本文關鍵詞：沉默ARTN基因對胃癌細胞生物學特性的影響及ARTN與胃癌臨床病理特征之間的關系

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【摘要】：目的研究沉默ARTN基因對胃癌細胞增殖、侵襲、轉移等生物學特性的作用,并探索其具體的機制,以及檢測胃癌組織中ARTN基因的表達,結合患者的臨床病理特征,確定ARTN基因與胃癌發(fā)生、發(fā)展的關系。方法使用Western Blot方法檢測胃癌細胞株SGC7901、MGC803、BGC823中ARTN基因的表達量,篩選出ARTN基因表達量最高的一株細胞,合成ARTN基因的干擾RNA(1808,1383,1604三組),并利用基因轉染技術將三組干擾RNA分別轉染進該胃癌細胞株,并用流式細胞儀觀察轉染效率,分別用實時熒光定量PCR和Western Blot方法檢測基因干擾后的ARTN mRNA和蛋白的表達,選出沉默效率最高的那一組干擾RNA序列。沉默ARTN基因后,使用CCK-8的方法檢測細胞增殖活性,采用Transwell小室方法分別檢測細胞遷移能力及侵襲能力,分別用實時熒光定量PCR和Western Blot方法檢測細胞ARTN基因轉染前后胃癌相關基因(P53、MMP-2、MMP-9、VEGF及BCL-2)在RNA水平和蛋白水平上的表達變化。另外用免疫組化和Western Blot分別檢測胃癌組織和正常胃粘膜的ARTN表達。結果MGC803中ARTN基因的表達量最高,干擾RNA序列1383組的沉默效率最高,轉染干擾序列后,ARTN基因在RNA水平和蛋白水平的表達明顯下降,胃癌細胞MGC803在干擾ARTN基因后,細胞增殖能力、遷移能力和侵襲能力均明顯下降,胃癌細胞中P53、MMP-2、MMP-9、VEGF及BCL-2在RNA水平和蛋白水平表達均下調。胃癌組織中的ARTN表達明顯高于正常胃粘膜。結論ARTN基因可以增強胃癌細胞的增殖能力、遷移能力、侵襲能力,沉默ARTN基因可以下調胃癌增殖、轉移和侵襲相關基因的表達。ARTN與胃癌的分化程度、浸潤深度、轉移及TNM分期有關,檢測ARTN的表達可以用來評估胃癌的臨床分期和指導其治療,對胃癌的發(fā)生發(fā)展起到了重要作用。
【學位授予單位】：濟南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2

【參考文獻】

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1 張訓;楊宏;謝清;陳盛強;;EphA2和MMP2在膠質瘤組織表達及其相關性[J];腫瘤學雜志;2011年02期

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本文編號：1218300