本文關鍵詞：旋毛蟲ES抗原誘導DC對肝細胞癌預防性作用的實驗研究

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【摘要】：旋毛蟲是一種人獸共患的寄生性線蟲,能夠導致人類以及許多哺乳動物發(fā)生嚴重的疾病,即旋毛蟲病,該病分布廣泛,幾乎遍及全世界。盡管旋毛蟲感染給公共衛(wèi)生和養(yǎng)殖業(yè)帶來種種負面影響,但是旋毛蟲對宿主的免疫調控作用,以及提升宿主對其他疾病的抵抗能力,尤其是對人類自身免疫病和腫瘤的抵抗能力越來越受到廣泛地關注。最近的研究表明,旋毛蟲的排泄/分泌物對多種腫瘤具有一定的抑制作用,這為旋毛蟲應用于抗腫瘤制劑提供了強有力的支持。近年來,癌癥已成為威脅人類生命健康的主要殺手。據統(tǒng)計,在我國,肝癌已成為第二大癌癥,僅次于肺癌。而且,肝癌的預后不良,給臨床治療帶來了巨大的挑戰(zhàn)。因此,尋找高效的抗腫瘤制劑,并配合手術、放療化療方法是目前國內外研究的熱點。本研究從C57BL/6小鼠后肢的股骨和脛骨中分離出了樹突狀細胞的前體細胞,在體外加入一系列的細胞因子對其進行誘導、分化、成熟。并通過普通顯微鏡、掃描電鏡、HE染色以及流式細胞術等方法對其鑒定,證明了所分離提取、誘導培養(yǎng)的細胞為C57BL/6小鼠髓源性DC。將不同發(fā)育時期的旋毛蟲ESP誘導的C57BL/6小鼠髓源性DC腹腔注射到小鼠H22肝細胞癌模型中,每隔2天,尾靜脈采血,收集血清,檢測血清中IL-4、IL-6、IL-10以及IFN-r的表達情況。待最后一次免疫2周后處死小鼠,取瘤,計算抑瘤率。結果表明,旋毛蟲ESP誘導的C57BL/6小鼠髓源性DC對小鼠H22肝細胞癌具有一定的預防性作用效果。實驗組中抑瘤率達到了46.91%,具有臨床治療意義。并且,實驗組小鼠的體重增加低于對照組,剖檢發(fā)現,實驗組小鼠的平均瘤重為1.8234g,而對照組為3.4348g;實驗組小鼠血清IL-4和IL-10的表達量均值比對照組高,而IL-6以及IFN-r的表達量比對照組均值偏低,以上結果均表明旋毛蟲ESP誘導的C57BL/6小鼠髓源性DC對小鼠H22肝細胞癌具有一定的預防性作用�；谝陨系难芯�,我們接下來分離健康成年人外周靜脈血中的單核細胞(PBMC),在體外加入一系列的細胞因子對其進行誘導分化為成熟的DC。采用普通顯微鏡、掃描電鏡、HE染色以及流式細胞術等方法對其進行分析鑒定,均符合人外周靜脈血DC的特征。進而將旋毛蟲ESP誘導的健康成年人外周靜脈血DC腹腔注射到人H7402肝細胞癌裸鼠腫瘤模型中,每3天稱量各組小鼠的體重,待最后一次注射2周后,處死裸鼠,取瘤,計算抑瘤率。結果表明,實驗組小鼠體重增長低于空白對照組;實驗組小鼠的平均瘤重為0.9089,也低于空白對照組的1.4437;實時熒光定量PCR檢測小鼠脾臟中細胞因子的變化,實驗組小鼠血清IL-4和IL-10的表達量均值比空白對照組高,而IL-6以及IFN-r的表達量比空白對照組均值偏低,結果均與小鼠H22肝細胞癌的結果相一致。從而一致的表明了旋毛蟲ESP誘導的DC對肝細胞癌具有一定的預防性作用效果。本研究成功分離誘導了C57BL/6小鼠髓源性DC以及健康成年人外周靜脈血DC,通過不同的方式鑒定均符合所提取DC的特征。旋毛蟲ESP誘導的DC對小鼠H22及人H7402肝細胞癌均表現出了良好的預防性效果。本研究為旋毛蟲蟲體及其ESP作為一種外來性抗原,誘導機體DC,發(fā)揮了良好的免疫作用,為其進一步應用于抗腫瘤制劑,提供了一定的研究思路與理論參考,并使其作為一種生物制劑應用于臨床成為了可能。
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R73-36

【參考文獻】

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