本文關(guān)鍵詞：尼洛替尼聯(lián)合三氧化二砷對(duì)K562細(xì)胞增殖及凋亡的影響

  更多相關(guān)文章： 慢性髓細(xì)胞白血病 尼洛替尼 三氧化二砷 增殖 凋亡

【摘要】：目的:本研究通過(guò)觀察尼洛替尼(AMN107)聯(lián)合三氧化二砷(ATO)對(duì)慢性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞株K562細(xì)胞增殖及凋亡的影響,比較藥物干預(yù)前后BCR-ABL基因表達(dá)水平的變化,旨在探討兩藥是否具有協(xié)同作用,并進(jìn)一步探討其作用機(jī)制。為尋找慢性髓細(xì)胞白血病治療新方法提供理論基礎(chǔ)。方法:體外培養(yǎng)K562細(xì)胞,分為對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組。對(duì)照組只加培養(yǎng)基及細(xì)胞;實(shí)驗(yàn)組分為AMN107組、ATO組和AMN107+ATO組。用不同濃度的AMN107(2.5、5.0、10.0μmol/L)、ATO(1.0、2.5、5.0μmol/L)和AMN107+ATO(選擇AMN107組和ATO組的最佳濃度)連續(xù)作用于K562細(xì)胞72h。MTT法檢測(cè)藥物對(duì)K562細(xì)胞增殖的影響;Annexin V-FITC/PI染色法流式細(xì)胞儀檢測(cè)藥物對(duì)K562細(xì)胞凋亡的影響;流式細(xì)胞儀檢測(cè)藥物對(duì)K562細(xì)胞的細(xì)胞周期的影響;RT-PCR檢測(cè)各組K562細(xì)胞BCR-ABL融合基因表達(dá)水平的變化。統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件spss13.0分析結(jié)果。結(jié)果:1 AMN107和ATO對(duì)K562細(xì)胞增殖的影響同一時(shí)間、不同濃度AMN107作用于K562細(xì)胞,細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率隨濃度的增加而逐漸升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同一濃度、不同時(shí)間點(diǎn)AMN107作用于K562細(xì)胞,細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率隨時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同一時(shí)間、不同濃度ATO作用于K562細(xì)胞,細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率隨濃度的增加而逐漸升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同一濃度、不同時(shí)間點(diǎn)ATO作用于K562細(xì)胞,細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率隨時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同一濃度,不同時(shí)間點(diǎn)的AMN107聯(lián)合ATO作用于K562細(xì)胞,細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率隨時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸增加,較兩藥單獨(dú)應(yīng)用能更快達(dá)到IC50,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同一時(shí)間點(diǎn),AMN107聯(lián)合ATO較兩藥單獨(dú)應(yīng)用細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率更高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2 AMN107和ATO對(duì)K562細(xì)胞凋亡的影響1umol/L ATO作用于K562細(xì)胞48h后細(xì)胞凋亡率較對(duì)照組無(wú)明顯差異(P0.05)。2.5umol/L和5umol/L ATO作用于K562細(xì)胞48h后細(xì)胞凋亡率較對(duì)照組明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且細(xì)胞凋亡率隨濃度的增加而增加。不同濃度AMN107作用于K562細(xì)胞,細(xì)胞凋亡率隨濃度的增加而逐漸增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。AMN107聯(lián)合ATO組較兩藥單獨(dú)應(yīng)用細(xì)胞凋亡率更高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3 ATO對(duì)K562細(xì)胞周期分布的影響流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期分布,結(jié)果顯示,不同濃度ATO作用于K562細(xì)胞后,停滯在G0/G1期的細(xì)胞比例隨藥物濃度的增加逐漸增加,S期、G2/M期細(xì)胞比例逐漸減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4 AMN107和ATO對(duì)K562細(xì)胞中BCR-ABL基因表達(dá)的影響同一時(shí)間、不同濃度AMN107作用于K562細(xì)胞,BCR-ABL基因的表達(dá)水平隨藥物濃度的增加呈逐漸下降的趨勢(shì),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同一濃度、不同時(shí)間點(diǎn)AMN107作用于K562細(xì)胞,BCR-ABL基因的表達(dá)水平隨時(shí)間的延長(zhǎng)呈逐漸下降的趨勢(shì),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同一時(shí)間、不同濃度ATO作用于K562細(xì)胞,BCR-ABL基因的表達(dá)水平隨藥物濃度的增加呈逐漸下降的下降的趨勢(shì),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同一濃度、不同時(shí)間點(diǎn)ATO作用于K562細(xì)胞,BCR-ABL基因的表達(dá)水平隨時(shí)間的延長(zhǎng)呈逐漸下降的趨勢(shì),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同一濃度,不同時(shí)間點(diǎn)AMN107聯(lián)合ATO作用于K562細(xì)胞,BCR-ABL基因的表達(dá)水平隨時(shí)間的延長(zhǎng)呈逐漸下降的趨勢(shì),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。同一時(shí)間點(diǎn),AMN107聯(lián)合ATO組能夠較兩藥單獨(dú)應(yīng)用更深的抑制BCR-ABL基因的表達(dá)水平,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1 AMN107對(duì)K562細(xì)胞具有抑制增殖、誘導(dǎo)凋亡的作用且呈時(shí)間與劑量依賴性,其機(jī)制可能與BCR-ABL基因表達(dá)下調(diào)有關(guān)。2 ATO對(duì)K562細(xì)胞具有抑制增殖、誘導(dǎo)凋亡的作用且呈時(shí)間與劑量依賴性,其機(jī)制可能與ATO促使停滯在G0/G1期的K562細(xì)胞比例增加,BCR-ABL基因表達(dá)下調(diào)有關(guān)。3 AMN107與ATO兩者聯(lián)合作用于K562細(xì)胞,細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率和凋亡率較兩者單獨(dú)應(yīng)用效果更佳,表明AMN107與ATO具有協(xié)同作用,其機(jī)制可能與兩者通過(guò)各自不同的作用途徑共同下調(diào)BCR-ABL基因表達(dá)有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R733.72

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 江文華;解敏君;唐小萬(wàn);王嫻婷;陳莉莉;;尼洛替尼治療慢性粒細(xì)胞白血病42例[J];中國(guó)藥業(yè);2013年09期

2 魏永強(qiáng);張賢;陳偉偉;曹睿;陰常欣;馮茹;劉啟發(fā);孟凡義;;尼洛替尼治療伊馬替尼耐藥或不耐受的慢性粒細(xì)胞白血病的長(zhǎng)期隨訪研究[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2012年07期

3 郭琳;王強(qiáng);;PI3K/Akt/mTOR信號(hào)傳導(dǎo)通路與惡性腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2009年08期

4 張亞莉;魏虎來(lái);孫利軍;;三氧化二砷誘導(dǎo)K562/ADM細(xì)胞凋亡過(guò)程中對(duì)bcl-2、survivin、ROS表達(dá)的影響[J];中國(guó)腫瘤;2008年06期

5 張旭輝,張日,朱子玲,王瑋;三氧化二砷誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡的機(jī)制探討[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2004年05期

6 李俊娥,鄔維禮,王振義,孫關(guān)林;As_2S_2誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡及其機(jī)制(英文)[J];Acta Pharmacologica Sinica;2002年11期

7 張日,支雅軍,陶瑞芳,仇紅霞,朱子玲,夏學(xué)鳴,張忠華;亞砷酸鈉治療加速期慢性粒細(xì)胞性白血病的療效觀察[J];臨床腫瘤學(xué)雜志;2000年04期

，

本文編號(hào)：1225745