本文關(guān)鍵詞：EZH2和miR-127在中國尤文肉瘤患者中的表達(dá)特征及預(yù)后相關(guān)性分析

  更多相關(guān)文章： EZH2 miR-127-3p 尤文肉瘤 預(yù)后

【摘要】：[背景目的]尤文肉瘤(Ewing's sarcoma, EWS)是兒童和青少年第二大常見的原發(fā)性惡性骨腫瘤,平均發(fā)病年齡在15歲,是尤文肉瘤家族腫瘤(ESFT)的重要一員。EWS具有高轉(zhuǎn)移的特性,約25%的患者在診斷時已發(fā)生轉(zhuǎn)移。此外,EWS患者的預(yù)后很不樂觀,轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的EWS患者,5年無病生存率僅為10%-20%。因此,尋找新型的生物預(yù)后標(biāo)記物對EWS患者至關(guān)重要。EZH2(enhancer of zeste homolog2)是果蠅zeste基因增強子的人類同源基因,屬pcG (polycomb group)基因家族的重要成員之一,在癌癥的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了重要作用。EZH2基因通過特定的SET結(jié)構(gòu)域?qū)诵◇w組蛋白H3的27位賴氨酸(H3K27)進行甲基化修飾,然后觸發(fā)PRC1復(fù)合物成分在特定基因位點聚集從而導(dǎo)致下游靶基因沉默,包括抑癌基因的沉默等。近年來研究發(fā)現(xiàn),EZH2在前列腺癌、乳腺癌、膀朧癌、肝細(xì)胞癌、大腸癌、胃癌等多種惡性腫瘤中高表達(dá)。但是目前尚未有報道涉及EZH2在EWS患者組織中的表達(dá)及對預(yù)后的影響。微小RNA (microRNAs, miRNAs)是一類內(nèi)源性的單鏈非編碼小分子RNA,約有18-25個核苷酸分子。通過與多種靶基因3’-UTR區(qū)配對,調(diào)控下游靶基因的表達(dá),在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了重要作用。miRNAs即可以作為癌基因促進惡性腫瘤的進展,也可以發(fā)揮抑癌基因抑制腫瘤的生長。本課題研究的目的是檢測micoRNAs在EWS中的差異性表達(dá),分析miR-127-3p 與 P53、Ki-67和EGFR腫瘤分子的相關(guān)性及病人各臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系,為EWS患者發(fā)現(xiàn)新的治療靶點和生物預(yù)后標(biāo)志物提供實驗依據(jù)。本論文主要從以下二部分進行研究：1、miRNAs在EWS組織中的差異性表達(dá)及miR-127-3p與P53、EGFR和Ki-67腫瘤分子的相關(guān)性分析及臨床意義探討2、EZH2在EWS組織中的表達(dá)特征及預(yù)后相關(guān)性分析。[研究方法]收集81例尤文肉瘤／原始神經(jīng)外胚層腫瘤(Ewing sarcoma/pr--imitive neuroectodermal tumor, EWS/PNET)和其他小圓細(xì)胞惡性腫瘤石蠟標(biāo)本并構(gòu)建組織芯片,使用熒光原位雜交(FISH)檢測尤文肉瘤斷裂位點1(EWSR1)基因易位；分別選擇3例生存時間不足一年和超過3年的石蠟標(biāo)本送公司做microRNAs芯片,尋找EWS組織中差異表達(dá)的microRNAs;應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測腫瘤組織標(biāo)本中EZH2,P53、Ki-67和EGFR的表達(dá),并分析miR-127-3p和EZH2與P53、Ki-67、EGFR的相關(guān)性,以及與EWS患者預(yù)后的關(guān)系,從而發(fā)現(xiàn)新型生物預(yù)后標(biāo)記物。EZH2和miR-127-3p對細(xì)胞功能的影響通過增殖、遷移、侵襲等試驗來檢測。[結(jié)果分析]1、microRNAs芯片結(jié)果顯示多個差異表達(dá)的microRNAs,根據(jù)P值和信號值的大小,選擇前五個microRNAs(hsa-miR-127-3p,hsa-miR-369-5p, hsa-miR-532-5p, hsa-miR-376c-3p, hsa-miR-497-5p)進行驗證,發(fā)現(xiàn)miR-127-3p的表達(dá)與EWS患者的預(yù)后關(guān)系最為密切,并具有統(tǒng)計學(xué)意義(p=0.002),且miR-123-3p的表達(dá)與生存時間相關(guān)(p=0.002)。Cox多因素分析顯示,miR-127-3p可以作為EWS患者預(yù)后的獨立危險因子(HR:0.328,HR：0.102-1.055,P=0.016)。在細(xì)胞水平上,miR-127-3p可以抑制EWS細(xì)胞的遷移和侵襲能力,提示miR-127-3p在EWS發(fā)生發(fā)展中起抑癌基因的作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)EZH2與miR-127-3p具有負(fù)相關(guān)關(guān)系。2、EZH2蛋白在EWS組織中的高表達(dá)與肺轉(zhuǎn)移(p=0.046)、生存時間(p=0.004)及Ki-67的表達(dá)密切相關(guān)(P=0.007)。K-M分析顯示,EZH2高表達(dá)與患者不良預(yù)后顯著相關(guān)(P=0.006)；Cox多因素分析表明,EZH2是影響患者總體生存的獨立預(yù)后判定因子(HR=3.467,95%CI=1.138-10.563,P=0.029)。細(xì)胞水平上,我們發(fā)現(xiàn)EZH2干擾后明顯降低了EWS細(xì)胞的遷移、侵襲和增殖能力,提示EZH2在EWS發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮癌基因的作用。[實驗結(jié)論]EZH2和miR-127-3p可以作為判斷EWS預(yù)后的新型生物標(biāo)志物,并有可能成為EWS治療的分子靶點。同時,miR-127-3p可以抑制EWS的發(fā)生和發(fā)展過程,發(fā)現(xiàn)EZH2和miR-127-3p具有一定的負(fù)相關(guān)關(guān)系。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R738

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李南,郭衛(wèi),楊榮利,李健,郭義;尤文肉瘤患者外周血中腫瘤細(xì)胞的檢測及其臨床意義[J];中國骨腫瘤骨病;2004年01期

2 劉雙利,李寶山,章雪松,吳金河;嬰兒尤文肉瘤1例[J];實用手外科雜志;2004年03期

3 馬超,孫新臣;局部性尤文肉瘤綜合治療臨床分析[J];現(xiàn)代醫(yī)學(xué);2004年06期

4 郭龍春;;額骨尤文肉瘤1例[J];中國醫(yī)學(xué)影像技術(shù);2010年07期

5 孫揚;;尤文肉瘤的預(yù)后分析[J];山東醫(yī)藥;2011年40期

6 馮寶才;嬰兒下肢尤文肉瘤治療的雙關(guān)論法[J];國外醫(yī)學(xué)(兒科學(xué)分冊);1987年03期

7 趙正據(jù);成昊;向一鳴;吳劍;羅菊英;;血管內(nèi)皮生長因子對尤文肉瘤的診斷及預(yù)后價值[J];西南國防醫(yī)藥;2014年01期

8 張震宇,楊群,王立峰,張信英;尤文肉瘤P_(15)基因蛋白的表達(dá)研究[J];黑龍江醫(yī)學(xué);2000年09期

9 曾行德,于成福,馬著彬,成官迅,劉民英;骨尤文肉瘤的影像診斷探討[J];中國醫(yī)學(xué)影像技術(shù);2000年03期

10 邱士軍,張雪林,曾行德,李祖國;長骨硬化型尤文肉瘤一例[J];中華放射學(xué)雜志;2002年12期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 龐超楠;袁慧書;;脊柱尤文肉瘤/原始神經(jīng)外胚層腫瘤與郎格罕細(xì)胞組織細(xì)胞增生癥的影像學(xué)鑒別診斷[A];中華醫(yī)學(xué)會第十八次全國放射學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

2 張婧;;RS-99方案治療兒童尤文肉瘤30例療效報告[A];2012年江浙滬兒科學(xué)術(shù)年會暨浙江省醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會學(xué)術(shù)年會、兒內(nèi)科疾病診治新進展國家級學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 張希英;EZH2和miR-127在中國尤文肉瘤患者中的表達(dá)特征及預(yù)后相關(guān)性分析[D];山東大學(xué);2016年

2 曾琳;68例尤文肉瘤家族臨床特征及預(yù)后影響因素分析[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2016年

3 馮崗;尤文肉瘤融合基因介導(dǎo)的白喉毒素表達(dá)載體構(gòu)建及其作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2003年

4 張中卒;let-7a在尤文肉瘤發(fā)生發(fā)展中的功能及其機制研究[D];南昌大學(xué);2014年

5 陳文昭;尤文肉瘤EWS-FLI1基因原核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定[D];南昌大學(xué);2010年

6 趙忠全;EWS-FLI1介導(dǎo)白喉毒素表達(dá)對尤文肉瘤移植瘤殺傷作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年

，

本文編號：1220506