發(fā)布時間：2017-11-23 11:24

  本文關(guān)鍵詞：沉默ARTN基因?qū)ξ赴┘?xì)胞生物學(xué)特性的影響及ARTN與胃癌臨床病理特征之間的關(guān)系

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【摘要】：目的研究沉默ARTN基因?qū)ξ赴┘?xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)特性的作用,并探索其具體的機(jī)制,以及檢測胃癌組織中ARTN基因的表達(dá),結(jié)合患者的臨床病理特征,確定ARTN基因與胃癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。方法使用Western Blot方法檢測胃癌細(xì)胞株SGC7901、MGC803、BGC823中ARTN基因的表達(dá)量,篩選出ARTN基因表達(dá)量最高的一株細(xì)胞,合成ARTN基因的干擾RNA(1808,1383,1604三組),并利用基因轉(zhuǎn)染技術(shù)將三組干擾RNA分別轉(zhuǎn)染進(jìn)該胃癌細(xì)胞株,并用流式細(xì)胞儀觀察轉(zhuǎn)染效率,分別用實時熒光定量PCR和Western Blot方法檢測基因干擾后的ARTN mRNA和蛋白的表達(dá),選出沉默效率最高的那一組干擾RNA序列。沉默ARTN基因后,使用CCK-8的方法檢測細(xì)胞增殖活性,采用Transwell小室方法分別檢測細(xì)胞遷移能力及侵襲能力,分別用實時熒光定量PCR和Western Blot方法檢測細(xì)胞ARTN基因轉(zhuǎn)染前后胃癌相關(guān)基因(P53、MMP-2、MMP-9、VEGF及BCL-2)在RNA水平和蛋白水平上的表達(dá)變化。另外用免疫組化和Western Blot分別檢測胃癌組織和正常胃粘膜的ARTN表達(dá)。結(jié)果MGC803中ARTN基因的表達(dá)量最高,干擾RNA序列1383組的沉默效率最高,轉(zhuǎn)染干擾序列后,ARTN基因在RNA水平和蛋白水平的表達(dá)明顯下降,胃癌細(xì)胞MGC803在干擾ARTN基因后,細(xì)胞增殖能力、遷移能力和侵襲能力均明顯下降,胃癌細(xì)胞中P53、MMP-2、MMP-9、VEGF及BCL-2在RNA水平和蛋白水平表達(dá)均下調(diào)。胃癌組織中的ARTN表達(dá)明顯高于正常胃粘膜。結(jié)論ARTN基因可以增強(qiáng)胃癌細(xì)胞的增殖能力、遷移能力、侵襲能力,沉默ARTN基因可以下調(diào)胃癌增殖、轉(zhuǎn)移和侵襲相關(guān)基因的表達(dá)。ARTN與胃癌的分化程度、浸潤深度、轉(zhuǎn)移及TNM分期有關(guān),檢測ARTN的表達(dá)可以用來評估胃癌的臨床分期和指導(dǎo)其治療,對胃癌的發(fā)生發(fā)展起到了重要作用。
【學(xué)位授予單位】：濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張訓(xùn);楊宏;謝清;陳盛強(qiáng);;EphA2和MMP2在膠質(zhì)瘤組織表達(dá)及其相關(guān)性[J];腫瘤學(xué)雜志;2011年02期

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本文編號：1218300