本文關(guān)鍵詞：石墨烯—二氧化鈦復(fù)合物生物毒性研究

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【摘要】：目的:為了考察石墨烯-二氧化鈦復(fù)合物(GR-Ti O2)的毒性,以溶菌酶(LYSO)和肝細(xì)胞(HL-7702)為研究對(duì)象,以二氧化鈦(Ti O2)作對(duì)照,研究GR-Ti O2對(duì)LYSO活性的影響和HL-7702細(xì)胞的毒性效應(yīng),初步探討GR-Ti O2對(duì)HL-7702細(xì)胞的毒性作用機(jī)制。為了考察光催化GR-Ti O2體內(nèi)的抗腫瘤活性,建立宮頸癌裸鼠移植瘤模型,觀察光催化GR-Ti O2體內(nèi)對(duì)宮頸癌的作用。方法:采用紫外光譜、熒光光譜、同步熒光光譜、三維熒光光譜和圓二色譜等方法結(jié)合,以納米Ti O2作對(duì)照,研究GR-Ti O2與LYSO的相互作用,通過酶活性實(shí)驗(yàn)測(cè)定GR-Ti O2對(duì)LYSO活性的影響;以HL-7702細(xì)胞為研究對(duì)象,通過MTT比色法,考察GR-Ti O2的細(xì)胞毒性,并對(duì)比GR-Ti O2和Ti O2細(xì)胞毒性大小;通過AO/EB雙熒光染色法探討GR-Ti O2的細(xì)胞毒性機(jī)制,采用激光共聚焦技術(shù),研究GR-Ti O2對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用的方式;將宮頸癌(Si Ha)細(xì)胞接種于BALB/C近交系裸鼠,建立宮頸癌裸鼠移植瘤模型,測(cè)量光照射前后裸鼠腫瘤體積,觀察光催化GR-Ti O2體內(nèi)對(duì)宮頸癌的作用。結(jié)果:紫外和熒光實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,GR-Ti O2與LYSO發(fā)生相互作用,導(dǎo)致LYSO內(nèi)源熒光猝滅,猝滅機(jī)制為靜態(tài)猝滅,作用力類型為氫鍵和范德華力,與納米Ti O2研究結(jié)果一致;同步熒光與圓二色譜結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)GR-Ti O2對(duì)LYSO的構(gòu)象影響更大;酶活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明GR-Ti O2對(duì)LYSO的活性抑制作用強(qiáng)于納米Ti O2;當(dāng)Ti O2和GR-Ti O2濃度為200mg·m L-1時(shí),細(xì)胞活力分別降至76.03%和73.43%,其與對(duì)照組存在顯著差異,二者具有明顯的細(xì)胞毒性,影響細(xì)胞形態(tài),抑制細(xì)胞生長,相同條件下,隨著GR-Ti O2和Ti O2濃度逐漸增大,與細(xì)胞作用時(shí)間延長,二者的細(xì)胞毒性效應(yīng)越顯著;激光共聚焦結(jié)果初步顯示GR-Ti O2能夠通過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),AO/EB熒光雙染色法結(jié)果表明,GR-Ti O2誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,且隨著其濃度增大,與細(xì)胞作用時(shí)間延長,GR-Ti O2誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用增強(qiáng);動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,GR-Ti O2光照射前后裸鼠腫瘤體積由64 mm3減少為51 mm3。結(jié)論:GR-Ti O2和Ti O2均與LYSO發(fā)生相互作用,GR-Ti O2與LYSO結(jié)合更強(qiáng),其對(duì)LYSO構(gòu)象影響更大,對(duì)LYSO活性的抑制作用更強(qiáng),相同條件下,GR-Ti O2的生物毒性強(qiáng)于Ti O2。GR-Ti O2和Ti O2對(duì)HL-7702細(xì)胞的毒性效應(yīng)均存在一定的劑量和時(shí)間依賴性。GR-Ti O2透過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡產(chǎn)生毒性。光催化GR-Ti O2在體內(nèi)對(duì)宮頸癌有一定的抑制作用。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R730.5;TB383.1

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本文編號(hào)：1219244