本文關(guān)鍵詞：下調(diào)MAEL和上調(diào)CDH1基因表達(dá)抑制肝癌HepG2細(xì)胞的遷移和增殖研究

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【摘要】：目的:本文旨在聯(lián)合下調(diào)MAEL和上調(diào)CDH1基因的表達(dá)研究其對(duì)肝癌Hep G2細(xì)胞遷移、侵襲和增殖的作用。方法:通過(guò)轉(zhuǎn)染試劑,靶向MAEL基因的si RNA和靶向CDH1基因啟動(dòng)子的sa RNA轉(zhuǎn)染到Hep G2細(xì)胞中。按照轉(zhuǎn)染混合物的不同將細(xì)胞劃分為五組,分別是CT組、NC組、778組、215組和778+215組。采用熒光定量PCR法檢測(cè)MAEL和CDH1基因m RNA的表達(dá)情況,Western Blot法檢測(cè)MAEL、E-鈣黏蛋白、Caspase-3和Bcl-2的蛋白表達(dá)情況,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力,劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力,Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力。結(jié)果:si RNA-778和sa RAN-215處理Hep G2細(xì)胞后,熒光定量PCR結(jié)果顯示,si RNA-778顯著下調(diào)MAEL基因m RNA的表達(dá)(p0.05);sa RNA-215顯著上調(diào)CDH1基因m RNA的表達(dá)(p0.05)。蛋白質(zhì)免疫印跡檢測(cè)結(jié)果顯示,MAEL和Bcl-2的蛋白表達(dá)量顯著降低(p0.05);E-鈣黏蛋白和Caspas-3蛋白的表達(dá)量顯著升高(p0.05)。細(xì)胞增殖能力和劃痕愈合率顯著降低(p0.05),穿過(guò)基底膜的Hep G2細(xì)胞個(gè)數(shù)顯著減少(p0.05),并且聯(lián)合轉(zhuǎn)染對(duì)細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲的抑制效果更佳(p0.05)。結(jié)論:si RNA-778能有效下調(diào)MAEL基因的表達(dá),sa RNA-215有效上調(diào)CDH1基因的表達(dá);Hep G2細(xì)胞的遷移和侵襲能力降低、增殖減少,這些現(xiàn)象發(fā)生的機(jī)理可能與上皮-間質(zhì)的轉(zhuǎn)化受到抑制相關(guān),并可能通過(guò)Caspas-3/Bcl-2信號(hào)通路增強(qiáng)細(xì)胞的凋亡;si RNA-778和sa RNA-215聯(lián)合應(yīng)用的效果優(yōu)于單基因調(diào)控的效果。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R735.7

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1264229