1的表達。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R734.2

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊晉平,王澤,張?zhí)K;肺腺癌5-羥色胺受體的免疫組織化學(xué)定位[J];四川解剖學(xué)雜志;2003年02期

2 吳一龍,林嘉穎,楊學(xué)寧,喬貴賓,王坤,陳剛;肺腺癌患者酪氨酸激酶信號傳導(dǎo)通路的異常與臨床預(yù)后[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2004年12期

3 張利群,陳杭薇,王四海,辛慶紅,杜玉國,尤蘭華;人呼吸道合胞病毒轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)染肺腺癌細胞系的研究[J];山東醫(yī)藥;2005年12期

4 黎聯(lián);梅同華;周向東;張新高;車德亞;;細胞外信號調(diào)節(jié)激酶信號通路與基質(zhì)金屬蛋白酶-26在肺腺癌表達中的關(guān)系[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2009年02期

5 王亞南;顧國浩;;生物芯片在肺腺癌研究和診療中的應(yīng)用進展[J];國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2011年02期

6 ;我國人體肺腺癌細胞系建立[J];腫瘤;1981年06期

7 季晨陽,張義R，

本文編號：1290091