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水通道蛋白9表達水平對三氧化二砷抗肝癌效果的影響

發(fā)布時間:2017-11-24 00:14

  本文關鍵詞:水通道蛋白9表達水平對三氧化二砷抗肝癌效果的影響


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【摘要】:目的:通過將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HepG2肝癌細胞,改變水甘油通道蛋白9 (aquaglyceroporin 9,AQP9)在細胞中的表達,研究其表達水平的改變對三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)誘導肝癌細胞HepG2凋亡及其生物學行為的影響。方法: (1)采用四甲基偶氮唑鹽法(methylthiazolyl tetrazolium,MTT)篩選As203對肝癌細胞HepG2增殖抑制作用的IC50值;(2)將重組質(zhì)粒pEGFP-N1-AQP9和pshRNA-AQP9a轉(zhuǎn)染肝癌細胞,通過熒光顯微鏡,RT-PCR和Western blot法檢測其表達:(3)將As203加入轉(zhuǎn)染后及未處理的HepG2細胞,MTT法檢測細胞增殖抑制率;流式細胞儀分析周期和凋亡情況;Franswell實驗驗證遷移侵襲能力的改變;酶標儀檢測Caspase-3活性。結果:(1)在熒光顯微鏡下可觀察到綠色熒光的表達,重組質(zhì)粒對AQP9有明顯的過表達及抑制表達作用; (2)轉(zhuǎn)染pEGFP-N1-AQP9組肝癌細胞的增殖抑制作用明顯大于單純As203處理組,侵襲及遷移能力顯著減弱,細胞周期停滯在Go/G1期,凋亡明顯多于單純As203處理組,Caspase-3活性最高。(3)轉(zhuǎn)染pshRNA-AQP9a組細胞的增殖抑制作用及Caspase-3活性小于單純As203處理組,侵襲遷移能力強于單純As203處理組,細胞周期停滯在Go/G1期的數(shù)量及凋亡率較少。結論:重組質(zhì)粒pEGFP-N1-AQP9轉(zhuǎn)染HepG2肝癌細胞后,比單純使用As203抗肝癌抑制細胞增殖能力強,凋亡率增高,使肝癌細胞HepG2對As203化療的敏感性增強,從而影響As203對肝癌的治療效果。
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R735.7

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本文編號:1220341

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