本文關(guān)鍵詞：RACK1對(duì)肺腺癌細(xì)胞株A549生物學(xué)行為及VEGF，Bcl-2，CyclinD1表達(dá)的影響

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【摘要】：目的:研究RACK1基因沉默對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞生物學(xué)行為的影響,探究其對(duì)VEGF,Bcl-2,CyclinD1表達(dá)的影響。方法:采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將針對(duì)RACK1基因的RACK1 shRNA及空載質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染至A549細(xì)胞中,分別設(shè)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)組、陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組,并進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn):(1)Western Blot法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后的A549細(xì)胞中RACK1蛋白表達(dá)的變化;(2)CCK-8法、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)以及軟瓊脂集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)shRNA干擾后細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖狀況;(3)劃痕愈合實(shí)驗(yàn)觀察體外A549細(xì)胞運(yùn)動(dòng)遷移的改變;(4)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)A549細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡率的變化;(5)Western Blot法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后的A549細(xì)胞中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、抗細(xì)胞凋亡基因(Bcl-2)、細(xì)胞周期蛋白Dl(CyclinD1)表達(dá)的變化。結(jié)果:(1)Western blot檢測(cè)顯示,在shRNA干擾48 h后,轉(zhuǎn)染了特異性針對(duì)RACK1的shRNA的4組細(xì)胞RACK1蛋白的表達(dá)水平均明顯下調(diào)(P0.05),其中轉(zhuǎn)染了shRNA1的A549細(xì)胞組的RACK1蛋白表達(dá)水平較另外三組的表達(dá)水平顯著降低(P0.05),而空載質(zhì)粒干擾A549細(xì)胞后,RACK1的表達(dá)無(wú)明顯變化(P0.05);(2)CCK-8法、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)顯示實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞生長(zhǎng)明顯受到抑制(P0.05);(3)劃痕愈合實(shí)驗(yàn)表明實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的遷移能力顯著減弱(P0.05);(4)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞G0/G1期比例增加、凋亡率增高(P0.05);(5)Western blot結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組A549細(xì)胞內(nèi)VEGF,Bcl-2,CyclinD1的表達(dá)明顯下調(diào)(P0.05)。結(jié)論:RACK1基因沉默能抑制肺腺癌A549細(xì)胞增殖和遷移,誘導(dǎo)其凋亡,下調(diào)VEGF,Bcl-2,CyclinD1的表達(dá)。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R734.2

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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本文編號(hào)：1290091