本文關(guān)鍵詞：干細(xì)胞表型、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化、YAP對腸癌術(shù)后患者預(yù)后的影響

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【摘要】：目的：通過對2012年在我院進(jìn)行手術(shù)切除的Ⅱ、Ⅲ期結(jié)直腸癌患者的47例病理標(biāo)本進(jìn)行蘇木精-伊紅染色及免疫組織化學(xué)染色,觀察干細(xì)胞表型CD44、CD133、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白E-cadherin、vimenin以及YAP的表達(dá)情況,并分析以上檢測因素與結(jié)直腸癌的各個高危因素,如年齡、性別、術(shù)前卡氏評分、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、術(shù)前有無腸梗的情況以及患者的3年生存率、無病生存期之間的關(guān)系,從而得出與腸癌術(shù)后患者的病理特性及預(yù)后相關(guān)的因素,為下一步的實驗和Ⅱ、Ⅲ期結(jié)直腸癌患者前期的用藥指導(dǎo)提供依據(jù)。方法：1.收集2012年在我院進(jìn)行結(jié)直腸癌切除術(shù),具有明確的病理結(jié)果、并通過病理或影像學(xué)診斷為Ⅱ、Ⅲ期的結(jié)直腸的47例患者,同時記錄患者的年齡、性別、術(shù)前卡氏評分、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、術(shù)前有無腸梗的情況、術(shù)后有無行輔助化療等情況。2.根據(jù)患者的病理切片選擇相對應(yīng)病理號的石蠟標(biāo)本。2.石蠟標(biāo)本隨機(jī)編號,并制成切片,分為5組。3.將石蠟切片放入烤箱烤片、脫蠟機(jī)脫蠟。4.先對石蠟切片進(jìn)行蘇木精-伊紅染色,將石蠟切片先后用蘇木精及伊紅染色液染色,無水梯度酒精脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片。4.對石蠟切片進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。對石蠟切片進(jìn)行烤片、脫蠟后,對vimentin、CD44、CD133、YAP組切片進(jìn)行高溫高壓修復(fù),對E-cadherin切片進(jìn)行微波修復(fù)。5.按試劑盒說明書步驟加入一抗、二抗及HRP多聚物。6.進(jìn)行DAB顯色。7.蘇木素復(fù)染,分化、返藍(lán),隨機(jī)抽取切片鏡下觀察。8.觀察滿意后進(jìn)行梯度酒精脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片。9、風(fēng)干后,倒置顯微鏡觀察,記錄CD44、CD133、E-cadherin、vimentin、YAP表達(dá)情況,統(tǒng)計觀察結(jié)果。10.在實驗截尾時間進(jìn)行電話隨訪,統(tǒng)計實驗對象的3年生存率及無病生存期。11.將CD44、CD133、E-cadherin、vimentin、YAP表達(dá)情況及各高危因素匯總,使用SPSS22統(tǒng)計軟件分析結(jié)果。結(jié)果：Ⅱ、Ⅲ期腸癌術(shù)后患者的病理標(biāo)本中,E-cadherin表達(dá)陽性率為85.1%,vimentin陽性率為97.9%,CD44陽性率為89.4%,CD133陽性率為71%,YAP陽性率為70%。E-cadherin、CD44、CD133以及YAP的表達(dá)均與患者的無病生存期有顯著關(guān)系(P0.05)。CD133的表達(dá)還與患者術(shù)前有無腸梗阻情況有顯著關(guān)系(P0.05)。另外,YAP與患者術(shù)前卡氏評分、術(shù)前有無腸梗阻情況、TNM分期以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有顯著關(guān)系(P0.05)。結(jié)論：E-caderin、vimentin、CD44、CD133、YAP在Ⅱ、Ⅲ期結(jié)直腸癌患者中高表達(dá),但vimentin的高表達(dá)與臨床及病理特征及預(yù)后無顯著相關(guān)性,CD44、CD133、 E-caderin、YAP的高表達(dá)與臨床及病理特征、預(yù)后之間有顯著相關(guān)性,提示了干細(xì)胞表型、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白及YAP可能存在相互作用,共同對腸癌患者預(yù)后產(chǎn)生影響。
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.34

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本文編號：1217779