本文關(guān)鍵詞：siRNA抑制Cyclophilin A基因?qū)眵[癌細(xì)胞Hep-2增殖、轉(zhuǎn)移及順鉑敏感性的作用

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【摘要】：目的:喉癌是常見的頭頸部惡性腫瘤之一,其中喉鱗狀細(xì)胞癌(Laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)是其最主要的病理學(xué)類型,約占99%。LSCC的發(fā)病率最近幾年有所升高。因此探索對(duì)抗喉鱗癌轉(zhuǎn)移的新策略及藥物靶點(diǎn)是十分必要的。親環(huán)素A(Cyclophilin A,CypA)是免疫抑制劑環(huán)孢素A(CyclosporinA,CsA)的細(xì)胞內(nèi)結(jié)合蛋白。近來研究發(fā)現(xiàn)其在結(jié)腸癌、胰腺癌、肝癌等惡性腫瘤中高表達(dá),并參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展及生物學(xué)行為。前期研究發(fā)現(xiàn)CypA在喉癌組織中的表達(dá)較正常癌旁組織明顯升高,但在喉癌中的生物學(xué)作用及機(jī)制尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)利用RNA干擾技術(shù)沉默Hep-2細(xì)胞中Cyp A的表達(dá),檢測(cè)其對(duì)Hep-2細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移等方面的影響及其可能的分子機(jī)制。方法:將化學(xué)合成的靶向Cyp A的siRNA(small interfering RNA,小干擾RNA)轉(zhuǎn)染喉鱗癌細(xì)胞Hep-2,同時(shí)以轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照NC siRNA和空白細(xì)胞作為對(duì)照,3組細(xì)胞分別命名為control組、NC siRNA組、CypA siRNA組。運(yùn)用real-time PCR檢測(cè)各組CypA及相關(guān)基因CD147、VEGF、MMP-9的mRNA表達(dá)差異;Western blot檢測(cè)CypA、CD147、MMP-9的蛋白表達(dá)變化;ELISA方法測(cè)定Hep-2細(xì)胞培養(yǎng)上清液中VEGF蛋白含量的變化;MTT法檢測(cè)CypA對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)情況及順鉑敏感性的影響;平板克隆形成實(shí)驗(yàn)觀察CypA在喉癌細(xì)胞增殖中的作用;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CypA對(duì)細(xì)胞周期分布的影響;Transwell法檢測(cè)Cyp A在喉癌細(xì)胞侵襲、遷移中的作用;血管生成擬態(tài)(vasculogenic mimicry,VM)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CypA對(duì)喉癌細(xì)胞血管通道形成能力的影響。結(jié)果:CypA siRNA轉(zhuǎn)染后的Hep-2細(xì)胞中CypA mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯降低(P=0.000)。沉默CypA的表達(dá)可下調(diào)CD147(P=0.000)、VEGF(P=0.001)、MMP-9(P=0.000)的mRNA表達(dá),同時(shí)可抑制Hep-2細(xì)胞VEGF的分泌和CD147、MMP-9蛋白的表達(dá),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。MTT結(jié)果顯示Cyp A siRNA轉(zhuǎn)染后的Hep-2細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,且對(duì)順鉑敏感性明顯增強(qiáng)(P=0.000);細(xì)胞克隆形成被抑制,control組克隆數(shù)為(235.00±23.90)、NC siRNA組為(240.67±10.07)、CypA siRNA組為(129.33±14.22)(P=0.000);細(xì)胞周期阻滯于G1期,各組增值指數(shù)分別為control組(0.337±0.016)、NC siRNA組(0.345±0.024)、CypA siRNA組(0.191±0.005)(P=0.000);Hep-2細(xì)胞的遷移、侵襲能力明顯降低(P=0.000)。下調(diào)CypA表達(dá)后,Hep-2細(xì)胞VM表達(dá)降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。結(jié)論:CypA表達(dá)下調(diào)抑制喉癌細(xì)胞株Hep-2的增殖、遷移侵襲能力及VM表達(dá),增加喉癌細(xì)胞Hep-2對(duì)順鉑的敏感性,其機(jī)制可能與抑制CD147、VEGF、MMP-9的表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R739.65

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1 鄭煥英,陳秋霞,方苓,黃吉城,鄭夔,江立敏,李暉,周惠瓊,萬卓越,刁麗梅,陳經(jīng)雕,張萬里,黃平,柯昌文,張勤奮,黃小俊,崔金明,張景強(qiáng);Hep-2細(xì)胞在嚴(yán)重急性呼吸綜合征病原學(xué)檢測(cè)中的應(yīng)用研究[J];華南預(yù)防醫(yī)學(xué);2003年05期

2 劉榮耀;王家東;;槲皮素對(duì)人喉鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系Hep-2的作用[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2008年04期

3 劉輝峰,徐世正,張春榮,鄢素華;5-氨基酮戊酸處理后HEp-2細(xì)胞的光敏感性研究[J];中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志;2003年01期

4 高秀麗,程萍,劉杰麟;紫珠果實(shí)提取成分對(duì)Hep-2細(xì)胞株的抑制作用[J];貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2001年06期

5 陳建明;趙菁;葛莉偉;;干擾素-γ對(duì)喉癌Hep-2細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2011年03期

6 張巖巖;康健;;中藥艾迪誘導(dǎo)人喉癌細(xì)胞Hep-2凋亡的研究[J];軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào);2012年01期

7 劉巍巍,曾宗淵,肖錫賓;TPA處理增強(qiáng)喉鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞株Hep-2細(xì)胞的增殖[J];臨床耳鼻咽喉科雜志;2005年17期

8 趙永強(qiáng);馮慧偉;于克娜;石梅;范獻(xiàn)良;;塞來昔布誘導(dǎo)喉癌Hep-2細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[J];山東大學(xué)耳鼻喉眼學(xué)報(bào);2014年02期

9 虞游;張艷歐;趙文鋮;白堅(jiān);陳建明;;pEGFP-IFI16表達(dá)載體構(gòu)建及其表達(dá)對(duì)Hep-2細(xì)胞增殖的影響[J];杭州師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2013年01期

10 孫紅村;郭明麗;王俊閣;張建耀;;穩(wěn)定轉(zhuǎn)染重組信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3對(duì)喉癌Hep-2細(xì)胞侵襲性的影響[J];中國(guó)眼耳鼻喉科雜志;2013年02期

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1 張立坤;李曉明;;XIAP反義寡脫氧核苷酸誘導(dǎo)Hep-2細(xì)胞株凋亡及對(duì)順鉑化療的增敏作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)耳鼻咽喉-頭頸外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下）[C];2007年

2 夏育民;張毅;劉小明;車巍;熊臘元;;溫度變化對(duì)δ-氨基酮戊酸誘導(dǎo)的Hep-2細(xì)胞光動(dòng)力學(xué)效應(yīng)的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十五次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

3 陳始明;陶澤璋;劉劍鋒;肖伯奎;;小發(fā)夾RNA干擾hTERT基因誘導(dǎo)Hep-2細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[A];湖北省抗癌協(xié)會(huì)頭頸腫瘤專業(yè)委員會(huì)第四次學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2005年

4 彭青青;王宏斌;王金發(fā);;中國(guó)馬尾松樹皮提取物誘導(dǎo)喉癌細(xì)胞HEp-2凋亡的研究[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)大會(huì)、青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2005年

5 李英慧;李福才;王曦;趙旭;孫開來;;人喉鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系Hep-2中心體擴(kuò)增與染色體不穩(wěn)定的研究[A];中國(guó)的遺傳學(xué)研究——中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)第七次代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];2003年

6 高嶺;董明敏;曹華;程秀蓮;;丁酸鈉對(duì)Hep-2細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制和誘導(dǎo)凋亡作用及其對(duì)端粒酶活性的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)耳鼻咽喉-頭頸外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下）[C];2007年

7 周水洪;程瑛;范駿;陳曉明;汪審清;程可佳;王勤瑛;俞云松;;葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1反義寡核苷酸對(duì)喉癌Hep-2細(xì)胞增殖的影響[A];浙江省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)耳鼻咽喉科專業(yè)委員會(huì)第六次學(xué)術(shù)年會(huì)暨省級(jí)繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2008年

8 田家軍;徐偉;于亮;逯素梅;;降低TWIST的表達(dá)抑制喉癌Hep-2細(xì)胞的侵襲能力[A];2010全國(guó)耳鼻咽喉頭頸外科中青年學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

9 許偉民;胡勁;葉鈺華;;三氧化二砷和維生素C聯(lián)合誘導(dǎo)喉癌細(xì)胞株Hep-2調(diào)亡的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)耳鼻咽喉-頭頸外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（下）[C];2007年

10 劉濟(jì)生;楊吉成;盛偉華;;三氧化二砷誘導(dǎo)喉癌Hep-2細(xì)胞凋亡的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)耳鼻咽喉-頭頸外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編（上）[C];2007年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 李yN寧;共轉(zhuǎn)染bcl-2、survivin基因shRNA對(duì)紫杉醇誘導(dǎo)的喉癌Hep-2細(xì)胞影響的研究[D];吉林大學(xué);2016年

2 張赫佳;姜黃素對(duì)喉癌Hep-2細(xì)胞的化療增敏作用及機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2014年

3 劉平平;腫瘤干細(xì)胞在喉癌Hep-2細(xì)胞化療抵抗中的作用及機(jī)制研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2009年

4 張勇;羅格列酮和曲格列酮對(duì)人喉癌Hep-2細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];鄭州大學(xué);2010年

5 叢林海;金納米鏈及Anti-EGFR/Au共軛物近紅外熱療對(duì)人喉癌Hep-2細(xì)胞凋亡作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2011年

6 張浩;靶向AURKA的siRNA抑制喉癌HEp-2細(xì)胞生長(zhǎng)的體內(nèi)外研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

7 李云川;白藜蘆醇誘導(dǎo)喉癌Hep-2細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2005年

8 靳紅;生長(zhǎng)抑素受體SSTR2和SSTR5在喉癌中的表達(dá)及奧曲肽對(duì)喉癌Hep-2細(xì)胞增殖的抑制作用[D];吉林大學(xué);2007年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王敏;白藜蘆醇對(duì)Hep-2細(xì)胞的自噬及機(jī)制研究[D];南華大學(xué);2015年

2 何曉麗;蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子對(duì)喉癌細(xì)胞株Hep-2增殖的影響及相關(guān)機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

3 魏蕾;下調(diào)FoxM1表達(dá)對(duì)人喉癌Hep-2細(xì)胞順鉑敏感性的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

4 王致娟;siRNA抑制Cyclophilin A基因?qū)眵[癌細(xì)胞Hep-2增殖、轉(zhuǎn)移及順鉑敏感性的作用[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

5 張全明;半枝蓮水提取物對(duì)Hep-2細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡及抑制增殖的研究[D];華中科技大學(xué);2010年

6 曹彥洋;姜黃素對(duì)人喉癌Hep-2細(xì)胞放療敏感性的實(shí)驗(yàn)研究[D];河南科技大學(xué);2013年

7 魯昊;紫草素對(duì)人喉癌Hep-2細(xì)胞生長(zhǎng)作用的研究[D];遼寧醫(yī)學(xué)院;2011年

8 朱飛;利巴韋林對(duì)喉癌hep-2細(xì)胞的放療增敏作用初步研究[D];吉林大學(xué);2015年

9 李黎;基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑伊洛馬司他聯(lián)合化療藥物對(duì)人喉癌Hep-2細(xì)胞的影響[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2013年

10 于亮;TWIST在紫杉醇誘導(dǎo)喉癌Hep-2細(xì)胞凋亡中的作用研究[D];山東大學(xué);2010年

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