本文關(guān)鍵詞：miR-106a在肝細胞癌中高表達并促進肝癌細胞進展的機制研究

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【摘要】：目的::異常表達的mi RNA現(xiàn)廣泛認為在多種惡性腫瘤中發(fā)揮著重要作用,包括肝細胞癌(HCC)。研究表明,異常表達的mi R-106a與多種惡性腫瘤有著密切的相關(guān)性。然而,mi R-106a在HCC中的表達尚未完全闡明。我們的研究試圖將mi R-106a作為HCC的一個潛在診斷和預后的生物標志物,探索mi R-106a的轉(zhuǎn)錄激活的機制和可能的靶基因,以及在體外HCC細胞株中的功能。方法:首選,我們運用q RT-PCR技術(shù)檢測35對HCC組織標本和HCC細胞株中mi R-106a表達水平高低,接著采用BSP甲基化測序技術(shù)檢測HCC細胞株中mi R-106a啟動子區(qū)域Cp G島甲基化狀態(tài),來推測過表達的mi R-106a是否與mi R-106a啟動子區(qū)域低甲基化狀態(tài)有關(guān)。我們進一步運用BSP技術(shù)比較了經(jīng)5-Aza處理前后HCC細胞株中mi R-106a啟動子區(qū)域甲基化狀態(tài)的變化。與此同時,我們運用雙熒光素酶報告基因檢測實驗預測mi R-106a潛在的功能靶基因。最后,體外實驗中探索了mi R-106a對腫瘤細胞的侵襲、凋亡、增殖及細胞周期的影響。結(jié)果::q RT-PCR結(jié)果顯示mi R-106a在HCC癌組織中的表達水平明顯高于癌旁組織。q RT-PCR,BSP檢測分析HCC細胞株中mi R-106a的表達與啟動子區(qū)域甲基化狀態(tài)的相關(guān)性,得出結(jié)論為:mi R-106a啟動子區(qū)域甲基化狀態(tài)與mi R-106a表達水平呈負相關(guān)性。在線生物軟件預測mi R-106a靶基因后,再通過雙熒光素酶報告基因檢測證實TIMP2,TP53INP1,CDKN1A可能為mi R-106a的直接靶基因。體外實驗探索mi R-106a功能,得出結(jié)論:高表達mi R-106a的HCC細胞株相對于低表達mi R-106a的細胞株具有更強的侵襲、抗凋亡、增殖能力,同時具有更短的細胞周期。結(jié)論::本研究中,我們率先證實了mi R-106a在HCC癌組織中高表達,且mi R-106a啟動子區(qū)域甲基化狀態(tài)與mi R-106a表達水平呈負相關(guān)性。TIMP2,TP53INP1和CDKN1A可能為mi R-106a的直接靶基因。同時,過表達mi R-106a的HCC細胞株表現(xiàn)為更強的侵襲、抗凋亡、增殖能力及更短的細胞周期。簡而言之,未來mi R-106a可作為HCC有效的候選生物標志物及治療靶向。
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7

【參考文獻】

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1 Sumadi Lukman Anwar;Ulrich Lehmann;;DNA methylation,microRNAs,and their crosstalk as potential biomarkers in hepatocellular carcinoma[J];World Journal of Gastroenterology;2014年24期

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本文編號：1204282