本文關鍵詞：尼洛替尼聯合三氧化二砷對K562細胞增殖及凋亡的影響

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【摘要】：目的:本研究通過觀察尼洛替尼(AMN107)聯合三氧化二砷(ATO)對慢性髓細胞白血病細胞株K562細胞增殖及凋亡的影響,比較藥物干預前后BCR-ABL基因表達水平的變化,旨在探討兩藥是否具有協同作用,并進一步探討其作用機制。為尋找慢性髓細胞白血病治療新方法提供理論基礎。方法:體外培養(yǎng)K562細胞,分為對照組與實驗組。對照組只加培養(yǎng)基及細胞;實驗組分為AMN107組、ATO組和AMN107+ATO組。用不同濃度的AMN107(2.5、5.0、10.0μmol/L)、ATO(1.0、2.5、5.0μmol/L)和AMN107+ATO(選擇AMN107組和ATO組的最佳濃度)連續(xù)作用于K562細胞72h。MTT法檢測藥物對K562細胞增殖的影響;Annexin V-FITC/PI染色法流式細胞儀檢測藥物對K562細胞凋亡的影響;流式細胞儀檢測藥物對K562細胞的細胞周期的影響;RT-PCR檢測各組K562細胞BCR-ABL融合基因表達水平的變化。統(tǒng)計學軟件spss13.0分析結果。結果:1 AMN107和ATO對K562細胞增殖的影響同一時間、不同濃度AMN107作用于K562細胞,細胞生長抑制率隨濃度的增加而逐漸升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。同一濃度、不同時間點AMN107作用于K562細胞,細胞生長抑制率隨時間的延長而逐漸增加,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。同一時間、不同濃度ATO作用于K562細胞,細胞生長抑制率隨濃度的增加而逐漸升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。同一濃度、不同時間點ATO作用于K562細胞,細胞生長抑制率隨時間的延長而逐漸增加,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。同一濃度,不同時間點的AMN107聯合ATO作用于K562細胞,細胞生長抑制率隨時間的延長而逐漸增加,較兩藥單獨應用能更快達到IC50,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。同一時間點,AMN107聯合ATO較兩藥單獨應用細胞生長抑制率更高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2 AMN107和ATO對K562細胞凋亡的影響1umol/L ATO作用于K562細胞48h后細胞凋亡率較對照組無明顯差異(P0.05)。2.5umol/L和5umol/L ATO作用于K562細胞48h后細胞凋亡率較對照組明顯增加,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),且細胞凋亡率隨濃度的增加而增加。不同濃度AMN107作用于K562細胞,細胞凋亡率隨濃度的增加而逐漸增加,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。AMN107聯合ATO組較兩藥單獨應用細胞凋亡率更高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。3 ATO對K562細胞周期分布的影響流式細胞術檢測細胞周期分布,結果顯示,不同濃度ATO作用于K562細胞后,停滯在G0/G1期的細胞比例隨藥物濃度的增加逐漸增加,S期、G2/M期細胞比例逐漸減少,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。4 AMN107和ATO對K562細胞中BCR-ABL基因表達的影響同一時間、不同濃度AMN107作用于K562細胞,BCR-ABL基因的表達水平隨藥物濃度的增加呈逐漸下降的趨勢,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。同一濃度、不同時間點AMN107作用于K562細胞,BCR-ABL基因的表達水平隨時間的延長呈逐漸下降的趨勢,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。同一時間、不同濃度ATO作用于K562細胞,BCR-ABL基因的表達水平隨藥物濃度的增加呈逐漸下降的下降的趨勢,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。同一濃度、不同時間點ATO作用于K562細胞,BCR-ABL基因的表達水平隨時間的延長呈逐漸下降的趨勢,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。同一濃度,不同時間點AMN107聯合ATO作用于K562細胞,BCR-ABL基因的表達水平隨時間的延長呈逐漸下降的趨勢,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。同一時間點,AMN107聯合ATO組能夠較兩藥單獨應用更深的抑制BCR-ABL基因的表達水平,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:1 AMN107對K562細胞具有抑制增殖、誘導凋亡的作用且呈時間與劑量依賴性,其機制可能與BCR-ABL基因表達下調有關。2 ATO對K562細胞具有抑制增殖、誘導凋亡的作用且呈時間與劑量依賴性,其機制可能與ATO促使停滯在G0/G1期的K562細胞比例增加,BCR-ABL基因表達下調有關。3 AMN107與ATO兩者聯合作用于K562細胞,細胞生長抑制率和凋亡率較兩者單獨應用效果更佳,表明AMN107與ATO具有協同作用,其機制可能與兩者通過各自不同的作用途徑共同下調BCR-ABL基因表達有關。
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R733.72

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前7條

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本文編號：1225745